BTN150801 大肠杆菌BL21 Star

产品简介
大肠杆菌BL21 Star由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持,本品仅用于生物化学研究方面,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多大肠杆菌BL21 Star等克隆与表达产品请联系我司咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:大肠杆菌BL21 Star(DE3)化学感受态细胞
英文名称:E.coli BL21 Star(DE3) Chemical Competent Cell
产品货号:BTN150801
产品规格:10*100μL
BL21 Star(DE3)感受态细胞来源于BL21(DE3)菌株,由特殊工艺制作,使用pUC19质粒检测本产品,转化效率可达10cfu/μg。
BL21 Star(DE3)菌株的特点是含有rne131基因突变体。rne131突变基因能够增强菌株细胞内mRNA的稳定性,从而有效提高蛋白表达能力。本产品主要适用于T7启动子表达载体(如pET 系列)的高水平蛋白表达。
菌株基因型为:F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm rne131(DE3)。
储存条件:干冰运输、-80℃保存,有效期半年。
自备试剂:目的DNA、LB培养基等。
使用方法:
1.从-80℃冰箱中取出感受态细胞,置于冰上解冻。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL,可以根据实际情况分装使用。以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 取 100μL冰上融化的BL21 Star(DE3)感受态细胞,加入目的质粒并轻轻混匀,冰上静置25分钟。
3. 42℃水浴热激45秒,迅速放回冰上并静置2分钟,晃动会降低转化效率。
4. 向离心管中加入700μL不含抗生素的无菌培养基(LB),混匀后37℃,200rpm 复苏60分钟。
5. 取100μL左右菌液涂布于含相应抗生素的LB培养基上。如果转化高浓度的质粒,可以减少涂布的量。
6. 将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
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名称:平末端DNA加A试剂盒
货号:BTN60105
规格:50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dATP 存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴,使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下:

产品特点:
1. 简单,2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。
试剂盒组成:
| 成分 | 规格 |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 50μl |
| 2×Tailing Buffer | 1.25ml |
| 说明书 | 1份 |
储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一:反应前纯化处理:
用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/氯fǎng抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加A反应时,切除掉加上的A尾巴,干扰反应。可以采取胶回收和酚/氯fǎng抽提法等常规方法纯化,zuì后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。
二:加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
| 回收的DNA片段 | 0.2-2ug |
| 2×dA Tailing Buffer | 25μL |
| Taq DNA polymerase(5U/μL) | 1μL |
| 补水到 | 50μL |
| 72℃保温2小时 | |
三:反应后处理
加A反应后,Taq DNA pol
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