WH0149 λDNA（HindIII酶切)（

λDNA（HindIII酶切)（的品牌是百奥莱博，是优质的核酸电泳和回收产品，本制品用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多λDNA（HindIII酶切)（等核酸电泳和回收产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括λDNA（HindIII酶切)（564～23130bp)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：λDNA（HindIII酶切)（564～23130bp)
英文名称：Lambda DNA/HindIII,DNA Ladder
产品货号：WH0149
产品规格：50次|200次

本制品是由λDNA经HindIII完全酶切并经加热灭活的产物，已加入1×Loading Buffer，为即用型产品，可直接电泳，每次上样5μl（浓度约为100μg/μl）。每次使用前应在65℃加热5分钟。

参照物片段（bp）：564，2027，2322，4361，6557，9416，23130。


条带图：6μl加样，凝胶长度10cm，电压6V/cm，0.5×TBE Buffer

贮存液组成：10mM Tris-HCl（pH7.6)，10mM EDTA，0.015％溴酚兰，0.015％二甲苯FF，10％甘油

储存条件：-20℃可保存一年以上，4℃保存三个月。

使用方法：
1．取6μl产品，65℃加热5min，冰浴3 min，（每1mm点样孔宽度加0.1μg，6 mm以下一般上样量为0.5 μg，如果加样孔较宽，可适当增加上样量)进行电泳。
2．建议电泳条件为0.7%左右的琼脂糖凝胶，正负之间电压4-10 v/cm。
3．通过EB染色，在紫外灯下观察电泳条带。

注意事项：
1．23130 bp和4361 bp两条带由于具有粘性末端，可能会连接成一条27491 bp的条带，65℃加热后即可分开。
2．及时更换电泳缓冲液并使用新制的凝胶，以免影响电泳结果。

根据您的关注的λDNA（HindIII酶切)（564～23130bp)，HindIII酶切，λDNA，564～23130bp，λDNA（HindIII酶切)（564～23130bp)，WH0149，百奥莱博，，，您可能还对以下产品有需求：



名称：一站式miRNA尿素-PAGE电泳套装
货号：BTN70606
规格：30次
尿素-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Urea PAGE)是目前分离200nt以下的小片段RNA，尤其是20nt左右的microRNA(miRNA)分子的主要方法，但是单独配制各种溶液十分繁琐，为此我们公司开发了本产品。

产品特点：
1.一站式，含有电泳所需要的所有试剂，即开即用，十分方便，免去了实验人员称取有毒物品。
2. 灵活，可以根据需要配制各种浓度的Urea-PAGE，以便对长度各异的RNA进行电泳。
3.电泳后可直接用于UV观察、银染、胶回收、Northern杂交和放射自显影等。
4. 使用缓冲液，可以防止甘油的干扰。

产品组成：

成分	规格
尿素	210g
丙烯酰胺	60g
甲叉双丙烯酰胺	3g
TBE电泳液，10×	250ml
TEMED	1.5ml
过硫酸铵(干粉)	1g
miRNAload	10ml
miRNA Marker	30次
固相RNase清除剂	100ml
说明书	1份

储存条件：常温运输、4℃保存(miRNAload、miRNA Marker需要-20℃保存)。保存期为一年。

使用方法：

一、准备工作
1. 用固相RNase清除剂清洁工作的台面和器皿(详见该产品的使用手册)。
2. 配制1 X电泳缓冲液：将适量的10X电泳缓冲液用RNase-free水稀释10倍，得到1X电泳缓冲液待用。
3. 配制10%过硫酸铵溶液：称取约100mg过硫酸铵到一干净的1.5mL离心管中，按每1mg过硫酸铵加10μl RNase-free水的比例加入RNase-free水，摇晃致溶，立即使用。注意：放置时间不要超过一周。

二、配制凝胶
1. 估计所需要的凝胶溶液的体积，一般配制一块13cm×15cm×0.8mm的胶需要15mL凝胶溶液，配制一块36cm×45cm×0.8 mm的胶需要120mL凝胶溶液。
2. 根据所需要的凝胶溶液的体积，在一的干净的三角瓶中按下表加入各成分(此处以配制100mL浓度为15%的凝胶为例):

成分	终浓度	用量
尿素	7M	42g
40% Acrylamide/Bis溶液	15%	37.5mL
10×电泳缓冲液	1×	10ml
补RNase-free水到100mL

注：Acrylamide/Bis的终浓度需要根据待分离RNA长度选择(见下表)。

需分离的RNA长度范围	Acrylamide/Bis工作浓度
6-100nt	20%
25-150nt	15%
40-200nt	12%
60-400nt	8%
80-500nt	5%
1000-2000nt	3.5%

3. 搅拌并加热到40-50℃左右，直到尿素完全溶解。
4. 冷却到室温后，将三角瓶接上真空系统抽真空处理10-15分钟以充分去除溶液中的氧气(氧气会降低聚合反应效率)。但如果实验条件有限，此步也可以省略。
5. 边摇晃溶液变加入50μl TEMED和500μl 10%过硫酸铵。注意：即使选择其他工作浓度的Acrylamide/Bis，TEMED和10%过硫酸铵的用量也不需要随之改变。但如果配置的凝胶溶液的体积变化，TEMED和10%过硫酸铵的用量也要按比例改变。
6. 再充分摇晃约30秒后迅速灌胶，然后插入样品梳。
7.室温放置30-60分钟使胶凝固。
8. 将凝胶板放置在电泳装置上后，在上下层分别加入适当量的1×电泳缓冲液。如果不马上使用，需要有湿纸将上样孔端盖住以防凝胶过度干燥。
9. 拔出梳子后用加样枪吸取电泳缓冲液，充分将每个加样空中未聚合的Acrylamide/Bis、尿素和气泡吹打出来。

三、电泳
1.在上样前，预电泳 20-30分钟以使多余的过硫酸铵跑出加样空，同时还可以使凝胶的温度升高(到 50℃左右)，有利于RNA电泳时维持在变性状态。预电泳电流见下面第 5 条。
2. 将miRNA样品与等体积的miRNAload 混合，70℃保温 2-3分钟后迅速放置在冰上冷却，快速离心半分钟，放冰上待用。
3. 关电泳仪后开始上样。注意：每次上样后如果不更换枪头，则需要充分吹打洗净枪头以防样品的交叉污染。
4. 同时上样 miRNA Marker。
5. 重开电泳仪，对 13cm×15 cm的胶，以20-30mA的电流电泳，直到红色染料移动到凝胶边缘为止；对 36cm×45cm的胶，则以50-60mA的电流电泳，直到红色染料移动到凝胶边缘为止。

四、后续处理
1.染色观察：将凝胶一面的玻璃板揭开，直接用仍然附着在另一玻璃板上的凝胶进行各种染色，包括银染(固定、漂洗、显影和定影等步骤)、EB(每100mL 1×TBE中加 20μL 10mg/mL的EB溶液)、我们公司低毒核酸染料 DNAgreen(每100mL 1×TBE中加10μL DNAgreen 原液)。UV下观察并拍照。
2. miRNA回收：按上法用EB等染料染色后，UV下确定所需要的miRNA条带的位置，切胶后进行胶回收处理。
3. Northern杂交：按上法用EB等染料染色后，UV下确定所需要的miRNA条带的位置，切胶后电转移到带正电的尼龙膜上，然后进行杂交处理。
4. 放射自显影：如果miRNA样品电泳前经过同位素标记，则将凝胶一面的玻璃板揭开，用滤纸将附着在另一玻璃板上的凝胶吸附过来，然后包上保鲜膜，真空抽干，然后使胶跟X光片向对置进行放射自显影。

关注λDNA（HindIII酶切)（564～23130bp)，HindIII酶切，λDNA，564～23130bp，λDNA（HindIII酶切)（564～23130bp)，WH0149，百奥莱博，，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：

货号	名称	规格
BTN3690B	蓝色DNA上样液，6×	10mL
BTN100934	二甲苯蓝FF溶液(电泳级)	10mL
SY0251	DNA上样缓冲液	5×1ml
SY0259	双链DNA(dsDNA)定量试剂	100μl
BTN180102	预染琼脂糖配胶液(100×,专用型)	100ml
BTN130807	显影定影套装	1套

如果您觉得“WH0149 λDNA（HindIII酶切)（”描述资料不够齐全，请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从给览网看到的，我们将给您最大优惠！)
本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8522595.html
已经有886位访客查看了本页.