HR0269 NP-40裂解液

可以有效抑制蛋白降解。用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品，可用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

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NP-40裂解液使用方法：

A、细胞裂解

1、取5-10×10⁶个细胞，在4℃，1000rpm条件离心5-10分钟，小心吸取培养基，尽可能吸干，收集细胞。

2、用冷PBS洗涤细胞两次，每次洗涤后尽可能吸干上清。

3、每5×10⁶个细胞中加入500μL的裂解液（每10⁶个细胞加100μL NP-40裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μL～150μL，或一个75 cm²培养瓶加1～2mL。裂解液和细胞应充分接触。如果NP-40裂解液不足量，细胞裂解效率将会降低），混匀后，在4℃条件下振荡15-20分钟。

4、NP-40裂解液在4℃，14000rpm条件下离心15分钟。

5、快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

B、组织裂解

1、取100mg组织样本剪碎，加入1mL裂解液，用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。

2、将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中，在4℃，10000rpm条件下离心5分钟。

3、将上清吸入另一预冷的干净离心管，用于下游实验。

NP-40裂解液上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。

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