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产品详情

BTN70904A 酵母tRNA溶液(粗提)

  • 产品/服务:BTN70904A 酵母tRNA溶液(粗提)
  • 型 号:BTN70904A
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-05-06
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:939
产品简介

酵母tRNA溶液(粗提)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科学研究,我公司的酵母tRNA溶液(粗提)品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括酵母tRNA溶液(粗提)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:酵母tRNA溶液(粗提)
英文名称:Yeast tRNA Solution
产品货号:BTN70904A
产品规格:1.5mL

本产品分粗体液和精提液两种类型,浓度均为5mg/mL。A是酵母tRNA粗提液,用作制备更高纯度(如分子生物级)酵母tRNA的原材料。B是精提液,是经过本公司柱式RNAadsorp纯化的分子生物学级别的酵母tRNA溶液,不含蛋白质和DNA污染,OD260/OD280在1.9左右,可直接用作微量RNA提取和回收的助沉剂,也可以用作原位杂交、Northern杂交的封堵剂,对于探针为RNA的杂交试验尤其适用。

储存条件:低温运输,-20℃保存,有效期一年。

使用方法:

一:以tRNA粗提液(BTN70904A)为材料,酚法制备tRNA精提液(BTN70904B)
1.在1倍体积的tRNA粗提液中加入一倍体积的自备Tris饱和酚,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
2.在上清中再加入一倍体积的自备Tris饱和酚和0.2倍体积自备的氯fǎng,振荡混匀后12000~15000g离心3分钟得上清。
3. 重复此步直到酚相和水相之间没有白膜出现。一般需要2-4次抽提。
4.在上清中加入0.1倍体积的自备3M NaAc(pH5.2)和2倍体积的自备无水乙醇,振荡混匀。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL自备 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体,所得沉淀即是精提的酵母tRNA,可以溶解在自备的DEPC水中,UV测定其浓度,然后直接用于各种分子生物学实验。
注意:tRNA比较短,又是单链,所以电泳时结合EB等染料的能力很弱,测定其浓度时zuì好不要使用电泳比较法,而要使用分光光度法。
注意:此法得率较高,但缺点是不能去除部分多糖污染,因为多糖也能在醇沉淀时沉淀下来。如果zuì后得到的溶液带颜色,则需要用本公司柱式RNAadsorp精提,详细过程见该产品使用说明书。

二:tRNA精提液(BTN70904B)作为核酸助沉剂
1.在核酸(DNA或/和RNA)溶液中,加入适当浓度的盐离子,盐离子不同其终浓度也不相同,具体如下:
终浓度
NH4OAc(醋酸铵) 0.5M
NaCl(氯化钠) 0.25M
NaOAc(醋酸钠) 0.3M

2. 加入本产品使其终浓度为20μg/mL,混合均匀。
3. 加入两倍体积的乙醇,混合均匀。
4. 冰上放置15分钟。
5. 12000~15000g离心15分钟以上,小心移弃上清。
6. 用1mL 75%乙醇洗一次(即加入1mL 75%乙醇,振荡混匀后12000~15000g离心5分钟,小心移弃上清)。
7. 短暂离心数秒,小心移弃残留液体。
8. 将沉淀溶于适当缓冲液中待用。
注:由于tRNA是多聚核苷酸激酶和末端转移酶的底物,因此如果回收的DNA或RNA要用于此类反应,就不能使用tRNA作为助沉剂。如果回收的RNA要用于RT-PCR,使用tRNA可能会对反应的特异性产生干扰。

三:tRNA精提液(BTN70904B)作为杂交封堵剂
本产品可以作为原位杂交、Northern杂交和RNA斑点杂交的封堵剂,也可以作为Southern杂交和DNA 斑点杂交的封堵剂,但不适于作为菌斑杂交。其在杂交液或预杂交液中的终浓度为100μg/mL。
如果使用RNA探针,zuì好使用本产品做封堵剂,以保护RNA探针。

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