QN4060 明胶-琼脂糖凝胶4FF

明胶-琼脂糖凝胶4FF是高品质的分离试剂类产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科学研究，我公司的明胶-琼脂糖凝胶4FF品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。...

特别提示：包括明胶-琼脂糖凝胶4FF在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：明胶-琼脂糖凝胶4FF
英文名称：Gelatin Sepharose 4FF
产品货号：QN4060
产品规格：25ml

明胶-琼脂糖凝胶4FF是采用溴化氰法将明胶耦合到琼脂糖凝胶4FF基质上的一种亲和层析填料。明胶是一种高分子糖蛋白，在多种细胞的表面和许多细胞外液（包括血浆）中都发现了明胶的存在，它可以特异性的结合纤维连接蛋白。明胶琼脂糖凝胶4FF是专为纯化或除去纤维连接蛋白的一种亲和层析填料。

技术参数：
基质：高度交联的4%琼脂糖凝胶
颗粒大小：45～165μm
平均颗粒大小：90μm
配基：牛明胶衍生物
配基密度：每ml填料约5mg明胶
连接化学基团：CNBr
zuì大流速：200cm/h
耐压：0.1MPa
pH稳定性：pH3.0～10.0
化学稳定性：所有常用的水相缓冲液
保存液体：20%乙醇
保存温度：4～8℃

使用方法：
1．准备凝胶
① 让凝胶和所有的试剂达到工作时的温度。
② 配制初始缓冲液（平衡液）和洗脱缓冲液。
③ 明胶琼脂糖凝胶4FF是保存在20%的乙醇溶液中，取适量凝胶，清洗掉20%的乙醇，抽干。用缓冲液（按凝胶：缓冲液=3：1的比例）配成匀浆。
2．装柱
① 将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。
② 用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意勿使产生气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。
③ 打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2~3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。
3．平衡让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。
4．上样
① 样品用平衡液配制，常用磷酸盐缓冲液或Tris-HCl缓冲液，浑浊的样品要离心和过滤后上样。
② 一般情况是让目标产品结合在柱子上，用平衡液洗去杂质，再选择一种洗脱液洗下目标产品。
5．洗脱明胶-琼脂糖凝胶4FF可以采用不同的方式洗脱纤维连接蛋白：
① 使用含有溴盐的缓冲液，例如溴化钠或溴化钾，并在低于平衡缓冲液pH值的条件下洗脱。一种推荐的洗脱缓冲液是：0.05M的醋酸钠，pH值5.0，含1M的溴化钠或溴化钾。
② 可以在平衡缓冲液中加入8 M的脲，来洗脱吸附在凝胶上的纤维连接蛋白。
③纤维连接蛋白还可以通过在平衡缓冲液中添加精氨酸来进行洗脱。
6．再生根据样品的性质，明胶琼脂糖凝胶4FF可以再生，以达到重复使用的目的。可以采用2～3柱体积的高pH值（0.1M的Tris-HCl，0.5M NaCl，pH值8.5）的缓冲液和低pH值（0.1M NaAC，0.5 M NaCl，pH值 4.5）的缓冲液交替清洗凝胶。一个周期重复3次，然后用3-5倍柱体积的平衡缓冲液平衡，即可进行下次试验。如果在纯化过程中使用了洗涤剂或变性剂（如8 M尿素），那么这些洗涤剂也可以用于洗脱缓冲液中。2.7清洗在一些应用中，像变性的蛋白质或脂类这样的样品，在再生过程没有被洗脱下来，可以通过加入一些洗涤剂，例如：0.1％的Triton X-100，在37℃的条件下洗一会。立即用至少5倍柱体积的结合缓冲重新平衡。2.8储存明胶-琼脂糖凝胶4FF应储存在4～8℃，20%的乙醇溶液中。特别注意：上样之前，样品必须去除色素，否则色素会被吸附到填料上，影响填料的正常使用。

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分离试剂，层析介质。每毫升配体含10-16mg刀豆蛋白A。每毫升结合20-45mg甲状腺球蛋白。能纯化糖蛋白、膜蛋白、糖脂、多糖、带甘露糖或葡萄苷残基的膜囊泡、lgM，激素，脂蛋白等。

储存条件：4℃

名称：葡聚糖凝胶G-25
货号：QN4106
规格：25g|100g|500g
葡聚糖凝胶G-25利用分子筛作用，进行缓冲液交换、脱盐，分离小分子，去除小分子;工业脱盐。球蛋白分离范围1000～5000。

葡聚糖凝胶是一种珠状的凝胶，含有大量的羟基，很容易在水中和电解质溶液中溶胀。G型的葡聚糖凝胶有各种不同的交联度，因此它们的溶胀度和分级分离范围也有所不同。葡聚糖凝胶的溶胀度基本上不因盐和洗涤剂的存在而受影响。

葡聚糖凝胶有不同的粒度。超细级的葡聚糖凝胶是用于需要高分辨率的柱色谱和薄层色谱。粗级和中级的凝胶用于制备性色谱过程，可在较低的压力下获得较高的流速。另外，粗级也可用于批量工艺。

葡聚糖凝胶不溶于一切溶剂(除非它被化学降解)。它在水、盐溶液、有机溶剂、碱和弱酸性溶液中都是稳定的，在强酸中凝胶骨架的糖昔键被水解。长期接触氧化剂将破坏凝胶，因而应避免使用。

葡聚糖疑胶并不熔融，可以在湿态、中性pH进行灭菌或在高压灭菌器120℃、30分钟而不影响它的色谱性质。干态的凝胶加热至120℃以上将开始焦糖化。葡聚糖凝胶的机械强度取决于交联度。

技术参数：
性   状：白色微球，多孔
凝胶类型：凝胶过滤填料，亲水型凝胶
结构成分：交联右旋糖酐
粒   径：细颗粒20～80µm，中颗粒50～150µm，粗颗粒100～300µm
工作PH值：2～13
操作温度：4～40℃
球蛋白分离范围：1000～5000
保存条件：4～25℃

使用方法：
1．葡聚糖凝胶预处理：
在室温下，将葡聚糖凝胶干粉浸泡于蒸馏水中至少24小时，并不断搅拌以保证凝胶溶胀，或者用蒸馏水煮沸至少1小时直至充分溶胀，凝胶体积不再变化。
注：在溶胀前，加入蒸馏水搅拌后使其自然沉降，沉降后若上层溶液中漂浮的凝胶碎片颗粒较多，需要重复多次漂洗将其除去，防止层析时阻塞凝胶柱，影响流速。
2．装柱：
将溶胀好的凝胶根据装柱要求一次性置入柱内，注意保持湿态装柱，并避免柱内产生气泡或断层; 装柱要均匀，可在凝胶耐受的操作压下装柱，装好的凝胶柱可以检测柱效，检测过滤柱装填是否合格。
凝胶层析分离度取决于柱高，为分离不同组分，凝胶柱床必须有适宜的高度：分级分离时，一般需要100cm左右长的层析柱，柱高与直径之比为20～100:1，柱高过高时，凝胶挤压变形阻塞会引起较大的反压，应当尽可能避免；分组分离（例如脱盐）时用短柱，柱高控制在40～50cm以下，柱高与直径的比约为5～10:1。
3．平衡：
上样前用平衡液平衡层析柱至少3～5个柱体积直到记录仪基线变得平稳为止（例如流出液的PH值等于上柱的Buffer的PH值）；
4．上样：
分级分离时上样量一般为5%的柱床体积，我们建议初次上样控制在1～2%的床体积，视分离情况可以调整;脱盐时上样量可以达到20%的柱床体积。
样品溶液如有杂质或沉淀应过滤或离心除去，样品的粘度不能过高，否则影响分离效果。
5．洗脱方法:
可以用无盐水，也可以采用上柱时的缓冲液洗脱；在上柱缓冲液中加入NaCl等梯度洗脱或盐梯度洗脱也可以完全分离纯化；
6．在位清洗(CIP)
凝胶使用十次后作一次CIP，目的是去除柱床内沉淀的及顽固残留的蛋白。方法是以40cm/h用1M氢氧化钠反向清洗四个柱体积，再以至少三个柱体积平衡缓冲液再生。
7．保存
凝胶柱暂时不用，可将其回收，一般方法是将凝胶用水冲洗干净滤干，可加入0.02%叠氮化钠防腐或用20%乙醇浸泡，以控制微生物生长。

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