JN0033 超敏genotyping PCR

产品简介
我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白,包括超敏genotyping PCR在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。...
产品详细介绍
特别提示:包括超敏genotyping PCR试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:超敏genotyping PCR试剂盒
英文名称:genotyping PCR kit
产品货号:JN0033
产品规格:1ml×5
本制品是将 genotyping PCR反应所需的全部试剂、dNTP及PCR增强剂,为预先配制成2倍浓度的混合物。
2×genotyping Taq PCR MasterMix专为常规PCR快速扩增及基因组 DNA等复杂模板快速PCR扩增检测设计优化。本产品使用方便快捷,使用时只需加入引物及模板并加入去离子水稀释至1×即可进行反应。
2×genotyping Taq PCR MasterMix提供普通型/快速上样型两种形式供您选择,经测试,染料的加入不影响扩增性能,在PCR反应完成后可直接电泳,节省时间。
本品适用于从复杂背景中扩增微量模板DNA。由于Genotyping PCR的突变率高于普通PCR反应,故其产物不推荐用于需高保真的基因克隆。
Genotyping PCR所用引物需精心设计,否则会扩增出较多杂带(参见PCR引物设计的法则)。
应用实例:

扩增灵敏度检测对比:2×Taq PCR MasterMix(左图) VS 2×genotyping Taq PCR MasterMix(右图)
用浓度为100ng/μl的人基因组DNA将浓度1ng/μl含LacZ基因的质粒梯度稀释至一下浓度梯度:0.1ng/μl、0.01ng/μl、1pg/μl、0.1pg/μl、0.01pg/μl、1fg/μl 从每个浓度梯度中各取1μl作为扩增模板,分别用2×Taq PCR MasterMix 及2×genotyping Taq PCR MasterMix 对LacZ基因进行扩增(都分别进行40轮PCR扩增循环)。
结果显示:2×genotyping Taq PCR MasterMix检测灵敏度比 2×Taq PCR MasterMix高1,000倍以上。 泳道M:DNA Ladder 2000; 泳道1~6:分别对应以上各模板浓度梯度
常用反应体系:
| 组分 | 体积 |
| 2×Reaction Mix* | 10μl |
| 上游引物 | 0.05uM(终浓度) |
| 下游引物 | 0.05uM(终浓度) |
| 模板DNA | 1-3ul DNA样品 |
| Taq酶(5U/μl) | 0.25μl |
| ddH2O | 至20μl |
| *反应体系可成比例调整至50μl等体积 | |
常用PCR循环:
| 93℃ | 1分钟30秒 |
| 40次循环 |
93℃,30秒 57℃,30秒(57℃适用于大多数反应,亦可在55-60℃调整) 65℃,按产物长度60秒/1KB计算 |
| 4℃ | 保温 |
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