WH0021 海洋动物组织基因组DNA提取试剂

海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于科研试验，海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)是我司众多优质DNA提取纯化之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。...

特别提示：包括海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：海洋动物组织基因组DNA提取试剂盒（离心吸附柱法)
英文名称：Extraction kit for genomic DNA from marine animals tissue
产品货号：WH0021
产品规格：50次|200次

本试剂盒是特别针对海洋动物的基因组提取试剂盒，已成功提取到鱼类、虾类、贝类、蟹类等海洋动物组织基因组DNA。无需酚/氯fǎng抽提，使用安全快捷方便，可zuì大限度去除海洋动物组织中的蛋白、脂肪及其他有机化合物等杂质。使用本试剂盒提取的基因组DNA可适用于各种常规操作，包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

产品特点：
·专用性强：专为针对海洋动物开发出来的专项产品。
·操作时间短：1-2h左右即可获得高质量的海洋动物基因组DNA。
·害：无需使用酚氯fǎng等有害试剂，操作安全。
·纯度高：可直接用于PCR、酶切、杂交等分子生物学实验。

提取得率：

材料	建议孵育时间	DNA得量
贝类组织	0.5 h	12-20μg
虾组织	1 h	8-14 μg
鱼类组织	1 h	15-40 μg

提取实例：

虾夷扇贝基因组提取，起始量：腮20mg，其余30mg，100μl洗脱，3μl上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min。Marker：λDNA/Hind III


鲫鱼基因组DNA提取，起始量：腮20mg，肌肉30mg，100μl洗脱，3μl上样，琼脂糖凝胶浓度为1%，6V/cm，电泳20min；Marker：λDNA/Hind III



试剂盒组成：

组分	50T	200T
缓冲液GA	15ml	50ml
缓冲液GB	15ml	50ml
缓冲液GD	13ml	52ml
漂洗液PW	15ml	50ml
洗脱缓冲液TE	15ml	60ml
Proteinase K	1ml	4×1ml
吸附柱CB3	50个	200个
收集管（2ml）	50个	200个

保存条件：室温（15-25℃）干燥条件下，可保存12个月，更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下，若溶液产生沉淀，使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时间，必要时可在37℃水浴中预热10min，以溶解沉淀。

选配组分：RNase A（100mg/ml）（目录号：WH0217）

注意事项：（请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项)
1．样品应避免反复冻融，否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
2．若缓冲液GA或GB中有沉淀，可在37℃水浴中重新溶解，摇匀后使用。
3．所有离心步骤均为使用台式离心机，室温下离心。

使用方法：
使用前请先在缓冲液GD和漂洗液PW中加入无水乙醇，加入体积请参照瓶上的标签。

1．切取不多于30mg的组织材料，放入装有200μl GA缓冲液的离心管中，涡旋振荡15sec。
  注意：根据提取的组织不同，起始量也稍有不同，腮的细胞量较大，一般建议提取量不超过20 mg。
  如果需要去除RNA，可加入4 μl RNase A（100 mg/ml）溶液（客户自备，目录号：WH0217），振荡15 sec，室温放置5 min。
2．加入20 μl Proteinase K （20 mg/ml)溶液，涡旋混匀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。在56℃放置，直至组织完全溶解，简短离心以去除管盖内壁的水珠，再进行下一步骤。
  注意：不同组织裂解时间不同，通常需0.5-2h即可完成。扇贝组织0.5 h基本可裂解完全，虾和鱼类组织1 h。每小时振荡混合样品2-3次，每次振荡混匀15 sec。
3．加入200μl缓冲液GB，充分颠倒混匀，70℃放置10min，溶液应变清亮，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
  注意：加入缓冲液GB时可能会产生白色沉淀，一般70℃放置时会消失，不会影响后续实验。如溶液未变清亮，说明细胞裂解不彻底，可能导致提取DNA量少和提取出的DNA不纯。
4．加人200μl无水乙醇，充分颠倒混匀，此时可能会出现絮状沉淀，简短离心以去除管盖内壁的水珠。
5．将上一步所得溶液和絮状沉淀都加入一个吸附柱CB3中（吸附柱放入收集管中），12000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放回收集管中。
6．向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD（使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12,000rpm （~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
7．向吸附柱CB3中加入600 μl漂洗液PW （使用前请先检查是否已加入无水乙醇），12000rpm（~13400×g)离心30 sec，倒掉废液，将吸附柱CB3放入收集管中。
8．重复操作步骤7。
9．将吸附柱CB3放回收集管中，12000rpm（~13400×g)离心2 min，倒掉废液。将吸附柱CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
  注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除，漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应（酶切、PCR等）实验。
10．将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，12000rpm （~13400×g)离心2 min，将溶液收集到离心管中。
  注意：洗脱缓冲液体积不应少于50 μl，体积过小影响回收效率。为增加基因组DNA的得率，可将离心得到的溶液再加入吸附柱CB3中，室温放置2 min，12000rpm（~13400×g )离心2 min。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用ddH2O做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5范围内，pH值低于7.0会降低洗脱效率；且DNA产物应保存在-20℃，以防DNA降解。

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名称：一步离心式石蜡清除剂
货号：BTN70302
规格：100次
用石蜡包埋组织作为材料进行PCR的难题之一是如何有效去除石蜡，因为残留的石蜡不但会影响DNA提取，还会干扰PCR扩增。常规的脱蜡方法一般需要1-2小时的时间，需要多次离心，每次离心都会造成样品的丢失。本产品只需要一步离心，克服了常规方法的缺点。

产品特点：
1.快速简单，只需要离心一次，免去了反复换液和离心，减少了样品的丢失。
2. 脱蜡效果好，跟经典的二甲苯/乙醇法相当。
3. 即开即用，客户自己不需要准备额外的试剂。

产品组成：

成分	规格
溶液A	100mL
溶液B	7.5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

使用方法：
1. 将1mL溶液A加入到1.5mL塑料离心管中。
2. 放入一片不超过25μm的石蜡包埋组织切片。
3.以zuì大速度振荡10秒。
4. 加入75μL溶液B。
5. 振荡10秒混合。
6. 7000 g离心2分钟，小心吸弃上清。
7.真空抽干机抽干离心管中残留的液体。此步骤约需要一小时。
8. 得到的石蜡包埋组织切片即可用于DNA提取。

名称：石蜡包埋组织DNA提取试剂盒
货号：BTN70502
规格：30次
本试剂盒是专门用于从甲醛和非甲醛固定的石蜡包埋组织中快提基因组DNA的试剂。石蜡包埋组织本是珍贵的分子生物学研究材料，但是由于它们的保存时间一般都比较长，很不容易从中提取到高质量的DNA，存在的主要问题是DNA的断裂和脱蜡过程中样品的丢失。

产品特点：
1.一管式操作，避免了可能的交叉污染和样品DNA的丢失。
2.含一步离心式脱蜡试剂，不需要使用有毒的二甲苯，健康环保。
3. 得到的提取物可以直接用于PCR反应。
4. 得到的DNA的OD260/280一般在1.6左右，长度在0.4-25 Kb 之间，可以直接作为PCR 模板。
5. 即开即用，客户自己不需要准备额外的试剂。

试剂盒组成：

成分	规格
溶液A	30ml
溶液B	3ml
溶液C	5ml
说明书	1份

储存条件：常温运输及保存(溶液C需要-20℃保存)，有效期一年。

使用方法：
1. 将一片常规的石蜡包埋组织切片转移到1.5mL塑料离心管(zuì好使用螺旋盖离心管)中并加入1mL溶液A，在振荡器上以zuì大速度振荡10秒。
2. 加入75μl溶液B，在振荡器上以zuì大速度振荡10秒。
3. 7000g室温离心2分钟，溶液将形成两个相，其中组织切片位于下相。
4.小心吸弃上层液体。
5. 将离心管放入真空离心机中，7000g离心，抽干下层的液体，一般需要一小时。
6. 加入150μL溶液C，55℃保温过夜。
7. 7000g 短暂离心，95℃保温10分钟。
8. 7000g室温离心5分钟，转移上清到新的离心管中待用。
9. PCR 检测时，一般在50μl PCR体系中加入1-5μL的模板DNA。
 注意:很多时候样品中会有未明的PCR 抑制物，多加模板反而会抑制PCR反应。加入百奥莱博的PCR抑制物清除剂(BTN60804)可能会有帮助。

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