SY0272 固相RNase清除剂(含喷雾瓶)

固相RNase清除剂(含喷雾瓶)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研试验，固相RNase清除剂(含喷雾瓶)是我司众多优质RNA提取纯化之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括固相RNase清除剂(含喷雾瓶)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：固相RNase清除剂(含喷雾瓶)
英文名称：Surface RNase Remover (with Spray Bottle)
产品货号：SY0272
产品规格：100 mL

RNase 清除剂（RNase Remover），一种RNase灭活试剂，其内含有的独特组分可清除实验器具表面的RNase，从而创造洁净的RNA工作环境。本品主要具有以下特点：1）功效同RNase Away，主要用来清除操作台、实验仪器、玻璃表面以及塑料表面等固相表面的RNase污染。2）即用型的溶液，只需要轻轻喷洒在固体表面，之后用干净纸巾擦拭干净即可，操作简易。3），无致癌性，无磨损。与强致癌性的DEPC不同，其对人体无任何毒害。处理后不需要高压灭菌。4）作用效率高，常规情况原液在几分钟内即可灭活固相表面多达100μg的各种RNase，包括：RNase T1、RNase H、BAL31、S1、Mung bean nuclease等。因此，本品可替代DEPC用来去除固相表面的RNase污染。


注意事项

1）本品具有一定的腐蚀性，操作时请穿好实验服，戴好手套和口罩，避免与眼睛、皮肤等的直接接触。另需避免用于某些易被腐蚀的金属表面；
2）避免试剂长时间暴露于空气中被氧化，或者产生挥发影响其pH值等，从而影响其使用效果。试剂瓶内的清除剂请拧紧盖子，喷壶内的清除剂请喷洒完后关闭旋钮。
3）本品在低温环境可能会变浑浊或者沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，切忌剧烈摇晃，以避免形成过量的泡沫。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

使用方法

1.工作平台的清洁
1.1根据实验室的污染程度，使用固相RNase 清除剂原液或10倍的新鲜稀释液进行工作台面RNase去除。注意：10倍稀释的溶液请在1天内用完。不要做更大倍数的稀释，否则会影响去除效果。
1.2将原液或者10倍稀释的溶液直接装入配套的喷壶内，均匀喷洒在工作台面上，5-10min后用普通吸水纸擦去表面RNase 清除剂，然后用高压灭菌水淋洗，用新的吸水纸擦干即可。

2.实验设备的清洁
2.1根据实验室的污染程度，使用固相RNase 清除剂原液或10倍的新鲜稀释液进行实验设备RNase去除。
2.2将原液或者10倍稀释的溶液小心倒在纸巾上，用充分润湿的擦镜纸来擦拭仪器表面（注：对于小的实验设备部件也可短时间浸泡在溶液中，时间控制在5-10min内），5-10min后用干净纸巾擦去表面RNase 清除剂，然后用高压灭菌水淋洗，用新的吸水纸擦干或者自然风干。
注意：对于金属器械的处理，若用原液去除一定要控制时间在5min内。

3.塑料和玻璃容器
3.1 根据实验室的污染程度，使用固相RNase 清除剂10倍或100倍的新鲜稀释液进行塑料和玻璃容器内的RNase去除。注意：10倍或100倍稀释的溶液请在1天内用完，不要做更大倍数的稀释，否则会影响去除效果。
3.2 加入足量的RNase清除稀释液到容器内，使所有的待处理容器表面都充分接触到RNase清除稀释液（如果是离心管，可以漩涡震荡1-2min）。5-10min后取出。再用1000倍或者10000倍稀释的新鲜RNA清除液浸泡二次以上，倒立晾干后备用。

4.枪头和水的处理
注意：本品对于枪头和水的处理效果不如DEPC好，如果需要做比较且严格的RNA研究，请用DEPC来做RNase清除处理；若需要直接就RNA纯化产物进行溶解，请使用DEPC处理的水和枪头进行操作。其他的RNA相关实验，如RNA电泳，可用本品进行处理。
4.1 对于水：直接将固相RNase 清除剂原液按1:1000的比例加入到需要处理的水中，混合均匀后室温放置24小时即可直接使用，得到的水可以配制电泳溶液等用途。注意：稀释的新鲜清除液需要一天内用完。
4.2 对于枪头：直接将固相RNase 清除剂原液按1:1000的比例稀释，用来充分浸泡枪头（不要有气泡）处理5-10min。再用1000倍或者10000倍稀释的新鲜RNA清除液浸泡二次以上，晾干后备用，也可直接使用。

储存条件：4℃，有效期一年。

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名称：动物RNA提取试剂(TRIzol)
货号：BTN3070
规格：100mL
本试剂盒是类似于TRIzol、基于异硫氰酸胍/酚/氯fǎng提取原理的快速总RNA提取试剂，可用于从各种动物组织(包括白细胞)和部分植物材料中快速提取总RNA。

产品特点：
1. 操作简单快速，只要10分钟左右，可以全在室温下进行。
2. RNA 质量高，OD260/OD280一般在1.9左右。一般不含用RT-PCR可以检测到的基因组DNA污染。
3.适用于大部分实验材料，如培养细胞、各种动物材料和少数植物材料。植物RNA的提取zuì好使用植物RNA提取试剂盒。
4. 高于进口TRIzol和TRI Reagent等同类产品。

储存条件：常温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：
注意：下面的操作步骤是用1mL 本产品进行的微量提取的，细胞使用量一定要准确，不能超过下述用量，否则将超出本产品的裂解能力，RNA产量将急剧降低。如果样品量大，请按比例增加各成份的用量。RNA 工作环境zuì好用的固相RNase清除剂(BTN3080)彻底处理。
1. 对贴壁细胞(10 平方厘米)：吸尽培养液，加入1mL的本产品用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移至干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6 步。
2. 对悬浮细胞(五百万至一千万个)：离心收集细胞，吸尽液体，加入1mL本产品，用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6 步。
3. 对新鲜组织(50-100mg)：将新鲜组织剪切成小块，放入10mL或15mL塑料离心管中，加入1mL的本产品，用Polytron 剪切式匀浆器冰上匀浆30秒左右，将匀浆液转移至新的1.5mL塑料离心管中，进入第6步。注意：对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA)，使用量不要超过30-50mg，否则十分容易产生DNA污染。对10mg以下的组织，zuì好加入本公司的微量RNA 助沉剂。
4. 对RNAhold 保存的组织(50-100mg)：先用纸吸去RNAhold液体后再剪切成小块，其余操作同第3 步。RNAhold处理后的组织韧性很强，匀浆时间需要适当延长。
5. 对液氮中保存的组织(50-100mg)：在研钵中研磨成粉，加入1mL 本产品，用枪充分吹打确保细胞全部裂解，然后将裂解液转移到干净的1.5mL塑料离心管中，进入第6 步。
6.在装有裂解物/匀浆物的1.5mL塑料离心管中加入0.2mL自备氯fǎng，振荡器上充分振荡混均30秒。注意：一定要把官底的溶液震荡起来，否则只是液面的振动。
7. 13000-15000g室温离心3分钟。
8. 将上清液(约0.6mL)转移到另一干净的1.5mL塑料离心管中。下层有机相(蓝色)和中间层含有DNA和蛋白质，避免触及，否则将产生蛋白质和DNA污染。为保险起见，可以留下50-100μl上清液不取。
9. 对脂类丰富的组织(如脂肪组织和脑组织)，需再重复氯fǎng抽提一到两次以让氯fǎng充分去除脂类分子。
10.在上清液中加入等体积的异丙醇，振荡器上振荡30秒混匀。
11. 13000-15000g室温离心5分钟，离心底的侧面将形成RNA沉淀。如果组织使用量低于10mg或需要提高RNA 回收率，可以将离心时间延长到20或30分钟。
12.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
13.在含RNA沉淀的离心管中加入1mL 75%乙醇，振荡混匀30秒。
14. 13000-15000g室温离心1分钟。
15.小心吸弃上清液，注意不要吸弃RNA沉淀。
16. 重复第13-15的洗涤步骤一次(也可以省略)。
17. 短暂快速离心，用移液枪小心吸弃残留乙醇(约50μL)。注意不要吸弃RNA
沉淀。此步十分重要，否则残留的乙醇会影响RNA的后续使用。
18.室温放1-2分钟后立即加入50-100μl RNase-free 水使RNA沉淀溶解。
千万不要用真空离心法使RNA沉淀过于干燥，否则RNA 将变得十分难溶。RNA样品可以立即使用或存放于-80℃待用。
注意：由于RNase-free 水没有主动灭活残留RNase的功能，而任何方法提取的RNA 都可能有残留的RNase，所以强烈建议客户使用本公司推出的具有主动灭活残留RNase 功能的、同时跟后续RT-PCR等反应兼容的液相RNase 清除剂(BTN3091)。

附一：RNA 完整性的电泳检测(仅供参考，本产品不含相关试剂)
如果需要做Northern杂交，强烈建议用户使用甲醛变性胶进行RNA电泳，因为非变性胶不能分离所有的RNA分子(BioTechniques，28：414，2000)。如果是简单检测，可以使用TAE缓冲液或超快核酸电泳液进行常规电泳，但文献报道必须使用RNAload这样的变性上样液(BioTechniques，9：558，1990)。普通DNA上样液不含变性剂，也没经过去RNase处理，所以zuì好不要使用，否则RNA容易降解。
动物RNA电泳后应该在UV下呈现三条清晰的rRNA 带，28S rRNA条带的荧光强度一般比18S rRNA 条带的荧光强度强1.5-2.3倍。如果这两条rRNA 带不清晰或比例小于此范围则表示RNA 有降解(因为大的RNA 被酶降解的可能更大)。
跟动物一样，植物果实和种子的RNA一般有三条电泳带，但植物叶片的RNA 有四条或更多rRNA带，多余的RNA 来源于叶绿体。
如果电泳发现RNA样品中有DNA污染(一般是使用过多样品造成)，可分别用非酶DNA 清除剂或RNase-free DNase 清除。

附二：RNA产量和纯度测定(仅供参考，本产品不含相关试剂)
用pH在7.5-8.2的TE缓冲液将5-10μL RNA稀释10-20倍后在OD260和OD260测光吸收，通过光吸收可以得出RNA浓度(1 OD260的RNA=40μg/mL)，进而计算出RNA的产量(浓度×体积)和产率(RNA产量/组织用量)。RNA的产率还随组织的营养状态和组织的种类不同而不同，一般来说，代谢旺盛的组织(如肝脏和肾脏)RNA的产率高，代谢不旺盛的组织(如肌肉和脂肪组织)RNA的产率低，下面是常见动物组织的RNA产率:
肌肉，胎盘和脑组织: 1-2μg RNA/mg 组织
肝，胰和肾组织: 5-10μg RNA/mg 组织
培养细胞: 5-15μg/10E6细胞
RNA的纯度通过OD260/OD280 来确定，一般在1.8-2.1之间即算合格。但即使低于此范围，一般也不会影响RT-PCR等反应。
蛋白质污染可以通过酚/氯fǎng抽提一次然后酒精沉淀去除，多糖污染可以用多糖清除剂去除。

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