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产品详情

YT246 PPAR凝胶迁移突变探针

  • 产品/服务:YT246 PPAR凝胶迁移突变探针
  • 型 号:YT246
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-04-21
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:1087
产品简介

PPAR凝胶迁移突变探针(1.75μM)是高品质的凝胶迁移EMSA产品,由北京百奥莱博供应,本产品仅用于生物化学研究方面,本产品质量好,且具价格,深为用户称道,了解更多PPAR凝胶迁移突变探针(1.75μM)等凝胶迁移EMSA产品请联系我司咨询订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括PPAR凝胶迁移突变探针(1.75μM)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:PPAR凝胶迁移突变探针(1.75μM)
英文名称:PPAR Mutation Probe For EMSA(1.75μM)
产品货号:YT246
产品规格:60μl

本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的PPAR consensus oligonucleotide的突变体。可以作为EMSA探针-PPAR的阴性对照,用于EMSA结合反应中突变探针的冷竞争反应等。这里所指的PPAR包括PPARα、PPARβ和PPARγ。一个包装的突变探针,如果用于同位素标记EMSA探针的突变探针冷竞争反应,可以进行30-60个突变探针的冷竞争反应。

PPAR consensus oligo的序列如下:
5"-CAA AAC TAG GTC AAA GGT CA-3"
3"-GTT TTG ATC CAG TTT CCA GT-5"

EMSA突变探针-PPAR中PPAR的公认的结合位点发生了突变,从而使PPAR无法和该突变探针结合。在探针冷竞争反应中,正常的标记探针和PPAR的结合的条带会被抑制;而在突变探针冷竞争反应(cold competition)中,正常的标记探针和PPAR的结合的条带不会被抑制。参考下图。


一个典型的EMSA/Gel- Shift分析图
1,阴性对照反应(标记探针);
2,常规反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针);
3,探针冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记探针);
4,突变探针的冷竞争反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+标记探针100倍量的未标记突变探针);
5,Super-shift反应(含激活的目的转录因子的核蛋白+标记探针+目的转录因子的特异抗体)。

注意事项:
1. 避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。
2. 对于EMSA的详细操作可以参考我们的EMSA试剂盒的使用说明。

储存条件:-20℃,有效期一年。

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名称:凝胶迁移探针生物素标记试剂盒
货号:YT189
规格:20次
本试剂盒是通过TdT把生物素标记的dUTP添加到单链DNA 3"末端,然后通过退火产生生物素标记的EMSA探针的试剂盒。通常DNA的3"末端被标记后不会干扰基于序列特异性蛋白结合的EMSA检测。Terminal Deoxynucleotidyl Transferase(TdT)可以在不依赖于模板的情况下催化在DNA的3"-OH端加上dNTP的反应。关于TdT催化双链DNA末端加dNTP的反应效率,3"端突出的双链DNA要比平端或3"端缩进的双链DNA高很多。TdT催化单链DNA末端加dNTP的反应效率要比双链DNA高很多。在适当的条件下,TdT也可以催化RNA 3"末端加NTP的反应。

本试剂盒适合标记纯化的单链DNA,如果用于标记EMSA探针,可以在单链标记后再进行退火。本试剂盒中提供了已经用生物素标记好的Biotin-Control Oligo,可以用作检测DNA标记效率的对照。如果每个标记反应的探针量为5pmol,本试剂盒可以用于20个标记反应。

试剂盒组份:
TdT Buffer(5X)———————————250μl
TdT(10U/μl)————————————20μl
Biotin-11-dUTP(5μM)————————100μl
Biotin-Control Oligo(0.4μM)————100μl
Ultrapure water———————————1ml
探针标记终止液———————————200μl
TE—————————————————15ml
退火缓冲液(10X)——————————150μl


储存条件:-20℃。

名称:封闭液(YT190专用)
货号:YT191
规格:380ml
本封闭液是用于百奥莱博的化学发光法EMSA试剂盒(YT190)的专用试剂。化学发光法EMSA试剂盒中已经提供了适量的封闭液,但在某些需要使用较大量封闭液的情况下,可以购买本试剂用于化学发光法EMSA试剂盒的相关检测。

储存条件:4℃。


名称:AP1凝胶迁移探针(1.75μM)
货号:YT193
规格:60μl
本探针是用于EMSA(也称gel shift)研究的AP1 consensus oligonucleotide。这个双链寡核苷酸含有公认的AP1结合位点,可以用作EMSA研究时的探针。

AP1 consensus oligo的序列如下:
5"-CGC TTG ATG ACT CAG CCG GAA-3"
3"-GCG AAC TAC TGA GTC GGC CTT-5"

本EMSA探针可以使用T4 Polynucleotide Kinase在[γ-32P]ATP存在的情况下进行标记,也可以用于生物素标记。

一个包装的探针可以进行约30个同位素标记探针的反应,每次标记的探针可以测定约100个样品;或约可以进行20个生物素标记探针反应。如果作为未标记的探针用于同位素标记探针的冷竞争(cold competition),可以进行30-60个冷竞争反应。

注意事项:避免加热到40℃以上,温度过高会导致双链DNA探针解聚成单链。而单链无法用于EMSA研究。

储存条件:-20℃,有效期一年。

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