BTN3290 RNase抑制剂

RNase抑制剂(人源)(40U/μL)由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研目的，我公司的RNase抑制剂(人源)(40U/μL)品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括RNase抑制剂(人源)(40U/μL)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：RNase抑制剂(人源)(40U/μL)
英文名称：RNase Inhibitor From Human
产品货号：BTN3290
产品规格：2500U

本品是从细菌中分离的重组人RNase Inhibitor，其分子量为50 KD，能通过与RNase A 1:1形成非共价的复合体而抑制后者的活性，Ki为3*10-14M，该反应是可逆的，通过尿素及硫基类试剂能够解离复合体，使RNase 复活而抑制剂不可逆失活。本品属蛋白质性质，与其它竞争性抑制剂(核酸类、无机磷酸类)不同，可以很容易地通过苯酚处理将其从反应体系中除去。

产品特点：
1. 抑制范围广，可以抑制RNase A、RNase B、RNase C等RNase的活性，但不能抑制RNase T1、RNase H、S1 RNase和Aspergillus RNase的活性。
2.与SP6、T3和T7 RNA polymerase、AMV和MMLV 逆转录酶、Taq DNA聚合酶等兼容。
3.在广泛的pH范围(pH5-8)有活性。
4. 应用范围广，可以用于RT-PCR、cDNA 合成、in vitro transcription or translation等需要抑制RNase活性的酶反应中。

储存条件：低温运输，-20℃及保存，有效期一年。

使用方法：一般在有RNA的反应体系中加1-10U即可。

疑难解答：
Q：本产品抑制 RNase的Ki值是多少？
A：本产品是混合物，不能确定其Ki值。
Q：百奥莱博的液相RNase清除剂和RNA保存液都可以保存 RNA，都能灭活/抑制溶液中 2 ng/μL左右的RNase，它们的主要区别何在？
A：一是原理不同。前者通过共价修饰使 RNase 失活(类似于DEPC)；后者通过竞争抑制保护 RNA(类似于RNase Inhibitor)。二是兼容性不同。前者与很多后续反应兼容，故 RNA可以直接使用；后者会抑制很多后续反应，需要去除后在使用 RNA。三是稳定性不同。后者比前者更稳定，更耐热。

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货号	名称	规格
BTN3060	非冻型组织RNA保存液	250mL
BTN90203	miRNA分离纯化试剂盒(沉淀法)	50次
BTN131231	Oligo(dT)纤维素	25mg
BTN81027	TRIzol试剂伴侣	50次
BTN100935	超纯水	250mL
BTN100803	酸酚	100mL
BTN100805C	酸酚-氯fǎng-异戊醇混合液(RNA提取用)	250mL

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名称：石蜡包埋组织RNA提取试剂盒
货号：BTN81102
规格：30次
石蜡包埋组织本是珍贵的分子生物学研究材料，但是由于它们的保存时间一般都比较长，很不容易从中提取到可以进行PCR的RNA，存在的主要问题是RNA的降解和脱蜡过程中样品的丢失。本产品是专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快提RNA的试剂

试剂盒特点：
1.一管式操作，避免了可能的交叉污染和样品RNA的丢失。
2.含一步离心式脱蜡试剂，不需要使用有毒的二甲苯，健康环保。
3. 能有效去除基因组DNA的污染，得到的RNA可直接用于RT-PCR反应。
4. 即开即用，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30mL
溶液B	3mL
溶液C	5mL
溶液D	15mL
微量核酸沉淀剂	30mL
RNase-free水	10mL
说明书	1份

储存条件：低温运输，4℃保存(溶液C需要-20℃放置)，有效期一年。

使用方法：
1. 将5片厚度为6-8μM的石蜡包埋组织切片转移到1.5mL塑料离心管(zuì好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL溶液A，在振荡器上以zuì大速度振荡10秒。
2. 加入75μL溶液B，在振荡器上以zuì大速度振荡10秒。
3. 7000×g室温离心2分钟，溶液将形成两个相，其中组织切片位于下相。
4.小心吸弃上层液体。
5. 将离心管放入真空离心机中抽干下层的液体，一般需要一小时。
6. 加入150μL溶液C，55℃保温过夜。
7. 短暂离心，95℃保温10分钟。
8. 加入0.5mL溶液D，充分震荡半分钟。
9. 加入0.1mL自备氯fǎng，振荡器上充分振荡混均30秒。
10. 13000-5000×g室温离心3～5分钟。
11. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下100μL上清液不取。同时吸取上清时zuì好缓慢进行，否则容易吸出交界面的不可见的DNA。
12.在上清液中加入两倍体积的微量核酸沉淀剂，振荡器上振荡30秒混匀。
13. 13000-15000g室温离心5分钟，离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果需要提高RNA回收率，可以将离心时间延长到20或30分钟。
14.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
15.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL自备的75%乙醇，振荡混匀30秒。
16. 13000-15000g室温离心1分钟。
17.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
18. 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃沉淀。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的使用。
19.室温放1-2分钟后立即加入50-100μL RNA溶解液使RNA沉淀溶解。千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA将变得十分难溶。样品立即使用或存放于-80℃待用。
20. RNA完整性的电泳检测：
21. RNA产量产率测定：将5-10μL RNA溶于TE缓冲液中(pH7.5-8.2之间)检测其在OD260的光吸收。通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。
22. RNA纯度测定：无污染的总RNA的OD260/OD280一般在1.8-2.1之间(具体数值与其碱基组成和溶液成分等多种因素有关)，高于此范围则分别表示样品可能有蛋白质污染，但一般不影响RT-PCR等反应。

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