SYA570 副猪嗜血杆菌

副猪嗜血杆菌的品牌是百奥莱博，是优质的动物疫病PCR检测试剂盒产品，本制品仅用于生物化学研究方面，我公司专注于动物疫病PCR检测试剂盒产品的研发、生产和供应，为您提供的副猪嗜血杆菌质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括副猪嗜血杆菌(HPS)单重凝胶PCR检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：副猪嗜血杆菌(HPS)单重凝胶PCR检测试剂盒
产品货号：SYA570
产品规格：48次/盒

一、简介：
本试剂盒用一对副猪嗜血杆菌特异性引物，对副猪嗜血杆菌DNA进行体外扩增检测，用于临床上对可疑感染者的病原学诊断。

二、用途：
该试剂盒适合于发病猪呼吸道、血液样本中副猪嗜血杆菌(HPS)的特异性检测，用于副猪嗜血杆菌(HPS)的辅助诊断，其检测结果仅供临床参考。

三、试剂盒组成：(48T)

组份	数量	规格
副猪嗜血杆菌PCR反应液(HPS-PCR MIX)	1管	720μL/管
DNA抽提液(DNA Extraction)	2管	1.5mL/管
阴性对照(NTC)	1管	50μL/管
阳性对照(HPS-PTC)	1管	50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-20℃以下保存，有效期为6个月。

五、PCR仪器适用范围
ABI系列，Roche系列等PCR检测仪等。

六、样品的采集与DNA提取
6.1 样品的采集
6.1.1 血清：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入无菌的干燥玻璃管，室温(22-25℃)放置30-60min，血标本可自发完成凝集析出血清，或直接使用水平离

心机，3000rpm离心5min，吸取上层血清，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.2 血浆：用一次性无菌注射器抽取静脉血2mL，注入含EDTA2Na(乙二胺四乙酸二钠)或柠檬酸钠抗凝剂的玻璃管，立即轻轻颠倒玻璃管混合5-10次，使抗凝剂

与静脉血充分混匀，5-10min后即可分离出血浆，转移至1.5mL灭菌离心管。
6.1.3 粪便样品：取粪便置于灭菌的收集管中送检。
6.1.4 病灶部位样品：取发病部位新鲜渗出物、粘液脓血送检。
 注：上述样品建议经过增菌后，收集培养物用于检测。
6.2 DNA提取
可采用PCR试剂盒配备的DNA抽提液，按以下说明进行DNA核酸的粗提。也可采购北京百奥莱博科技有限公司生产的DNA提取试剂盒(过柱法-凝胶配套)，并按照相应

试剂盒说明进行操作。
6.2.1 培养物：取培养物50μL(培养至一定浊度)或者挑取单克隆菌落与50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min，取上清5μL进行PCR

反应。
6.2.2 粪便样品：挑取米粒大小粪便于灭菌离心管中，加入0.5mL生理盐水，振荡混匀，13000rpm离心3分钟，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，

100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进行PCR反应。
6.2.3 其他液体标本：取标本2-3mL，13000rpm离心3min，弃上清，沉淀中加入50μL DNA抽提液充分混匀，100℃恒温10min，13000rpm离心3min取上清5μL进

行PCR反应。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5μL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议zuì后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出PCR反应液(HPS-PCR MIX)，室温融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下：

试剂	每个反应加入的量	N个反应加入的量
PCR反应液	15μL	N ×15μL

向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL PCR反应液，向每管中加入处理后样品/阴性对照(NTC)/阳性对照(HPS-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 PCR反应条件
将各反应管放入PCR仪器的反应槽内。推荐循环条件：

预变性	1循环	94℃ for 2 min
PCR扩增	35循环	94℃ for 30 sec 58℃ for 30 sec 72℃ for 30 sec

八、结果分析：
（1）称取1.5g琼脂糖放于250mL锥形瓶中，加入100mL 1×TAE电泳缓冲液，微波炉加热溶解，稍冷后加入10μL染色液混匀，倒入插有梳子的制胶板中。
（2）待胶凝固后，取10μL Maker(推荐使用DL2000 Maker)点样于左侧凝胶孔中，取10μL PCR产物依次点样于凝胶孔中，电压值设定为电泳槽正负距离

(cm)与5(V/cm)的乘积。待溴酚兰指示剂电泳至凝胶中部时停止电泳并使用凝胶成像仪或紫外透照台观察结果。


九、结果分析：
（1）阴性对照(NTC)：无任何的条带(引物带除外)。
（2）阳性对照(HPS-PTC)：在115bp处有条带。
（3）被检样品：在115bp处有条带为阳性样品，否则为阴性样品。
（4）以上条件应同时满足，否则，此次试验视为无效。

根据您的关注的副猪嗜血杆菌(HPS)单重凝胶PCR检测试剂盒，副猪嗜血杆菌(HPS)单重凝胶PCR检测试剂盒，HPS，副猪嗜血杆菌，SYA570，百奥莱博，，，您可能还对以下产品有需求：


SYA378 禽流感通用型/新城疫病毒(AIV-M和NDV)通用型双重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒
SYA387 鸡白痢沙门氏菌(SPP.P)单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒
SYA393 猪瘟病毒(CSFV)单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒|96次/盒
SYA397 猪瘟野毒病毒(wCSFV)单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒|96次/盒
SYA405 猪蓝耳病病毒(PRRSV)单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒|96次/盒
SYA413 猪伪狂犬野毒病毒(PRV-gE)单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒|96次/盒
SYA419 猪乙型脑炎病毒(JEV)单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒|96次/盒
SYA423 猪细小病病毒(PPV)单重荧光PCR检测试剂盒 48次/盒|96次/盒

关注副猪嗜血杆菌(HPS)单重凝胶PCR检测试剂盒，副猪嗜血杆菌(HPS)单重凝胶PCR检测试剂盒，HPS，副猪嗜血杆菌，SYA570，百奥莱博，，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：



名称：禽流感病毒(AIV-M)通用型单重荧光PCR检测试剂盒（定性/定量）
货号：SYA320
规格：48次/盒|96次/盒
一、简介：
禽流感病毒实时荧光qRT-PCR检测试剂是按照美国农业部(USDA)的检测标准和我国《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004)而制备的商业化检测试剂盒。本试剂盒为中的探针报告基团为6-FAM，淬灭基团为MGB。本方法可定性检测所有亚型禽流感病毒。

二、用途：
本试剂盒适用于检测各种禽类喉咽棉拭子、泄殖腔棉拭子、各种组织样品、尿囊液及细胞培养液等。可用于禽流感病毒感染的辅助诊断、监测及流行病学调查，其检测结果仅供参考。

三、试剂盒组成：(48T)
组份 数量 规格
荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX) 1管 672μL/管
酶混合物(Enzymes MIX) 1管 48μL/管
无核酸酶水(Nuclease-Free Water) 1管 500μL/管
阴性对照(NTC) 1 管 50μL/管
阳性对照(AIV-PTC) 1 管 50μL/管

四、储存条件及有效期：
本试剂盒于-18℃以下保存，有效期为6个月。

五、荧光PCR仪器适用范围：
ABI系列，Roche系列等荧光定量PCR检测仪等。

六、样品的采集与RNA提取
6.1 样品的采集
按照标准《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2003 )和《禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》(GB/T 19438.1-2004 )进行样品的采集。
6.2 样品RNA提取
可按常规方法提取，也可采用商品化试剂盒提取病毒RNA。
（1） 取灭菌的1.5 mL Eppendorf离心管，做好标识。
（2） 每管加入600 µL裂解液，分别加入被检样本200 µL，再加入200 µL氯fǎng，混匀器上振荡混匀5 s，于4℃ 12000 r 离心15 min。
（3） 取无RNA酶的1.5 mL Eppendorf离心管，加入-20℃预冷400µL异丙醇，吸取步骤(2)各管中的上清液转移至相应的管中，避免吸出中间层，颠倒混匀。
（4） 于4℃ 12000 r离心15 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体；加入600µL 75％预冷乙醇，洗涤。
（5） 于4℃ 12000 r离心10 min，弃上清，倒置于吸水纸上，沾干液体。
（6） 10000 r离心10 s，用微量加样器将其吸干，室温干燥5 min～10 min。
（7） 加入10µL 无核酸降解酶的水，溶解管底的RNA，5000 r离心5 s，冰上保存备用。若需长期保存须放置-70℃ 冰箱。
 注：阳性对照和阴性对照为已经抽提好的核酸(无需提取)，直接取5µL加入到反应体系中即可。由于阳性对照浓度较高，建议zuì后在样品制备区域加入阳性对照。

七、检测步骤：
7.1 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光qRT-PCR反应液(AIV-qRT-PCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000r离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(AIV-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 real time RT-PCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
反转录(Reverse Transcription) 1循环 45℃ for 5 min
预变性 1循环 94℃ for 30 sec
PCR扩增(PCR amplification ) 40循环 94℃ for 5 sec
60℃ for 30 sec
在60℃延伸时收集荧光信号 。报告基团：设置为FAM。

八、结果分析：
8.1 结果分析条件设定
直接读取检测结果。基线和阈值设定原则根据仪器噪声情况进行调整，以阈值线刚好超过正常阴性样品扩增曲线的zuì高点为准。
8.2 试验成立判定
（1） 阴性对照(NTC)：不应产生任何的扩增曲线。
（2） 阳性对照(AIV -PTC)：均产生扩增曲线。
（3） 以上条件应同时满足 ，否则，此次试验视为无效。
8.3 结果判定
（1） 在试验成立的条件下，Ct值≤35的样本为阳性，表明AIV核酸阳性。
（2） Ct值显示为无的样本为阴性样本，表明AIV核酸阴性。
（3） 如果35＜Ct值≤40，判为可疑样品。对于可疑样品，先看扩增曲线。如果扩增曲线为对数扩增曲线，则为可疑阳性，否则判为阴性。
（4） 对于可疑阳性样品，重新抽提核酸，再次进行AIV qRT-PCR检测。如果重复扩增曲线为对数扩增曲线，判为样本阳性，表明AIV核酸阳性；否则判为样本阴性。

九、注意事项：
（1） 初次使用前请仔细阅读说明书。并严格按照说明书步骤操作。
（2） 所有使用的离心管zuì好高压灭菌，而且必须不含RNA酶。
（3） PCR操作应严格按照要求分区(试剂配制区、标本处理区、PCR扩增区等)，防止实验室污染。
（4） 样本提取、试剂配置、加样需在不同区的超净工作台进行，以免污染。
（5） 试剂盒里所有物品应视为污染物对待，并按照卫生部《微生物生物医学实验室生物安全通则》进行处理。


如果您觉得“SYA570 副猪嗜血杆菌”描述资料不够齐全，请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从给览网看到的，我们将给您最大优惠！)
本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8523968.html
已经有1179位访客查看了本页.