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产品详情

ALH088 柱式质粒大量提取试剂盒

  • 产品/服务:ALH088 柱式质粒大量提取试剂盒
  • 型 号:ALH088
  • 品 牌:百奥莱博
  • 单 价:面议 
  • 更新日期:2023-04-21
  • 有效期至:长期有效
  • 浏览次数:945
产品简介

北京百奥莱博供应的柱式质粒大量提取试剂盒用于科学研究,我公司的柱式质粒大量提取试剂盒品质上佳,经过多年的开发生产,已然非常成熟,欢迎广大新老客户订购。...

产品详细介绍

特别提示:包括柱式质粒大量提取试剂盒在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!


产品名称:柱式质粒大量提取试剂盒
英文名称:A large number of Plasmid Extraction Kit (centrifugal column type)
产品货号:ALH088
产品规格:10次

本试剂盒适用于大规模高纯度质粒制备。采用改进SDS-碱裂解法裂解细胞,离心吸附柱内的硅基质膜在高盐、低pH值状态下选择性地结合溶液中的质粒DNA,再通过漂洗液将杂质和其它细菌成分去除,zuì后低盐、高pH值的洗脱缓冲液将纯净质粒DNA从硅基质膜上洗脱。

试剂盒组份(10次):
RNaseA(10mg/ml)-————————0.75ml
溶液P1—————————————75ml
溶液P2—————————————75ml
溶液P3—————————————110ml
漂洗液WB————————————50ml
洗脱缓冲液EB——————————20ml
吸附柱和收集管(50ml)——————10套

试剂盒特点:
1.离心吸附柱内硅基质膜全部采用进口公司特制吸附膜,柱与柱之间吸附量差异小,可重复性好。克服了国产试剂盒膜质量不稳定的弊端。
2.不需要使用有毒的苯酚、氯fǎng等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、方便,从100-200ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80 %左右。
3.获得的质粒产量高、超螺旋比例高、纯度好,可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

注意事项
1. 所有的离心步骤如未加另外说明均在室温完成,使用转速可以达12000g,带50ml转头的台式离心机。
2. 溶液P3中含有刺激性化合物,操作时要戴乳胶手套,避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时,要用大量清水或者生理盐水冲洗。
3. 提取质粒的量与细菌培养浓度、质粒拷贝数等因素有关。如果所提质粒为低拷贝质粒或大于10kb 的大质粒,应加大菌体使用量,同时按比例增加P1、P2、P3的用量,洗脱缓冲液应在70℃预热。可以适当的延长吸附和洗脱的时间,提高提取效率。
4. 得到的质粒DNA可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。OD260值为1相当于大约50μg/ml DNA。电泳可能为单一条带,也可能为2条或者多条DNA条带,这主要是不同程度的超螺旋构象质粒泳动位置不一造成,与提取物培养时间长短、提取时操作剧烈程度等有关。本公司产品正常操作情况下基本超螺旋可以超过90%。
5. 质粒DNA确切分子大小,必须酶切线性化后,对比DNA分子量Marker才可以知道。处于环状或者超螺旋状态的质粒,泳动位置不确定,无法通过电泳知道其确切大小。
6. 洗脱液EB不含有螯合剂EDTA,不影响下游酶切、连接等反应。也可以使用水洗脱, 但应该确保pH大于7.5,pH过低影响洗脱效率。用水洗脱,质粒应该保存-20℃。质粒DNA如果需要长期保存,可以用TE缓冲液洗脱(10mM Tris-HCl,1mM EDTA,pH 8.0),但是EDTA可能影响下游酶切反应,使用时可以适当稀释。
储存条件:室温,有效期12个月。

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名称:一步式复杂样品DNA提取试剂盒
货号:BTN61202
规格:10mL
本试剂盒是专用于从各种常见的样品中快速提取用于PCR扩增的DNA。

试剂盒特点:
1.操作简单,只用一步(约5-10分钟)即可以得到用于PCR扩增的DNA 模板,不需要任何离心、抽提等操作步骤,比常用的Chelex100提取方法和苯酚/氯fǎng方法快。
2.兼容性广,可以用于几乎所有的分子生物学样品,包括细菌、昆虫、真菌、各种植物、各种动物、法医样品(包括全血液、血痕、精斑、唾液、毛发、组织样品、口腔细胞和FTA卡)、石蜡组织切片等。
3.环保健康,不使用任何有毒有害的试剂。
4.尤其适用于大规模育种筛选和临床筛选。

试剂盒组成:
成分 规格
一步式广谱DNA提取试剂 10ml
说明书 1份


储存条件:常温运输及保存,有效期一年。

使用方法:
1. 将约2μl液体样品(如全血、细胞培养液)或2mg的固体样品(如动物组织,约半粒芝麻大小)加入到50μl 本产品中。
注意:样品加入量可能需要根据其DNA的含量稍做调节,如果样品DNA含量少,则用量要增加,但总液体样品用量zuì好不要超过本产品用量的1/10;固体样品用量zuì好不要超过1mg/10μl的比例。下面是部分常见生物样品的DNA含量:
材料 DNA含量
精液 150-300μg/mL
血液 20-40μg/mL
精斑 20-30μg/cm2
唾液 1-10μg/mL
血斑 250-500 ng/cm2
口腔拭子 100-1500 ng/拭子
组织 50-500 ng/mg
阴道拭子 10-3000 ng/拭子
骨头 3-10 ng/mg
拔出的带发根头发 1-750 ng/发根
尿液 1-20 ng/mL
自然脱落的带发根头发 1-10 ng/发根

2. 80℃加热5分钟后。
注意:此步的条件可以根据样品的质地稍做调节。如果是液体样品,室温处理1-3分钟即可。如果是难以破裂的细胞和材料(如酵母、石蜡组织切片、血斑),则保温时间可以延长到10-30分钟。
3. 简短振荡混匀后取裂解物直接进行PCR(裂解物体积zuì好不要超过PCR 体积的1/10)。
4.其余同常规操作。

疑难解答:
Q: 本产品与美国BioVenture的GeneReleaser 有何区别?
A: 本产品处理简单,只需要80℃加热5分钟即可;而GeneReleaser 加热处理复杂而繁琐,共需要9 步处理,累计时间需要10 余分钟量(具体是65℃ 30s,8℃ 30s,65℃ 90s,97℃ 180s,8℃ 60s,65℃ 180s,97℃ 60s,65℃ 60s,80℃放置),手工操作时十分难以控制。
Q: 用本产品提取的DNA 能否用电泳方法检测?
A: 由于DNA含量太少,不能用电泳方法检测。


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