CZ033 氨基磁珠

氨基磁珠(5μm,10mg/ml)由专业试剂供应商北京百奥莱博提供，仅用于生物化学研究方面，我公司专注于磁珠微球产品的研发、生产和供应，为您提供的氨基磁珠(5μm,10mg/ml)质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。...

特别提示：包括氨基磁珠(5μm,10mg/ml)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：氨基磁珠(5μm,10mg/ml)
产品货号：CZ033
产品规格：5ml/50ml

产品简介：
Mag NH2系列磁珠具有超顺磁性、快速磁响应性、丰富氨基官能团、单分散性和亚微米尺度粒径等特点，能够在特殊化学试剂(如戊二醛)的作用下将多肽、蛋白、寡聚核苷酸等生物配体共价偶联到微球表面，是医学与分子生物学研究中重要的载体工具。
NH2系列磁珠采用的高分子聚合技术将超顺磁性材料和高分子材料地结合在一起，形成的一种功能化磁性微球。与传统磁珠相比，Magrose具有更快的磁响应性同时保持微球良好的分散性、低的非特异性吸附和更丰富的结合位点等特性，能便捷地与多种生物配体(蛋白、多肽、寡聚核苷酸、药物分子等)进行高载量结合，可作为良好的基础材料进行包被、吸附、化学改性等后续处理。
保质期：在2～8℃可稳定保存，保质期2年
产品：
1. 丰富的结合位点，加强与配体的特异性结合。
2. 超顺磁性和高磁响应性，节省操作时间。
3. 良好的分散性和重悬性，提高操作的便捷性。
4. 良好的物理化学稳定性，保障重复性效果。
磁珠与生物分子的偶联方法(参考，以蛋白A为例)：
1. 磁珠预处理：混匀磁珠后，取100 μL Mag / Magrose磁珠到1 mL EP管中，磁吸去除上清液，用200 μL PBS溶液(50 mM PBS，pH 7.4)洗涤3次，磁吸去上清；
2. 戊二醛活化：加入新鲜配制的100 μL戊二醛溶液(15%)到EP管中，漩涡混匀使磁珠充分悬浮，用锡箔纸包裹后25℃反应1 h(反应避光，以避免戊二醛自身发生聚合)，该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀)；
3. 活化后洗涤：磁珠活化后，磁吸去上清，用50 mM PBS，pH 7.4缓冲液洗涤3次；
4. 磁珠偶联：向装有磁珠的EP管中加入50 μg～200 μg生物配体(合适用量及浓度需要根据具体实验进行优化，保持溶液pH≈8.0，必要时可加入0.05% Tween -20以提高磁珠分散性)，轻柔地混
匀；用锡箔纸包裹(反应避光)后25℃偶联3 h，或25℃偶联1 h后放置4℃偶联过夜，偶联期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀)；
注：由于戊二醛溶液在280 nm出有吸收峰，因此磁珠上偶联蛋白的结合含量不能通过反应前后OD280值变化来计算，可通过BCA试剂盒或蛋白电泳法间接测量。
5. 偶联后封闭：将EP管置于磁分离架上磁性分离去除上清液，加入200～1000 μL BSA/PBS溶液(pH 7.2，含5% BSA)重悬磁珠(可根据需要进行超声)，25℃反应1 h封闭磁珠表面非特异性吸附位点，该期间保持磁珠的悬浮状态(可利用垂直混合仪进行颠倒混匀)；
6. 保存：将EP管置于磁性分离架上磁性分离去除上清液，用200 μL PBS溶液(pH 7.2)或保存溶液洗涤3次后，重新悬浮于保存溶液中(可根据需要来确定保存溶液的加入量，以调整偶联配体磁珠的浓度)，zuì后保存于4℃。必要时可以在保存溶液中加入0.02%(w/v) 叠氮化钠(NaN3)抑制细菌生长。
注意事项：
1. 冷冻、干燥和离心等操作会引起磁珠团聚，不易于重悬和分散，并且影响磁珠表面功能基团的化学活性。
2. 在使用本产品前，请务必充分振荡或超声使磁珠保持均匀的悬浮状态。
3. 使用过程中可根据需求，用纯化水或缓冲液磁吸洗涤磁珠 2～3次，以去除保存液中乙醇。
4. 本产品需与磁性分离设备配套使用。
5. 为保证zuì佳的实验结果，请选用合适的配体进行共价偶联反应。
6. 本产品仅供研究使用。

根据您的关注的氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠，5μm,10mg/ml，CZ033，百奥莱博，，，您可能还对以下产品有需求：


CZ005 镍离子螯和His-tag蛋白纯化磁珠 5ml/2×50ml/4×250ml
CZ008 Strep-tag II蛋白纯化磁珠 5ml/50ml/250ml
CZ016 1μm链霉亲和素磁珠 1ml/10ml/100ml
CZ017 2μm链霉亲和素磁珠 1ml/10ml/100ml
CZ018 Mag NHS磁珠 1ml/5ml/50ml
CZ019 NHS磁珠 1ml/5ml/50ml
CZ022 羟基磁珠(500nm,10mg/ml) 5ml/50ml
CZ024 羟基磁珠(1000nm,20mg/ml) 5ml/50ml

关注氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠(5μm,10mg/ml)，氨基磁珠，5μm,10mg/ml，CZ033，百奥莱博，，的同时，为您推荐更多您可能感兴趣的产品：



名称：GST融合蛋白纯化磁珠
货号：CZ007
规格：5ml/2×50ml/4×250ml
产品简介：
GST融合蛋白纯化磁珠是专为、快速纯化谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白而设计的一种功能化材料，可通过磁性分离方式直接从生物样品中一步纯化出高纯度的目标蛋白，大地简化纯化工艺和提高纯化效率，适合科研和工业领域便捷地进行GST融合蛋白的纯化。
与传统的柱层析纯化方式相比，采用磁珠纯化GST融合蛋白，无需对粗蛋白样品进行多次长时间的高速离心及滤膜过滤、无需控制流速、更不需要昂贵的层析设备。样品与磁珠的特异性结合、洗涤及目标蛋白洗脱变得非常简单、快速、易操作。对于熟练的操作者而言，在1 h内就能获得高纯度的目的蛋白，且能轻松实现高通量和大规模样品的平行处理，为研究者节省了时间和成本。
适用范围:
适用于谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合蛋白、谷胱甘肽转移酶以及与谷胱甘肽有亲和作用的其它蛋白的分离纯化。
操作流程:
目标蛋白与磁珠的结合性能将直接影响目标蛋白的纯化效率，各种缓冲液配制也将在一定程度上影响目标蛋白的回收率和纯度。因此，在较大规模蛋白纯化之前，用户应该自行设计实验，筛选出适合目标蛋白的缓冲液，包括Binding /Washing Buffer(Buffer A)及Elution Buffer(Buffer B)。以下提供一个较强结合力的 GST标签蛋白的纯化流程，供用户参考。
1.缓冲溶液配制
Buffer A：140 mM NaCl，2.7 mM KCl，10 mM Na2HPO4，1.8 mM KH2PO4，pH 7.4
Buffer B：50 mM Tris-HCl，10 mM还原型谷胱甘肽，pH 8.0配制方法：0.1 M Tris溶液 50 mL，0.307 g还原型谷胱甘肽，然后用0.1 M盐酸调pH到8.0，加去离子水至100 mL。
注：1. 还原型谷胱甘肽容易被氧化，Buffer B要求现配现用；
2.不同的GST 融合蛋白与磁珠结合的强弱程度不同，对大部分的GST融合蛋白，使用含有10 mM还原性谷胱甘肽的Buffer B即可洗脱目标蛋白；对少数结合能力较强的GST融合蛋白，可以适当延长洗脱时间，增加洗脱次数，或提高Buffer B中还原型谷胱甘肽的浓度；
3. Buffer A和Buffer B中可以添加1～5 mM EDTA、1～10 mM DTT、0.1～1.0% Triton X-100、0.1～1.0% Tween 20等，以提高目标蛋白的稳定性。
2. 样品处理
本说明书提供以下三种样品的处理方法：
(1)大肠杆菌、酵母等细胞内表达蛋白：表达细胞用适量Buffer A稀释，加入蛋白酶抑制剂(如终浓度为 1 mM的PMSF)；冰浴超声裂解细胞，即为粗蛋白样品。如果样品过于粘稠，可根据需要在粗样品中加入适量核酸酶，在冰上放置30 min，以降解核酸。另外，如果目标蛋白含量较低，建议将粗蛋白样品进行离心操作。
(2)胞外表达蛋白：取胞外表达上清，用等量Buffer A稀释平衡，即为粗蛋白样品。
(3)动物细胞胞内表达蛋白：取适量动物细胞，用适量PBS洗涤1次，弃上清；用适量含1%(v/v)Triton X-100或1%(v/v)NP-40的Buffer A重悬；加入蛋白酶抑制剂(如终浓度为1 mM的PMSF)；置于冰上10 min，即为粗蛋白样品。
3.磁珠预处理
一般情况下，磁珠的使用量是由用户根据目标蛋白产量和磁珠载量信息计算获得。例如：采用大肠杆菌表达某目标蛋白，250 mL发酵液收获1 g湿重的菌体，通过预实验估算其目标蛋白产量为5～10 mg，用户需要取10 mL 10%的磁珠悬液用于目标蛋白的纯化。以下即以此为例进行详细说明：
(1)将磁珠产品置于漩涡混匀器上充分混匀，用移液器取10 mL磁珠悬液于离心管中；
(2)将离心管置于磁性分离器上，待溶液变澄清后，移去上清液；
(3)加入5～10 mL Buffer A到上述装有磁珠的离心管中，盖紧盖子，漩涡振荡15 s，使磁珠重新悬浮。将离心管置于磁性分离器上，磁性分离＊，移去上清液，重复洗涤2次。
(*注：在磁性分离过程中，为了减少磁珠在使用过程中的损耗，待溶液变澄清后，盖紧离心管盖子，保持离心管仍在磁性分离器上，手持磁性分离器与离心管上下翻转数次，使澄清的溶液涮洗离心管盖上残留的磁珠，静置片刻，使溶液重新变澄清；以下同。)
4.目标蛋白与磁珠结合
(1)用10 mL Buffer A悬浮1 g湿重的菌体，进行破碎和裂解后，即为粗蛋白样品；
(2)将粗蛋白样品加入到装有预处理磁珠的离心管中，盖紧离心管盖；
(3)将离心管置于漩涡混匀器振荡15 s，然后置于旋转混合仪上，室温旋转混合20～30 min(如果需要，可在2～8℃的低温环境下旋转混合约1 h，防止目标蛋白降解)；
(4)将离心管置于磁性分离器上进行磁性分离，移出上清液到新的离心管中以备后续检测。从磁性分离器上取下离心管进行后续洗涤步骤。
5. 磁珠洗涤
(1)加入5～10 mL Buffer A到装有磁珠的离心管中，旋转混合2 min，磁性分离，移出清洗液到新的离心管中，以备取样检测；
(2)加入5～10 mL Buffer A到装有磁珠的离心管，使磁珠重新悬浮，将磁珠悬液转移至新的离心管，避免原离心管壁上非特异性吸附蛋白污染目标蛋白；磁性分离，移出上清液到清洗液收集管。
6.目标蛋白洗脱
(1)加入2～5 mL Buffer B(用户可根据需要改变洗脱体积调整目标蛋白浓度)于离心管中，盖紧离心管盖，然后将离心管置于旋转混合仪上，室温旋转混合2 min；磁性分离，收集洗脱液到新的离心管中，即为纯化的目标蛋白样品；
(2)如果需要，可以重复上述步骤1次，收集样品到新的离心管中，以检测目标蛋白是否洗脱完全。
7.磁珠清洗和保存
磁珠使用后经过简单清洗处理后，可以继续用于后续的纯化操作，也可以长时间保存。用户可根据磁珠使用的情况选择不同的清洗方法，主要有以下几种情况：
情况1：重复使用次数较少，结合能力下降不明显时，可以采用高pH和低pH buffer交替洗涤的方式进行清洗
(1)高pH洗(碱洗)：使用后的磁珠加入10 mL Buffer C(即0.1 M Tris-HCl，0.5 M NaCl，pH 8.5)，漩涡振荡60 s，磁性分离，去除上清液—；
(2)低pH洗(酸洗)加入10 mL Buffer D(即0.1 M 醋酸钠，0.5 M NaCl，pH 4.5)，漩涡振荡60 s，磁性分离，去除上清液；
(3)重复碱洗、酸洗交替清洗2次，共3次。
情况2： 重复使用次数较多时，由于沉淀、变性或非特异性吸附蛋白积累，导致磁珠结合目标蛋白的能力明显下降。去除沉淀或变性蛋白，可按下面的方法进行洗涤：
(1)先用5 mL 6 M盐酸胍洗涤2次，每次漩涡振荡60 s，磁性分离，去除上清液；
(2)再用10 mL 1×PBS洗涤3次，每次漩涡振荡60 s，磁性分离，去除上清液。
情况3：去除疏水性结合物质，可按下面的方法进行洗涤：
(1)先用5 mL 70%乙醇或浓度为0.1%的非离子型表面活性剂洗涤3次，每次漩涡振荡60 s，磁性分离，去除上清液；
(2)再用10 mL 1×PBS洗涤3次，每次漩涡振荡60 s，磁性分离，去除上清液。
注：完成情况1或情况2的清洗操作后，如果用户需要继续使用磁珠用于蛋白纯化，需先用Buffer A洗涤2～3次。 如果不需要继续使用，则用20%乙醇洗涤磁珠2～3次后，再加入20%(v/v)乙醇到磁珠中使总体积为10 mL，保存于2～8°C。
蛋白纯化流程的优化：
以上操作流程适用于大部分GST融合蛋白的纯化，根据目标蛋白与GST融合蛋白纯化磁珠的结合性能不同，用户可以从以下几个方面对纯化流程进行优化，以提高目标蛋白的回收率和纯度。
1. 提高目标蛋白回收率的参考方法：
(1)延长蛋白溶液与磁珠孵育的时间；
(2)样品及缓冲液中加入1～10 mM的DTT，有助于提高部分GST融合蛋白与磁珠的结合；
(3)添加合适的蛋白酶抑制剂，防止目标蛋白降解；
(4)增加磁珠用量；
(5)延长洗脱目标蛋白的时间或增加洗脱次数；
(6)使用新鲜配制的Buffer B保证目标蛋白洗脱效率。
2. 提高目标蛋白纯度的参考方法：
(1)避免剧烈的超声破碎造成GST标签与目标蛋白发生断裂；
(2)在纯化过程中添加合适的蛋白酶抑制剂，防止目标蛋白降解；
(3)在样品溶液和缓冲液中加入 0.1%的Tween20或2% 的NP-40可降低非特异蛋白的吸附；
(4)延长洗涤时间，增加洗涤次数；
(5)采用梯度浓度还原型谷胱甘肽洗脱目标蛋白。
注意事项：
(1)次使用本产品前，请务必详细阅读本用户手册；
(2)磁珠使用和保存过程中应避免冷冻、干燥和高速离心等操作；
(3)在使用本产品前，请务必充分振荡使磁珠保持均匀的悬浮状态；
(4)请选用质量好的移液器吸头和离心管，以免磁珠贴壁或混合过程发生渗漏引起磁珠的损耗；
(5)磁珠与溶液混合过程中，如果溶液粘稠无法通过翻转离心管重悬磁珠，可采用移液器反复吹吸或短时漩涡混合使磁珠充分重悬；
(6)用户可根据实际需要保留经磁性分离移去的上清液，进行取样检测，以便分析纯化过程和优化蛋白纯化流程；
(7)本产品可以重复使用，重复使用时，建议纯化同种蛋白，纯化不同种类的蛋白时，建议使用新的磁珠，以防交叉污染；
(8)本产品需与磁性分离器配套使用；
(9)本产品仅供研究使用。

如果您觉得“CZ033 氨基磁珠”描述资料不够齐全，请联系我们获取详细资料。(联系时请告诉我从给览网看到的，我们将给您最大优惠！)
本页链接：http://www.geilan.com/com_bjbiolab/sell/itemid-8506916.html
已经有1286位访客查看了本页.