WH0027 转基因农作物基因组DNA提取试剂

产品简介
转基因农作物基因组DNA提取试剂是高品质的DNA提取纯化产品,由北京百奥莱博供应,本产品用于科研目的,我公司的转基因农作物基因组DNA提取试剂品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括转基因农作物基因组DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:转基因农作物基因组DNA提取试剂盒
英文名称:Extraction kit for genomic DNA from GMO
产品货号:WH0027
产品规格:200次
本试剂盒是特别针对GMO作物(转基因作物)PCR检测所开发的试剂盒。试剂盒A部分所含有的独特裂解液可针对性地将小麦、玉米、水稻、棉花和大豆五种主要作物的组织充分裂解,释放出核酸、蛋白质等相关组分,后续通过的RNA酶和酚/氯fǎng抽提可以zuì大限度的将RNA、蛋白质、金属离子等杂质除去,获得纯度和得率均良好的基因组DNA,以便于后续的PCR检测。
本试剂盒包含双组分简单型PCR反应系统,包含2×GMO PCRBuffer和GMO DNA Polymerase。GMO DNAPolymerase是采用抗体修饰的耐热聚合酶,2×GMO PCR Buffer中含有MgCl2、dNTPs、PCR反应稳定剂、优化剂和增强剂等多种成分,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,适用于GMO作物的转基因PCR检测。
产品特点:
·适用性广:可对五大主要GMO作物进行高质量基因组DNA的提取。
·简单快速:可在2h内完成GMO作物基因组DNA的提取。无需大型冷冻离心机,对仪器设备要求较低,适于各级研究机构对GMO作物进行快速基因组DNA提取。
·特异:独特的抗体Taq聚合酶的缓冲液确保聚合酶扩增,比普通Taq聚合酶特异性更强。
提取实例:

分别对水稻、玉米、大豆、棉花和小麦的100mg叶片进行基因组DNA提取,重复2次。100μl洗脱,取3μl电泳,琼脂糖凝胶浓度为2%,6V/cm电泳20min。

分别对水稻、玉米、大豆、棉花和小麦的基因进行扩增,重复2次。20μl PCR反应体系,取6μl电泳,琼脂糖凝胶浓度为2%,6V/cm,电泳20min。
试剂盒组成:
| 组分 | 200T |
| 缓冲液PL | 160ml |
| RNase A(100mg/ml) | 1.25 ml |
| 洗脱缓冲液TE | 2×15 ml |
保存条件:室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月。
注意事项:(请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
2.建议采用新鲜叶片作为提取对象,基因组DNA得率和纯度易达到zuì佳水平。
3.所有的离心步骤都为使用台式离心机在室温下进行。
4.缓冲液PL在使用前请加入巯基乙醇,使巯基乙醇的终浓度为0.1%(V/V)。
使用方法:
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。
1.取植物新鲜组织约100mg或干重组织约30 mg,加入液氮充分碾磨。
2.将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700μl 65℃预热缓冲液PL的离心管中(实验前在预热的缓冲液PL中加入巯基乙醇,使其终浓度为0.1%),迅速颠倒混匀后,将离心管放在65℃水浴20min,水浴过程中颠倒离心管以混合样品数次。
3.将离心管取出,轻甩以收集管盖及管壁上的液滴,加入6 μl RNase A(100mg/ml),混匀,室温放置10 min。
4.加入等体积苯酚:氯fǎng:异戊醇(25:24:1),充分混匀,12000rpm (~13400×g )离心5 min。
注:若提取富含多酚或淀粉的植物组织,可再用等体积酚:氯fǎng(1:1)进行二次抽提。
5.小心地将上一步所得上层水相转入一个新的离心管中,加入等体积异丙醇,充分混匀。
6.12000rpm(~13400×g )离心5 min。
7.倒掉上清,加入500 μl 70%乙醇,充分混匀。
8.12000rpm(~13400×g )离心5 min。
9.重复步骤7、8。
10.将离心管倒置在干净的吸水纸上至乙醇挥发干净,确保沉淀在离心管中。
注意:乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。但是要避免过分干燥DNA沉淀,因为过于干燥的DNA很难溶解。
11.加入100 μl洗脱缓冲液TE进行DNA溶解,适当条件保存。
注意:如果DNA溶解缓慢,可65℃加热10-30 min加速溶解。
DNA浓度及纯度检测:
1.得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。
2.DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40 μg/ml单链DNA。
3.OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
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规格:100次
本试剂盒Hoechst染料紫外光激发波长350-370 nm;发射波长465 nm,在荧光显微镜下DNA发出蓝色荧光。凋亡中晚期细胞形态学变化为染色质在局部区域凝集,固缩,继而核碎裂出现凋亡小体。在Hoeschst染色下,细胞核或者凋亡小体的DNA会呈现致密浓染或者碎块状致密浓染。
试剂盒组份:
固定液———————————50ml
100×染色浓缩液——————0.5ml
染色稀释缓冲液———————50ml
注意事项
1.需可以观察蓝色荧光的荧光显微镜或激光共聚焦显微镜。
2.需PBS或0.9%NaCl溶液,盖玻片与载玻片。
3.荧光容易淬灭,应该尽量避光操作和保存。
储存条件:4℃,有效期半年。
本制品别名:凋亡小体染色试剂盒|凋亡小体hoeschst荧光染色试剂盒
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货号:ALH172
规格:50次
本试剂盒采用特异性结合病毒DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,病毒DNA提取试剂盒适合于从无细胞体液,包括血浆、血清、腹水、培养细胞上清液、脑脊髓液及尿液等中快速提取高纯的病毒DNA。该产品可以满足大多数的病毒DNA的提取要求,如病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨细胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA后在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,将盐、细胞代谢物、蛋白等杂质去除,zuì后低盐的洗脱缓冲液将纯净的病毒DNA从硅基质膜上洗脱。纯化后的病毒核酸无杂质和PCR抑制剂,可直接适用于PCR、酶切、杂交等分析。
试剂盒组份(50次):
裂解液DLB—————————20ml
去蛋白液RE————————25ml
漂洗液WB—————————15ml
洗脱缓冲液EB———————15ml
吸附柱AC—————————50个
收集管(2ml)————————50个
产品特点:
1.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
2.节省时间,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成。
3.多次柱漂洗确保高纯度,提取的病毒DNA纯度高,质量稳定可靠,可适用于各种操作,包括PCR、酶切、杂交等。
操作步骤:(实验前请先阅读注意事项)
提示:次使用前请先在15ml漂洗液WB中加入60ml无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
1.200μl血清等体液(需回复到室温,不足可用0.9%NaCl或者PBS补足)转入上述1.5ml离心管,加入400μl裂解液DLB,立刻涡旋振荡充分混匀。
2.室温(15-25℃)放置10分钟,每隔5分钟,振荡混匀一次。
3.加入450μl无水乙醇,立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境高于25℃,乙醇需要冰上预冷后再加入。
4.将上述混合物加入一个吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm离心30-60秒,倒掉收集管中的废液。如果总体积超过750μl,可分两次将溶液加入同一个吸附柱AC中。
5.加500μl去蛋白液RE,12000rpm离心30秒,弃废液。
6.加入500μl漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm离心30秒,弃废液,加入500μl漂洗液WB,重复一遍。
7.将吸附柱AC放回空收集管中,13000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
8.取出吸附柱AC,放入一个新的离心管中,在吸附膜的中间部位加30-50μl洗脱缓冲液EB(事先在65-70℃水浴中加热效果更好),室温放置1分钟,12,000rpm离心1分钟。如果想得到较多量的DNA,可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,12,000rpm离心1分钟。洗脱体积越大,洗脱效率越高。如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是zuì小体积不应少于20μl,体积过小降低洗脱效率,减少DNA产量。
9.DNA可以存放在2-8℃,如果要较长时间存放,可以放置在-20℃。
储存条件:室温,有效期12个月。
本制品别名:病毒基因组DNA提取试剂盒
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