KFS203 Caspase 8荧光法检测试剂

Caspase 8荧光法检测试剂盒(AFC)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，用于生化实验研究等领域，本品质量稳定，价位合理，需要Caspase 8荧光法检测试剂盒(AFC)等细胞凋亡与增殖产品的客户，请到我公司官网联系我们。...

特别提示：包括Caspase 8荧光法检测试剂盒(AFC)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Caspase 8荧光法检测试剂盒(AFC)
英文名称：Caspase-8 Fluorescence Metric Assay
产品货号：KFS203
产品规格：20T|50T|100T

本试剂盒适用于培养细胞及新鲜组织Caspase-8 检测。Caspase 家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用，其中Caspase-8 为关键的执行分子，与DNA 断裂、染色质凝聚和凋亡小体形成有关。Caspase-8 在正常状态下以酶原的形式存在于胞浆中，没有活性；但在细胞发生凋亡阶段，它被激活，活化的Caspase-8 由两个大亚基和两个小亚基组成，裂解相应的胞浆胞核底物，zuì终导致细胞凋亡。Caspase-8 荧光检测试剂盒就是将Caspase-8 序列特异性的多肽偶联至发色基团。当底物被Caspase-8 剪切后，发色基团即游离出来，可通过荧光酶标仪测定其荧光强度（激发波长=485nm,发射波长=535nm）。

注意事项
1. Caspase-8 Substrate 避光保存及使用。
2. 对某些凋亡诱导剂引起的细胞凋亡可能存在非依赖于Caspase-8 活化的机制，这种情况时利用本试剂盒检测Caspase-8 活性无明显改变，需要考虑凋亡机制中的其他信号通路。
3. 细胞数量需达到3~5×106 个或新鲜组织50~100mg，以便能达到测定需要的100~200μg 蛋白的要求，因为Caspase-8 的活性与细胞裂解液的蛋白含量有关，如测定的RFU 值偏低，可以通过适当延长反应的时间，如果值还是不高，可通过增加细胞数量或组织量的方法来提高蛋白量。

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货号	名称	规格
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货号：SNM511
规格：100T|50T|20T

名称：TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(FITC标记POD法,通用)
货号：KFS197
规格：20T|50T|100T
TUNEL 细胞凋亡检测试剂盒（FITC 标记/POD 法）是用来检测细胞在凋亡过程中细胞核DNA 的断裂情况，其原理是生物素（biotin）标记的dUTP 在脱氧核糖核苷酸末端转移酶（TdT Enzyme）的作用下,可以连接到凋亡细胞中断裂DNA 的3’-OH 末端，再以streptavidin-FITC 与生物素结合，使结果可用荧光显微镜检测；荧光素亦可被偶联过氧化物酶Peroxidase（POD）的抗荧光素抗体(POD-conjugated Anti-FITC)标记,在POD 底物二氨基联苯胺（DAB）的存在下，产生很强的颜色反应（呈棕色），特异准确地定位正在凋亡的细胞，因而在普通光学显微镜下即可观察和计数凋亡细胞。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA 的断裂，因而没有3’-OH 形成，很少能够被标记或染色。

注意事项
1. 各个样本请用免疫组化笔做好标记，另外加2 张样本切片分别用于阳性片和阴性片制备并做好标记。
2. 在每步反应或浸洗的间隙时，配制下一步即用的工作液。
3. 反应液zuì好根椐计算好的样本数量集中配制，再分别滴加于各样本上，避免因每个样本单独配制而产生的试剂损耗，TdT 酶反应液如需短暂保存时，请置于冰上。
4. 配制好的DAB 工作液应为浅棕色，如颜色过深，请勿使用。
5. 操作请戴手套，防止试剂沾染皮肤，如有沾染请立即用大量清水冲洗。

名称：WST-1细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒
货号：KFS319
规格：100T|500T
叠氮类四唑盐是一种类似于MTT 的化合物，在电子耦合试剂存在的情况下，可以被线粒体内的一些脱氢酶能够被还原成橙黄色水溶性的甲月赞。生成的甲臜能够溶解在组织培养基中，生成的甲臜量与活细胞数量成正比。细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。

此法是用于测定细胞增殖或毒性试验中活细胞数目的一种高灵敏度、高稳定性且无放射性的比色检测法。实验的灵敏度比其它四唑盐如MTT, XTT, MTS 高，线性范围更宽。

我司四唑盐对细胞无明显毒性。加入我司四唑盐显色后，可以在不同时间反复用酶标仪读板，使检测时间更加灵活，便于找到zuì佳测定时间。

注意事项
1. 本试剂盒的检测依赖于脱氢酶催化的反应，如果待检测体系中存在较多的还原剂，例如一些抗氧化剂会干扰检测，需设法去除。
2. 如果待测溶液有还原性，测定不含细胞，但含有我司四唑盐的待测溶液在450 nm 处的空白吸光度。如果该吸光度很小，则可以直接加入我司四唑盐，如果吸光度相对较大，则需要除去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100 μl 培养基和10 μl 我司四唑盐进行检测。
3. 用酶标仪检测前请确保孔内没有气泡，否则会干扰测定。
4. 为保证您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入细胞100μL/孔（约1×104），置37℃ 5%CO2 细胞培养箱培养24 小时。
2. 加入适当浓度的受试化合物。
3. 将96 孔板在37℃，含5% CO2 空气及湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4. 向各孔中加入10 μl 的我司四唑盐工作液。
5. 37℃下孵育1～4 小时。
6. 酶标仪在450nm 波长处检测每孔的光密度。

结果分析
1. 细胞的存活率：将各测试孔的OD 值减去本底OD 值（完全培养基加我司四唑盐，无细胞）或空白药物孔OD 值（完全培养基加受试药物的不同稀释度加我司四唑盐，无细胞），各重复孔的OD 值取均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示，T 为加药细胞的OD 值，C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =（加药细胞OD/对照细胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)。

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