WE0104 2×Bes Taq Master

2×Bes Taq Master是高品质的核酸扩增(PCR)产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科学研究，本产品质量好，且具价格，深为用户称道，了解更多2×Bes Taq Master等核酸扩增(PCR)产品请联系我司咨询订购。...

特别提示：包括2×Bes Taq MasterMix(含染料)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：2×Bes Taq MasterMix(含染料)
英文名称：2×Bes Taq MasterMix(With Dye)
产品货号：WE0104
产品规格：1ml|5ml|25ml

  本品是由Bes Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系，浓度为2×。Es Taq DNA Polymerase具有扩增效率高、错配率低的优良性能。的MasterMix配方使整个反应体系非常稳定，超过98%的PCR扩增能一次成功，同时复杂模板也能得到有效扩增，并可zuì大限度地减少人为误差和污染。本产品已加入染料(蓝色)，反应结束后可直接进行电泳检测，无需再使用上样缓冲液。扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基，因此可直接用于T/A克隆。主要适用于常规PCR反应和对高保真性有要求的基因克隆等实验。

产品组成：

组份	1ml	5ml	25ml
2×Bes Taq MasterMix(With Dye)	1ml	5×1ml	5×5ml
ddH2O	1ml	5×1ml	5×5ml

注意：2×Bes Taq MasterMix含有Bes Taq DNA Polymerase，3 mM MgCl2 和400μM each dNTP。

质量控制：
1、经检验无外源核酸酶活性；
2、PCR方法检测无宿主残余DNA；
3、能有效地扩增多种基因组中的单拷贝基因。

使用方法：
以下举例为以人基因组DNA为模板，扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×Bes Taq MasterMix(With Dye)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	2μl	0.4μM
Reverse Primer，10μM	2μl	0.4μM
Template DNA	<0.5μg	<0.5μg/50μl
ddH2O	up to 50μl

注意：引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2、PCR反应条件

步骤	温度	时间	循环数
预变性	94℃	2 min
变性	94℃	30 s	25-35 个循环
退火	55-65℃	30 s
延伸	72℃	30 s
终延伸	72℃	2 min

注意：
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定，Bes Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。

储存条件：-20℃，避免反复冻融。

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货号	名称	规格
BTN80205	DMSO，PCR级	1.5mL
BTN130833	LAMP可见光染料	1mL
YT373	YT Taq DNA聚合酶(Taq酶)(含buffer)	200U|1000U
YT382	PCR Master Mix (含蓝色电泳染料)	400次|2000次|10000次
YT398	cDNA第二链合成试剂盒	10次
WE0101	Taq DNA Polymerase	500U|2500U|10000U

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名称：taq酶抗体
货号：BTN130815
规格：500U
Taq Antibody是Hot Start PCR用抗Taq抗体，其与Taq酶结合后抑制DNA聚合酶活性。使用本制品进行PCR扩增时，高温变性前抗Taq抗体与Taq酶结合抑制DNA聚合酶活性，能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。抗Taq抗体在PCR反应zuì初的DNA变性步骤中变性，DNA聚合酶活性恢复，达到Hot Start PCR效果。使用本制品无需特殊的抗Taq抗体失活处理，可以在常规PCR反应条件下使用。其工作原理如下：


储存条件：低温运输，-20℃保存、有效期一年。

活性定义：Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合，25℃，10 min温浴后，在55℃，10 min条件下抑制90％以上的1U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定义为1U。

纯度：
1. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA-Hind III在37℃或70℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
2. 10 U的Taq Antibody和1μg的Supercoiled pBR322 DNA在37℃或70℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
3. 10 U的Taq Antibody和1μg的λDNA在37℃或70℃下反应1小时，DNA的电泳谱带不发生变化。
4. 10 U的Taq Antibody和1μg的16S，23S rRNA在37℃或70℃下反应1小时，RNA的电泳谱带不发生变化。
5. 35Cycles的PCR反应条件下，无Mouse Genomic DNA的污染。

名称：通用型全基因组扩增试剂盒
货号：BTN100941
规格：30次
本产品是用于基因组DNA扩增全基因组的试剂盒，可以方便、简单、快速、经济的得到稳定产量的基因组DNA扩增样品。

产品特点：
1.基于phi29 DNA聚合酶的高保真性、高合成率和链取代能力。
2.可以扩增基因组达上万倍，具有高产量和高保真性的特点。
3.可使用各种来源的样品，包括全血，干血，发根，口腔粘膜刮液培养细胞，真菌和病毒等。
4. 操作简便快捷，恒温(30℃)反应，无须PCR仪即可实现扩增。
5.产物可用于多种后续试验，包括多重PCR、长片断PCR、定量PCR、克隆、文库构建、单倍型分析、测序、基因芯片分析、各种遗传分析(片段差异，微卫星差异，SNP，STR)等。

试剂盒组成：

成分	规格
WGA溶液A	75μl
WGA溶液B	30μl
dNTP(10mM)	20μl
BSA	10μl
超纯水	1ml
Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)	15μl
说明书	1份

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
本产品适用于纯化好的基因组DNA。

1.在PCR塑料管中加入1μL纯化好的基因组DNA，用量在100pg-100ng之间。可以同时做一个不加DNA模板的阴性对照。
2.在PCR管中依次加入2.5μL WGA溶液A，1μL WGA溶液B，超纯水4.3μL，轻柔吹打混合均匀(现在PCR管中总体积为8.8μL)。
3. 95℃保温3～5分钟，室温短暂离心半分钟，然后冰上放置15分钟。
4. 然后依次向上述反应液中加入0.5μL dNTP，0.2μL BSA，0.5μL Phi 29 DNA聚合酶(10U/μL)，轻柔吹打混合均匀。
5. 30℃保温3-12小时。zuì好使用PCR仪进行30℃保温并打开热盖保温。如果采用30℃水浴，zuì好在样品管中加入30-50μL石蜡油以防水分蒸发，因为30℃长时间的水浴也能使水分蒸发到管壁，从而改变反应体系中各成分的浓度、降低WGA反应效率。如果模板DNA量比较高，WGA三小时即可检测到DNA扩增。
6. 65℃保温10分钟使phi29 DNA聚合酶灭活。注：由于phi29 DNA聚合酶有DNA外切活性，所以zuì好将其灭活以免干扰后续反应。
7. 立即取3μL WGA反应液进行电泳检测扩增效果。注意：WGA缓冲液中不含有甘油和电泳染料，所以需要先加上样缓冲液。
8.扩增的DNA可以用于后续试验或冰箱长期保存。

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