ALH338 无缝连接克隆试剂盒

无缝连接克隆试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，仅用于生物化学研究方面，我公司的无缝连接克隆试剂盒品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括无缝连接克隆试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：无缝连接克隆试剂盒
英文名称：Seamless Assembly and Cloning kit
产品货号：ALH338
产品规格：10次

本试剂盒不依赖于T4连接酶，不受载体和目的片段的酶切位点限制，而直接用同源重组的方法，采用特殊的重组酶可以将任意方法线性化后的载体和与其两端具有 15-25bp 重叠区域的PCR片段定向重组，可以快速实现 1-5 个片段的无缝克隆。

试剂盒特点：
1.30分钟可以将一个或者多个长、短PCR扩增片段（平端、A端均可）插入载体。
2.不受载体和插入片段酶切位点的可用性和平端/粘性末端的限制，可以在任意位点进行克隆。
3.无缝克隆，插入点不会引入不需要的碱基序列。
4.、准确，阳性率＞95% 。

储存条件：-20℃。

本制品别名：通用型连接克隆试剂盒

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名称：大肠杆菌DH10B化学感受态细胞
货号：BTN140374
规格：0.1mL*10
本产品是采用大肠杆菌DH10B菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。

产品特点：
1. 使用 pUC19质粒检测，转化效率可达10，-80℃保存几个月转化效率不发生改变。
2.可用于转化150Kb大小的质粒，可用于蓝、白斑筛选。
3. DH10B菌株基因型：F- mcrA Δ(mrr -hsdRMS-mcrBC)Φ80lacZΔM15 ΔlacX74 recA1 endA1araD139 Δ(ara,leu)7697 galU galK λ- rpsL nupG
4. 本产品质量稳定，使用方便，质优价廉。

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μl，可以根据实际情况分装使用。
以下实验以100μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击90秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含有相应抗生素的LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1、涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm ，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2、新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3、涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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货号	名称	规格
BTN140576	pression/BTN140576.html" target="_blank">大肠杆菌DH10Bac化学感受态细胞	0.1mL*10
BTN140382	pression/BTN140382.html" target="_blank">农杆菌AGL1化学感受态细胞	10×100μL
JN0105	pression/JN0105.html" target="_blank">2×pED-T vector快速连接预混液	20次
JN0110	pression/JN0110.html" target="_blank">pBalbAvi质粒	20次(1μg)
JN0125	pression/JN0125.html" target="_blank">BL21(DE3)感受态细胞(pG-KJE8分子伴侣)	100μl×10
QN1062	pression/QN1062.html" target="_blank">pEGFP-N1 哺乳动物表达载体	20μl

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