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产品详情

WH0198 重组菌落鉴定试剂盒(PCR法)

  • 产品/服务:WH0198 重组菌落鉴定试剂盒(PCR法)
  • 型 号:WH0198
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-05-09
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:1380
产品简介

重组菌落鉴定试剂盒(PCR法)的品牌是百奥莱博,是优质的克隆与表达产品,本制品用于生化实验研究等领域,重组菌落鉴定试剂盒(PCR法)是我司众多优质克隆与表达之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括重组菌落鉴定试剂盒(PCR法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:重组菌落鉴定试剂盒(PCR法)
英文名称:Recombinant colony PCR Identification Kit
产品货号:WH0198
产品规格:50次

本试剂盒包含一管便携式PCR MasterMix预混系统,无需您一一加入各种成分,直接加入筛选到的单菌落,经过1小时左右的PCR反应和电泳检测即可得到重组菌落鉴定的结果。

PCR法鉴定重组菌落。其原理主要是选择合适的引物,根据灵敏的PCR扩增反应,将阳性宿主菌体内载体的目的片段扩增出来,方便地进行鉴定,无需进行菌体的过夜培养和质粒提取,大大地节省了时间和精力。

产品特点:
方便快捷:省去了菌体培养和提取质粒的时间与费用,快速简便地鉴定重组子。
准确灵敏:鉴定的准确度达90%以上。

试剂盒组成:
组分 规格
2×Taq PCR MasterMix 500μl
T7 primer(10μM) 50μl
SP6 primer(10μM) 50μl
ddH2O 1ml

保存条件:-20℃可长期保存,2×Taq PCR MasterMix多次冻融不会影活性。如需经常使用,可存放于4℃。

注意事项:
1.重组菌落鉴定时,挑取单菌落前,应先做好标记,便于鉴定后使用。
2.挑取菌落时,应选择单菌落,不要挑取太多菌体,以免影响PCR结果。
3.设定PCR程序时,请根据插入片段大小决定延伸时间,如果插入片段大小为1kb以下,延伸时间30sec即可,如果片段更长,可按此比例增加延伸时间。

操作步骤:
以下举例仅供参考,实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定zuì佳反应条件。

1.按以下体系配好含有引物的PCR反应液。
成分 使用量
T7 Primer(10μM) 1μl
SP6 Primer(10μM) 1μl
2×Taq PCR MasterMix 10 μl
ddH2O 8 μl

2.将过夜培养的平板上的菌落编号后,使用灭菌的牙签挑取一部分单菌落加入上述反应液,剧烈振荡使菌落充分分散到反应液中。
3.短暂离心收集管中的液体后,进行PCR反应。
4.PCR反应循环的设置:
重组菌落鉴定试剂盒PCR反应循环
  注意:延伸时间请根据插入片段大小调整。
5.结果检测:反应结束后取5 μl反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。

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名称:单细胞裂解液(DNA提取)
货号:BTN130803
规格:1mL
本产品为单细胞DNA提取专用裂解液,本裂解液经多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸结构的稳定。纯化所得DNA可用于全基因组扩增(WGA)等实验。本产品足够使用200次以上。

储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。

名称:胚胎裂解液
货号:BTN130806
规格:1mL
本产品是胚胎培养过程中分离单个胚胎细胞的裂解液。可用于分离得到不同时期的胚胎的单细胞,得到的单细胞可用于各种单细胞分析,核酸提取等实验。

储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。

名称:平末端DNA加A试剂盒
货号:BTN60105
规格:50次
本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转移酶活性,在只有dATP 存在的情况下,在平末端的DNA片段加上一个dA 尾巴,使平末端片段也能被T载体克隆。其流程图如下:
加A试剂盒流程图

产品特点:
1. 简单,2×Tailing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。
3.产物可以直接用于与T载体的连接。

试剂盒组成:
成分 规格
Taq DNA polymerase(5U/μL) 50μl
2×Tailing Buffer 1.25ml
说明书 1份


储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:

一:反应前纯化处理:
用Vent,Deep Vent,Pfu,Pwo等具有3 到5外切活性的DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶的处理过程(如酚/lǜ仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将在加A反应时,切除掉加上的A尾巴,干扰反应。可以采取胶回收和酚/lǜ仿抽提法等常规方法纯化,zuì后溶解在水或TE中,终浓度以0.1μg/μL为宜。
二:加A反应
在干净的0.5mL或1.5mL离心管中,分别加入下列成分:
回收的DNA片段 0.2-2ug
2×dA Tailing Buffer 25μL
Taq DNA polymerase(5U/μL) 1μL
补水到 50μL
72℃保温2小时

三:反应后处理
加A反应后,Taq DNA pol

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