CZ004 磁珠法粪便DNA提取试剂盒

磁珠法粪便DNA提取试剂盒由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品仅用于生物化学研究方面，我公司专注于DNA提取纯化产品的研发、生产和供应，为您提供的磁珠法粪便DNA提取试剂盒质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括磁珠法粪便DNA提取试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：磁珠法粪便DNA提取试剂盒
英文名称：Stool DNA Kit
产品货号：CZ004
产品规格：20次/100次

产品简介：
本产品适用于从粪便样品中快速、地提取人及肠道菌群基因组DNA。提取过程采用超顺磁性微球；使用预制的缓冲液，可直接进行提取，且可根据加入的样本量来调整反应体系。本产品既可以手动进行少量样品的提取，也适合于用自动化工作站进行高通量操作。提取的产物可用于酶切、PCR扩增、检测等后续实验。
操作流程：
次使用前：
● 在Washing Buffer B中加入量(见瓶身标签)的异丙醇(分析纯)，混匀后于室温下密闭保存。
● 在Washing Buffer C中加入量(见瓶身标签)的无水乙醇(分析纯)，混匀后于室温下密闭保
● 在Proteinase K干粉中加入量(见管身标签)的Solution A，混匀后保存于2～8℃，或分装后保存于-20℃。
准备物品：
● 1.5 mL离心管：2个/样品
● 2mL离心管：1个/样品
● 单通道移液器：20 μL、200 μL、1000 μL
● 漩涡振荡器
● 恒温金属浴(或水浴锅)：70℃/55℃
● 磁性分离器：可选用百奥莱博磁性分离器
操作步骤(以200mg粪便样本为例，1g样本请参见下表1)：
一、手工法提取步骤
1.样本采集
(1)用刀片切取180mg～220mg粪便样本到2mL离心管中。
2.裂解
(1)在上述2mL离心管中加入600 μL的Lysis Buffer(用前65℃水浴5～10min)，再加入20 μL的Proteinase K(检查是否已加入Solution A)，调整合适的转速漩涡振荡1min，使其充分混合，再将离心管置于70℃加热20 min，90℃加热10 min，期间震荡混匀三次。
(2)13000rpm离心3min，取300μL上清至一个新的1.5mL EP管中。(若为1g粪便样本体系，取上清1.5mL至新的15mL EP管中)
3.结合
在上述1.5mL离心管中加入300μL Binding Buffer，200μL异丙醇，20μL Magnetic beads，震荡混匀30s，室温结合5min，期间颠倒混匀两次，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
注：此步骤磁性分离时间应不少于2 min。
4.洗涤
(1)加入800 μL Washing Buffer A，震荡混匀30s，室温下静置1 min，期间上下颠倒混匀一次，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
(2)加入800 μL Washing Buffer B(检查是否已加入异丙醇)，震荡混匀30s，室温下静置1 min，期间上下颠倒混匀一次，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
(3)加入800 μL Washing Buffer C(检查是否已加入无水乙醇)，震荡混匀30s，室温下静置1 min，期间上下颠倒混匀一次，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，用移液器移去上清液并取下离心管。
(4)重复步骤(3)一次(若为1g粪便样本体系，该步仅加入1mL Washing Buffer C，震动混匀后转移至1.5mL EP管中)。
注：步骤(4)应尽量除尽洗涤液。
5.干燥
保持离心管于磁力架上，将其置于超净工作台中风干至磁珠表面无明显光泽(5～7 min)。
6.洗脱
加入50 μL 65℃预热的 Elution Buffer，震荡混匀30s，于65℃加热5 min后，将离心管置于磁性分离器上直至溶液澄清，转移上清液至新的1.5mL离心管中，此即为纯化得到的基因组DNA，可保存于-20℃。
二、自动化仪器(磁棒法)提取
1. 磁珠法自动化提取准备工作
1.1本试剂盒适合配备TIANLONG -NP968磁珠核酸提取仪进行病毒DNA提取工作。
1.2在96孔深孔板中第1列和第7列依次加入300μL Binding Buffer，200μL 异丙醇，20μL Magnetic beads和300μL样本。
1.3在96孔深孔板中第2列和第8列加入800μL Washing Buffer A。
1.4在96孔深孔板中第3列和第9列加入800μL Washing Buffer B(检查是否已经加入异丙醇)。
1.5在96孔深孔板中第4列和第10列加入800μL Washing Buffer C(检查是否已经加入无水乙醇)。
1.6在96孔深孔板中第5列和第11列加入800μL Washing Buffer C(检查是否已经加入无水乙醇)。
1.7在96孔深孔板中第6列和第12列加入70μL Elution Buffer 。
注：TIANLONG -NP968磁珠核酸提取仪zuì低洗脱液不能低于60μL，因此将试剂盒中50μL 洗脱液增加至70μL洗脱。
2. 自动化仪器提取步骤
注意事项:
1.操作之前，请务必认真阅读本产品手册。
2.提取效果与粪便样本质量有关。
3.蛋白酶K干粉溶解后，可分装储存于-20℃，但应避免反复冻融。
4.应避免对磁珠进行冷冻、离心等操作。
5.磁珠取用前应充分重悬均匀。
6.磁珠干燥前，应用移液器吸尽洗涤液。
7.应避免磁珠过度干燥，否则会严重降低核酸洗脱效率。
8.建议使用质量较好的离心管和移液器吸头，避免因粘附磁珠而造成损失。

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货号	名称	规格
BTN3660	非冻型组织DNA保存液	250mL
BTN60806	一步式细菌DNA提取试剂盒	50次
BTN80912	大提柱式质粒DNA提取试剂盒	5次
WE0397	游离DNA样本保存管(5ml,PET)	5ml×5支|5ml×50支
ALH096	琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒	50次|100次|200次
QN0904	质粒小量提取试剂盒	50T|100T
MT0044	细胞基因组DNA提取试剂盒(20分钟)	50T

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名称：非冻型尿液DNA保存液
货号：BTN90315
规格：100mL
本品在室温条件下长期保存用于DNA提取的尿液样品保存液。它能够、长期保证DNA分子的完整性。

产品特点：
1. 保存时间长，可室温保存尿液DNA长达六个月，尤其适合于野外尿液样品采集。
2. DNA完整性好，纯化后长度在20-50 Kb之间。
3. DNA无化学修饰，提得的DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。
4. 能防止尿液在4℃结晶。
5. 安全可靠，本产品无害。
6. 使用简单，直接把新鲜的尿液样品与本产品混合即可。

储存条件：室温运输及保存，有效期两年。

使用方法：(以DNA提取为例)
1. 迅速将尿液与本产品按10:1的比例混合。
2. 常温闭光保存直到使用。
3. 使用常规液体DNA提取方法提取DNA即可。推荐使用柱式尿液DNA提取试剂盒(BTN90314)，使用柱式尿液DNA提取试剂盒提取本产品保存的尿样，兼容性好，提取效率更高。
4. 提取得到DNA可用于酶切、电泳、Southern杂交和PCR等分子生物学实验。

名称：菌体内毒素清除剂
货号：BTN90901
规格：200mL
内毒素是E.coli细胞壁的主要成分，传统的去除内毒素的方法是将内毒素和DNA一起纯化出来，然后再用各种方法去除其中的内毒素，操作繁琐，DNA 回收率低。本产品可以直接把E.coli 表面的内毒素去除，从根本上避免了内毒素对后续操作(如质粒DNA提取，重组蛋白质提取)的污染。

产品特点：
1. 个在菌体收集阶段去除内毒素的产品，从源头上避免了内毒素跟DNA和胞浆蛋白的接触，从根本上防止了可能产生的污染。
2. 操作简单快速，用酶溶液温和清洗菌体3-4次即可去掉细菌表面的内毒素，只需要10分钟左右时间，不需要复杂仪器设备。
3.，能去除99%以上的内毒素。
4.跟各种质粒DNA提取、基因组DNA提取和蛋白质提取等操作兼容，DNA丢失率只有10%左右(其他方法DNA 丢失率可以高达50%)。
5. 不影响DNA和大部分蛋白质的活性，处理过的质粒DNA可用于转染实验。
6. 既可小规模使用(在1.5mL离心管内)，也可放量用于大规模无内毒素质粒DNA提取和无内毒素蛋白质纯化。

储存条件：常温运输和保存，有效期一年。

使用方法：

一：用于菌液小于3mL的样品
1. 收集1.5-3mL E.coli 饱和菌液，12000rpm离心1分钟，弃上清，得到细菌沉淀。
2. 加入1mL 本产品温和混匀后10,000-12000rpm离心1分钟，弃上清(含内毒素)。
3. 再重复上述操作3-4次，得到的菌体可以直接进入后续的无内毒素质粒DNA提取或无内毒素蛋白质提取程序。

二：用于菌液多于3mL的样品
整个操作同上，只是在15或50mL塑料离心管中进行，离心速度不能超过离心管的承受力，本产品的用量按比例增加。

疑难解答：
Q:为何用常规的方法很难去除生物样品中的内毒素?
A:因为内毒素带电性跟DNA和部分蛋白质相同，所以基于带电性的分离方法(如硅胶膜吸附，离子交换吸附)不能将它们分开;同时内毒素又是双性分子(类似于细胞膜的磷脂分子)，能够形成大小不等的聚合物，跟质粒DNA和蛋白质大小接近，所以基于分子量大小的分离方法(如凝胶排阻过滤和氯化铯超速离心)也不能将其有效分离。

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