BTN130911 miRNA cDNA链合成试

北京百奥莱博供应的miRNA cDNA链合成试用于生化实验研究等领域，miRNA cDNA链合成试是我司众多优质核酸扩增(PCR)之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括miRNA cDNA链合成试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：miRNA cDNA链合成试剂盒
英文名称：miRNA First Strand cDNA Synthesis Kit
产品货号：BTN130911
产品规格：25次

本试剂盒采用在miRNA 3′末端加多聚A 尾的方法来使miRNA 具有Poly(A)尾，之后再使用Oligo(dT)-Tag引物进行逆转录反应，zuì终合成miRNA 对应的链cDNA。其反应流程如下：


产品特点：
1. 两步式操作，行Poly(A)加尾，再进行逆转录反应。
2. 只需要1μg的total RNA。
3. 所得cDNA可用于检测多种miRNA，不仅减少了误差、节约了样品，同时还实现了检测的高通量。
4.与miRNA荧光定量PCR 检测试剂盒兼容。
5.特异性好，独特的miRNA引物及反应体系避免了Pre-miRNA的非特异扩增。

试剂盒组成：

成分	规格
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL)	10μl
10×Poly(A)聚合酶反应液	50μl
ATP溶液，1mM	50μl
Oligo(dT)-Tag引物(0.5ug/μL)	25μl
MMLV 逆转录(含RI)	50μl
4×RT Buffer(含dNTP)	125μl
RNase-free 水	1ml

储存条件：低温运输，-20℃保存。

使用方法：

一、对miRNA 3′末端进行加Poly(A)处理
1.在冰上预冷RNase-Free的反应管内加入以下试剂至总体积20μL。注意需要zuì后加入E.coli Poly(A)聚合酶。

试剂组份	体积
自备的Total RNA(见注)	1μg
10× Poly(A)聚合酶反应液	2μl
ATP溶液，1mM	2μl
RNase-Free水	补水至20μL
E.coli Poly(A)聚合酶(5U/μL)	0.4μL(2U)

注：在反应中使用的Total RNA必须含有miRNA。也可以直接使用miRNA(建议加入量为2–5μL，需根据目的miRNA的丰度决定)。
2. 移液器轻轻混匀上述配制的反应液，短暂离心后在37℃反应60 min。所得的反应液可以直接进行下游实验(注意：只能把2μL 直接用于后续的RT反应，多于2μL 则需要先乙醇-乙酸钠沉淀，再将加尾后的miRNA 溶于水，然后再取所需量用于RT。如果不经过沉淀，带入的残留的poly(A)聚合酶反应液将会干扰RT反应)，也可以放置-20℃短暂保存。如需长期保存建议存放于-80℃。

二、对带Poly(A)尾巴的miRNA进行逆转录反应
3. 按照下表设置20μL体系的RT反应：

成分	体积
Poly(A)反应产物(来于上步)	2μl
RNase-Free水	10μl
Oligo(dT)-Tag引物	1μl
4×RT Buffer(含dNTP)	5μl
MMLV 逆转录酶(含RI)	2μl

4. 移液器轻轻混匀上述配制的反应液，短暂离心后在42℃反应60 min。
5. 70℃保温10 min 终止反应。
6. 合成的cDNA反应液可放置于-20℃保存；也可以暂时冰上放置，立即用于后续的荧光PCR 定量检测，不需要纯化。

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货号	名称	规格
BTN131176	石蜡包埋组织直接RT-PCR试剂盒(免RNA提取)	30次
BTN130840	硫酸镁溶液(PCR级MgSO4溶液)	5mL
BTN100409	6nt随机引物(0.5 ug/uL)	5μg
BTN131042	miRNA荧光定量RT-PCR检测试剂盒	25次
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BTN101114	通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒	50次

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名称：富含GC PCR Buffer
货号：YT377
规格：2ml
本品提供了4种不同的GC-rich PCR Buffer，为扩增高GC含量的DNA片段提供了多种不同的选择，大大提高了高GC含量DNA片段的扩增成功率。

本套装提供的Buffer可以单独使用，也可以组合使用。这样可以在更多条件下优化PCR条件。

提供了推荐的几种经过优化的GC-rich PCR Buffer的组合方式，便于用户直接选用。

根据相关文献报道，单一的GC-rich PCR Buffer对于某一个高GC含量的DNA片段的扩增效果很好，但对于另外一个高GC含量的DNA片段则很可能会扩增效果不太理想。正因为很难采用一种通用的GC-rich PCR Buffer 完成对于不同的高GC含量DNA片段的扩增，因此对于高GC含量DNA片段的扩增一直是分子生物学操作过程中的一个难点。针对这一实际情况，我司推出了可以给予用户多种条件进行优化组合的4管套装GC-rich PCR Buffer。

本GC-rich PCR Buffer可以适用于各种常见的耐热DNA 聚合酶例如Taq DNA polymerase、Pfu DNA polymerase等。

产品组份：
5×GC-rich PCR Buffer A————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer B————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer C————0.5ml
5×GC-rich PCR Buffer D————0.5ml

注意事项：
1）在使用本试剂盒提供的GC-rich PCR Buffer的同时，必须同时使用和DNA聚合酶配套的zuì终浓度为1×的含镁离子PCR Buffer。
2）由于PCR反应非常灵敏可以扩增目的基因序列超过1000万倍，在操作时请注意避免微量待扩增DNA的污染，并尽量考虑设置不加模板的空白对照以确认是否有待扩增DNA的污染。

储存条件：-20℃。

名称：核酸酶/DNA清除剂(喷雾清除剂)
货号：YT401
规格：250ml
本品是一种清除实验仪器、设备、材料固相表面的RNase和DNase等核酸酶污染的喷洒型试剂，主要用于创造洁净的DNA和RNA操作环境；同时，本产品还能清除DNA，有助于消除环境中污染的DNA对于qPCR的干扰。

本产品能有效清除RNase、DNase和DNA，并且不会直接影响RNA的稳定性，具体的使用效果甚至优于进口品牌。

本产品使用安全，性，但略有腐蚀性，在某些用途方面是一种非常安全的DEPC替代品。

本产品使用便捷。使用时直接将本产品均匀喷洒于固体表面，约5分钟后用洁净纸巾擦拭干净即可进行后续的实验操作。

本产品适用于实验仪器设备如PCR仪、离心机、移液器、实验台、试管架、离心管架、电泳槽等，及实验耗材如离心管、枪头、手套等表面核酸酶污染的清除，对于塑料制品、乳胶制品、玻璃制品、不锈钢制品均有效。

本产品对RNA无影响，微量的本产品残留也不会明显影响下游的RNA相关实验。

注意事项：
1) 本产品每次使用后应当拧紧喷头，保证本产品的密闭保存，避免长时间接触空气，以免影响使用效果。
2) 使用本产品清除实验器材等表面的核酸酶污染后，仍需注意戴手套、口罩等进行操作，以免工作环境和样品被污染。
3) 本产品用于仪器设备时，仅限于仪器设备表面可以擦拭清洗的地方，严禁本产品流入仪器设备内部，以免影响或破坏仪器设备的正常运行。

储存条件：室温密封，有效期一年。

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