QN2876 脂质体转染试剂3000

脂质体转染试剂3000由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要脂质体转染试剂3000等克隆与表达产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括脂质体转染试剂3000在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：脂质体转染试剂3000
英文名称：Lipofectamine 3000 Transfection Reagent(
产品货号：QN2876
产品规格：0.75ml|1.5ml

脂质体转染试剂3000包含了我们zuì为的脂质体纳米颗粒技术，能够提供的转染性能，改善相关应用的结果及可重复性。此试剂具有优异的转染效率，并可提高细胞活性，广泛适用于难转染的及常见的细胞种类（例如HEK293和Hela细胞）。

脂质体转染试剂3000专门针对难转染的细胞种类进行了优化，能够为广泛的细胞种类提供的转染性能。其可转染的细胞类型包括：成纤维细胞（3T3、COS-7） 成肌细胞（C2C12、L6 CRL-1458），肝细胞（HepG2、HuH7），红白血病细胞（K562），乳腺癌（MCF7、Hs578T），前列腺癌（LNCap），肺癌细胞（A549、NCI-H460），骨肉瘤细胞（U-2 OS、Saos-2），结肠癌细胞（Caco2、SW480），胰腺癌细胞（PANC-1），皮肤黑色素瘤细胞（SK-MEL-28）

对于常见的细胞种类而言，脂质体转染试剂3000试剂相比其他试剂具有更高的浓度和更低的用量，从而为客户带来更好的。1.5mL规格产品即足以完成zuì多1500次的转染反应（24孔板中）。

脂质体转染试剂3000的脂质体用量在很宽的动态范围内均能保持很高的转染效率，可按需进行简便快速的条件优化。在需要将细胞损伤降至zuì低的相关应用中，建议使用低毒的脂质体用量（24孔板每孔使用0.75 µL）。

脂质体转染试剂3000适用于基因组编辑的相关应用。通过率的转染，它能够增加TALEN或CRISPR系统剪切和重组的成功概率，zuì终使得基因修饰的效率实现zuì大化，并简化后续处理步骤。

产品特点：
•提供的性能：我们针对难以转染的细胞种类实现了zuì高转染效率的试剂。
•提高细胞活性：对细胞作用温和，毒性很低。
•功能多样：同时适用于DNA、RNA及共转染应用。

保存条件：4℃，不可冷冻。

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名称：单细胞裂解液(DNA提取)
货号：BTN130803
规格：1mL
本产品为单细胞DNA提取专用裂解液，本裂解液经多次优化，含有多种去污剂、变性剂和盐，可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏，维持核酸结构的稳定。纯化所得DNA可用于全基因组扩增(WGA)等实验。本产品足够使用200次以上。

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期两年。

名称：DNA磷酸化试剂盒
货号：BTN130813
规格：20次
人工合成的PCR引物、linker和adaptor的5′端一般都是-OH基团而不是-PO4基团(除非额外付费要求在人工合成时加上-PO4基团)，而任何DNA连接酶都不能将一个DNA分子5′端的-OH基团和另一个DNA分子3′端的-OH基团进行连接，因此通过人工合成的DNA片段和天然DNA 之间的连接效率一般都比天然DNA 彼此的连接效率低(天然DNA 4个端口均可连接，人工合成的DNA跟天然DNA 有2个端口可以连接，人工合成的DNA之间没有任何端口可以连接)，尤其是在平末端连接时。本公司开发的DNA 磷酸化产品能将DNA分子5′端的-OH基团磷酸化。

产品特点：
1.可以快速把DNA的5′端的-OH基团变成-PO4基团，使人工合成的DNA(包括PCR产物)跟天然DNA一样有高的连接效率。
2. 既可以对单链DNA进行磷酸化处理，也可以对双链DNA片段同时磷酸化处理。
3.处理后的DNA可以直接用于连接反应、克隆等，不需要纯化。
4. 本产品足够20次DNA的磷酸化实验。

成分	规格
10×TPK缓冲液	50μl
ATP溶液(10mM)	100μl
T4 多核苷酸激酶(10U/μL)	20μl
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期为6个月。

使用方法：

一：双链DNA片段(5′端为-OH基团的)的磷酸化
注意：如果是PCR产物，一定要先胶回收，不能使用没经过纯化的PCR反应液，因为其中的残留PCR引物会耗掉大量的激酶，降低PCR产物的磷酸化效率。
1、在微量离心管中配制下列反应液(20μL)：

成分	用量
PCR胶回收片段	2μL(不超过10pmol)
10×TPK缓冲液	2μl
ATP溶液(10mM)	5μl
T4 多核苷酸激酶(10U/μL)	1μl
超纯水到	20μl

2、37℃反应30分钟。
3、70℃热处理5分钟，灭活酶。
4、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。

二：单链DNA片段的磷酸化
注：单链DNA 包括局部双链的DNA。引物，linker，adaptor，Oligo探针等均按此操作处理。
5、在微量离心管中配制下列反应液(20μL)：

成分	用量
单链DNA片段	5-10 pmol
10×TPK缓冲液	2μl
ATP溶液(10mM)	1μl
T4 多核苷酸激酶(10U/μL)	1μl
超纯水到	20μl

6、37℃反应30分钟。
7、70℃热处理5分钟，灭活激酶。
8、可直接用于后续克隆(加入量不要超过总体积的1/5)。如果使用浓度高，则可能需要乙醇沉淀法浓缩DNA。如果单链DNA的浓度低于5pmol，还需要在乙醇沉淀时加入核酸助沉剂。沉淀得到的DNA可溶解在适量的水中。

附：乙醇沉淀浓度DNA(本试剂盒不提供相关试剂，下列操作仅供参考：
1、在DNA溶液中加入0.1倍体积的3 M 乙酸钠溶液(pH5.2)。
2、再加入2.5倍体积的无水乙醇和4uL 核酸助沉剂。
3、混匀后12000g 4℃离心10分钟，小心弃上清。
4、加入1mL 70%乙醇，短暂离心3分钟后小心弃上清。
5、短暂离心5秒，吸弃残留液体(约30-50μL)。
6、室温放置2分钟干燥后加入适量的超纯水溶解DNA，立即使用或放-20℃长期保存。

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