QN0279 氧化型低密度脂蛋白

产品简介
北京百奥莱博供应的氧化型低密度脂蛋白用于科研试验,我公司专注于蛋白类产品的研发、生产和供应,为您提供的氧化型低密度脂蛋白质量可靠,批间差小,且价格公道,热切盼望您选购我们的产品。...
产品详细介绍
特别提示:包括氧化型低密度脂蛋白在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:氧化型低密度脂蛋白
英文名称:OX-LDL
产品货号:QN0279
产品规格:2mg
人源性低密度脂蛋白(通过超速离心分离(1.019-1.063g/cc)纯化)在PBS溶液中用5μM Cu2SO4 (氧化剂)37℃ 氧化 20 小时所得。zuì终通过加入过量EDTA-Na2终止氧化反应。通过琼脂糖凝胶电泳对不同的LDL的迁移率进行分析。氧化型LDL的迁移速度是普通LDL的2倍。这种氧化型的LDL被广泛用于研究类脂化合物代谢作用,但细胞凋亡诱导实验除外。细胞凋亡诱导可选本公司所产高氧化程度低密度脂蛋白进行实验。
浓度:2.0mg/ml(蛋白质)
包装:经膜过滤后在PH为7.4,含有1μM EDTA-Na2的PBS溶液中无菌保存;
来源:铜离子氧化人源血浆LDL;
稀释方式:PBS磷酸盐缓冲液或细胞培养液;
储存条件:2~8℃保存,切勿冻存!有效期为6周。
注意事项:长时间的储存后可能会产生沉淀,这种现象属于正常情况。将溶液放入离心管中离心2分钟将聚合物除去即可。氧化型LDL不稳定,实验时zuì好现用现配,采用新鲜配置工作液。
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名称:6-氨基正己酸
货号:QN0264
规格:25g|100g
CAS号:60-32-2
名称:罗丹明标记鬼笔环肽
货号:QN0267
规格:300T
本品为TRITC标记的鬼笔环肽,染色反应特异性强,对比性高,具有比Actin抗体更好的染色效果,适合用作F-actin的定性和定量检测。另外,经本品结合后的F-actin仍能维持actin自身具有的许多生物学特性。且本品的结合没有物种差异性,适用性广泛。
别名:罗丹明鬼笔环肽
分子式:C60H70N12O13S2
分子量:1231.4
性状:紫色粉末(冻干粉)
鬼笔环肽(Phalloidin)是一种来源于毒蕈类鬼笔鹅膏的环状七肽毒素,以高亲和力(Kd= 20 nM)选择性结合于丝状肌动蛋白F-actin,而不会与单体肌动蛋白G-actin结合,通常用来标记组织切片,细胞培养物或无细胞体系中的F-actin,从而对F-actin进行定性和定量分析。另外,鬼笔环肽衍生物也以相近的亲和力结合于大小纤维,无论是动植物来源的肌肉细胞或非肌肉细胞,按照每一个肌动蛋白亚基约与一个鬼笔环肽分子的计量比结合。且非特异性结合几乎可忽略,染色区域和非染色区域辨识度非常明显。因此,鬼笔环肽衍生物特别适合替代肌动蛋白(Actin)抗体进行相关研究。另外鬼笔环肽衍生物很小,直径约12-15Å,分子量<2000 Daltons,未标记肌动蛋白(Actin)的许多生理特性都得以维持,比如,同肌动蛋白结合蛋白如肌球蛋白,原肌球蛋白,DNase I等仍能发生反应;鬼笔环肽标记的纤维丝仍可穿透固相肌球蛋白基质;以及甘油抽提的肌纤维标记后仍可收缩等。
鬼笔环肽(Phalloidin)的结合阻止丝状肌动蛋白(微丝)的解离,稳定微丝结构,从而破坏微丝的聚合-去聚合的动态平衡。此特性使得肌动蛋白聚合发生的临界浓度(CC)降至<1µg/mL,因此,可用作一种聚合促进剂。此外,鬼笔环肽还可抑制F-actin的ATP水解活性。
1. 工作液准备
本品以溶于甲醇的 20µM 储存液形式提供,总量为 300µl。按照 100 nM 的工作液浓度来换算,可制备总量为 60ml 的工作液。建议收到产品后,根据单次使用量,对母液进行小量分装,-20℃避光冻存,一年稳定。开始实 验前,使用 1×PBS 缓冲液稀释储存液到需要的工作浓度。推荐工作浓度为:80~200nM。现配现用。
2. 染色步骤
1) 细胞爬片生长 24h,使其密度达到 50%汇合度。
2) 吸掉培养液,37℃预热的 1×PBS(pH 7.4)清洗细胞 2 次。
3) 使用溶于 PBS 的 4%甲醛溶液进行细胞固定,室温固定 10min。 注意:避免固定剂中含有甲醇成分,因为甲醇在固定过程中可能破坏肌动蛋白。
4) 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
5) 室温条件下,用丙酮(≤-20℃)脱水或者用 0.5% Triton X-100 溶液透化处理 5min。
6) 室温条件下,用 PBS 清洗细胞 2~3 次,每次 10min。
7) 取 200µl 配制好的 TRITC 标记鬼笔环肽工作液,覆盖住盖玻片上的细胞,室温避光孵育 30min(通常情况下, 4℃~37℃孵育皆可)。 注意:为了降低背景,可于 TRITC 标记的鬼笔环肽工作液内加入 1% BSA;另外,孵育过程中为了避免溶液挥 发,可将盖玻片转移到一个密封的容器内。
8) 用 PBS 清洗盖玻片 3 次,每次 5min。
9) 使用 200µl DAPI 溶液(浓度:100 nM)对细胞核进行复染,约 30s。
10) 用 PBS 清洗盖玻片,然后倒置在已经滴有一滴 Fluoromount-GTM 水溶性封片剂的载玻片上。使用纸巾轻轻檫 掉多余封片剂,然后用指甲油封片。此法制备的标本玻片可置于 4℃避光保存,通常 6 个月内可继续做 F-actin 染色分析。 注意:也可以直接使用含有 DAPI 的抗荧光淬灭封片剂合并步骤 9)10),简化步骤。
11) 荧光显微镜或者共聚焦显微镜下进行荧光观察,选择 TRITC 激发/发射滤片(Ex/Em=540/570nm)和 DAPI 激 发/发射滤片(Ex/Em=364/454nm)。
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| 货号 | 名称 | 规格 |
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| QN0279 | 氧化型低密度脂蛋白 | 2mg |
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| QN0290 | DiI标记乙酰化低密度脂蛋白 | 500μg |
| QN0311 | 植物血球凝集素P | 5mg |
| QN0321 | 酶水解酪素 | 100g |
| QN0330 | 人血清白蛋白 | 500mg|1g|5g |
| QN0333 | 牛血清白蛋白 BSA-Ⅴ(不含脂肪酸) | 5g |
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