WE0184 唾液基因组DNA提取试剂盒

产品简介
唾液基因组DNA提取试剂盒由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于科研试验,唾液基因组DNA提取试剂盒是我司众多优质DNA提取纯化之一,质量堪比同类进口产品,价格非常优惠,目前正热烈促销中,恭候您的咨询订购。...
产品详细介绍
特别提示:包括唾液基因组DNA提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:唾液基因组DNA提取试剂盒
英文名称:Saliva DNA Extraction Kit
产品货号:WE0184
产品规格:50次|200次
本试剂盒适合于从新鲜唾液或唾液/保存液混合液中提取基因组DNA。本产品纯化过程不需使用苯酚或lǜ仿等有毒溶剂,无需乙醇沉淀。优化的缓冲体系使DNA特异地结合到硅基质离心吸附柱上,PCR和其他酶促反应的抑制剂可通过两步洗涤步骤被有效去除,zuì后使用低盐缓冲液或水洗脱,即可得到高纯度DNA。纯化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文库构建、Southern Blot、分子标记等下游实验。
试剂盒组成:
组份 | 50次 | 200次 |
Buffer GL | 25ml | 100ml |
Buffer GW1(浓缩液) | 13ml | 52ml |
Buffer GW2(浓缩液) | 15ml | 10ml |
Buffer GE | 15ml | 60ml |
蛋白酶K | 2×25mg | 180mg |
蛋白酶K 储存液 | 2×1.25ml | 2×5ml |
吸附柱DM及收集管 | 50套 | 200套 |
自备试剂:无水乙醇
实验前准备及重要注意事项:
1、向蛋白酶K 中加入用量(1.25ml/9ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解,使其浓度为20mg/ml。配制好的蛋白酶K -20℃保存,勿长时间室温放置,以免影响其活性。其他组分可以在干燥、室温(15-25℃)环境下稳定保存一年。如需保存更长时间,可置于2~8℃。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。
3、次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、如果下游实验对RNA污染比较敏感,可以在第3步中加入4μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml),RNase A本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0225。
6、若要在室温下长时间保存唾液DNA,推荐使用本公司的唾液DNA保存管(货号:WE0402)。
操作步骤:
1、加入唾液样本或唾液/保存液混合液400μl 。
注意:
1)加入保存液的唾液混合物需在提取前50℃水浴1小时或50℃空气温箱2小时。
2)如需要增加样本体积,则倍比增加步骤2-4中的蛋白酶K 、Buffer GL和无水乙醇的体积,步骤5中液体可分多次转入。
2、加入40μl 蛋白酶K 。
3、加入400μl Buffer GL,涡旋震荡充分混匀,56℃水浴15-30分钟。
注意:如需去除RNA,可在上述步骤完成后,加入4μl浓度为100 mg/ml的RNase A溶液(货号:WE0225),涡旋15秒,室温放置2分钟。
4、短暂离心以去除管盖内壁的水珠。加入400μl无水乙醇,涡旋震荡充分混匀。短暂离心。
注意:
1)加入Buffer GL和无水乙醇后要立即涡旋震荡混匀。
2)加入Buffer GL和无水乙醇后可能会产生白色沉淀,不会影响后续实验。
3)GL和无水乙醇后可能形成溶胶状产物,此时推荐进行剧烈震荡或涡旋处理。
5、上一个步骤中所得溶液全部加入到已装入收集管的吸附柱(Spin Column DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。12000rpm(~13400 ×g)离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
6、向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇),12000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:如需进一步提高DNA纯度,可重复步骤7。
8、12000rpm离心2分钟,倒掉收集管中废液。将吸附柱置于室温数分钟,以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附柱的中间部位悬空加入50-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,12000rpm离心1分钟,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)Buffer GE在65-70℃水浴预热,离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
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