ZN1922 增强型蛋白印迹膜再生液

增强型蛋白印迹膜再生液的品牌是百奥莱博，是优质的免疫检测产品，本制品用于科学研究，本品质量稳定，价位合理，需要增强型蛋白印迹膜再生液等免疫检测产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括增强型蛋白印迹膜再生液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：增强型蛋白印迹膜再生液
产品货号：ZN1922
产品规格：100ml

产品保存：4℃保存，一年有效
产品说明：增强型蛋白印迹膜再生液能够安全地从硝酸纤维素膜和 PVDF 膜上去除一抗和二抗，且不会破坏抗原，从而再次检测化学发光的免疫印迹。与重新跑一个SDS-PAGE 胶比较，不仅省时省力，而且可以消除重新上样而带来的误差，使可比性更强。
产品特点：
1.不需重新制胶电泳
2.节省珍贵样品，在同一张膜上使用相同的样品重新检测
3.，去除效果远优于自制缓冲液
4.温和配方，在抗体剥离及重新检测时不会对靶蛋白造成伤害
5.不含硫醇，无刺鼻气味
产品应用：
1.可重复使用硝酸纤维素膜或PVDF 膜，通过不同的一抗检测不同的标靶
2.可重新检测印迹，改正或优化初次实验中无效的抗体浓度
注意事项：
1.刚从冷冻保存中拿出来会出现 SDS的沉淀，建议温水溶解再使用。
2.建议先检测表达量较低的目的蛋白，用再生液处理后检测表达量高的蛋白。
3.本品适用于 NC 膜和 PVDF 膜，推荐使用 PVDF 膜，效果更佳。
4.本产品适用于 HRP 标记的二抗，且用化学发光法检测的印迹膜。
需要材料：
1.化学发光底物
2.用含 0.05%Tween-20的TBS或PBS
3.用于次和第二次蛋白质印迹实验的一抗和二抗
4.胶片，化学发光成像仪
使用方法：
注：膜可以 4℃保存在 PBS或TBS 中，直到可以进行剥离程序。
1．将再生液用温水溶解或室温平衡至溶解。
2．用 TBS-T或PBS-T 将膜洗10分钟×3次。
3．将印迹膜放入再生液中，室温孵育20-30分钟。使用足够的体积以确保印迹膜完全润湿(对于8×10cm 印迹需要约 20mL)。
注意：优化孵化时间和温度对于获得zuì佳结果是必不可少的。对于一些抗体，室温孵育就足够了。
然而，高亲和力抗体可能需要再温育5至10分钟。
4.用 TBS-T或PBS-T将膜洗10分钟×3次。
5.按如下方法检测：
A.完整去除二抗的测试：将膜进行发光检测，如果 5分钟内未检测到信号，则二抗已经成功地从抗原或一抗中去除。
B.完整去除一抗的测试：用 HRP 标记的二抗孵育膜，然后用洗涤缓冲液洗涤。孵育新的一抗和二抗，进行发光检测，如果 5分钟内没有检测到信号，则已经成功地将一抗从抗原中除去。
6.如果在步骤 5 中检测到信号，则返回步骤 2，再剥离 5-15分钟。一些抗原/抗体系统需要更高的温度或更长的孵育时间来完全去除它们。优化剥离时间和温度以确保完全去除抗体，同时防止对抗原的损伤。
7.确定膜被适当剥离后，可以进行第二次免疫印迹实验。
注意：1.印迹可以剥离和重复检测多次，但可能需要更长的曝光时间或更灵敏的化学发光底物。
如果抗原在再生液中变得不稳定，随后的反应可能导致信号降低。
2.剥离后建议重新封闭印记膜。

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名称：抗GST标签琼脂糖介质
货号：WE0331
规格：100μl|500μl
抗GST标签免疫亲和介质是将抗GST标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上，这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀，能检测含有GST标签的蛋白。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
免疫原：人工合成多肽序列
应用范围：IP

名称：BCA蛋白浓度测定试剂盒
货号：ZN1871
规格：250次/500次/2500次
主要成份：
A 液 50ml
B 液 2.5ml
蛋白标准品 10ml(2mg/ml)
产品描述：应用试管法可以测量 25 管，微孔板法可以测量 250 孔。
产品保存：室温保存，一年内有效。
产品说明：碱性条件下，蛋白将 Cu2+还原为Cu+,Cu+与 BCA 试剂形成紫颜色的络合物，吸光度强度与蛋白浓度成正比。测定其在 562nm 处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。
1.准确灵敏，线性范围广，BCA 试剂的蛋白质测定范围是 20－2000μg/ml。
2.快速：45分钟内完成测定。
3.经济实用：在微孔板中进行测定，可大大节约样品和试剂用量。
4.不受样品中离子型和非离子型去污剂影响。
5.检测不同蛋白质分子的变异系数远小于考马斯亮蓝法蛋白定量。
注意事项：
1.低温或长期保存，若发现 BCA 试剂 A或者试剂 B 有沉淀发生。请 37ºC 温育并伴随搅拌促使其充分溶解。如发现细菌污染，则应丢弃，避免对实验结果造成影响。
2．不受大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中 5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20，60，80 等。(详情见附录)
3 每次测量蛋白浓度均应做标准曲线。
4.当试剂 A和 B 混合时会有浑浊，混匀后就会消失。
5.需准备 37℃水浴或温箱、酶标仪或普通分光光度计，测定波长为540-595nm 之间，562nm zuì佳。酶标仪需与 96 孔酶标板配套使用。使用分光光度计测定蛋白浓度时，试剂盒测定的样品数量会因此而减少。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。
6.使用 BCA 蛋白测定法测定时颜色会随着时间的延长不断加深，并且显色反应的速度和温度有关，因此需注意保持定时和定温，以确保定量。
7.实验操作规范，提高上样量的度。
使用方法：
一．配制 BSA 标准品
注：标准品稀释液为蛋白样品的溶解液，原则上蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但也可用0.9%的NaCl或1×PBS 进行稀释。
二.配制 BCA 工作液
A.计算所需要的总 BCA 工作液体积。
总 BCA 工作液体积=(标准品+待测样品)×重复数×每个样品所需要的BCA 工作液
注意：试管法检测时每个样品加 2.0ml BCA 工作液，微孔板检测每个样品加 200μl BCA 工作液。
B.配制 BCA 工作液：50 体积的BCA 试剂 A 中加入 1 体积的BCA 试剂 B(A:B=50:1)，充分混匀。
注意：BCA 试剂 B 加入 BCA 试剂 A 中后，迅速浑浊，通过混匀后立即变澄清。BCA 工作液装入密封容器内，室温条件 24h 稳定。
三.试管法(样品：BCA 工作液=1:20)
1.各取 100μl 标准品和待测样品加入到反应管中。
2.每管加入 2.0ml BCA 工作液，混匀。37℃孵育30min。
注意：也可室温孵育2h，或者 60℃孵育30min。BCA 检测蛋白浓度，延长孵育时间会加深颜色反应。升高温度会加快显色反应。但是温度升高和时间延长会降低检测下限，以及降低工作线性范围
3.冷却到室温。在分光光度计上进行检测，设定波长为562nm。用装满水的比色皿对仪器校零。然后在 10分钟内对所有样品读数。
注意：由于 BCA 反应达不到真正的反应终点，即使温度降低至室温生色反应液会继续。但是，由于室温下生色比率相当低，因此若是 10min 内能对所有的样本进行 562nm 吸光度的测试，不会导致明显错误。
4.根据 BSA 标准品的吸光度(减去标准品中空白孔的OD 值即zuì终的读数)，绘制标准曲线(X-蛋白浓度 μg/ml；
Y-zuì终的OD562nm)。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度。
四.微孔板法(样品：BCA 工作液=1:8)
1.各取 25μl 标准品和待测样品加入到微孔板中。
注意：样品与工作液比例为1:8，若样品有限，可使用 10μl 标准品和待检测样品进行检测(即 1:20)，这时试剂盒的检测范围为125-2000μg/ml。
2.每孔加入 200μl BCA 工作液，振荡 30s 充分混匀。盖上微孔板，37℃孵育30min。
3.冷却到室温，在酶标仪上的540～595nm 波长范围处检测吸光度，其中 562nm 波长为zuì佳。
注意：延长孵育时间或者提高样品：BCA 工作比会增高每个孔的OD562nm 净值，并且降低检测下限和工作线性范围。
4.根据 BSA 标准品的吸光度(减去标准品中空白孔的OD 值即zuì终的读数)，绘制标准曲线(X-蛋白浓度 μg/ml；
Y-zuì终的OD562nm)。依据标准曲线和样品的稀释倍数计算样品蛋白浓度

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