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所在地:北京
型号:HR8106
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更新时间:2023-08-09
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RIPA裂解液(不含triton x-100)使用方法:
A、RIPA裂解液(不含triton x-100)细胞裂解
1、取5-10×106个细胞,在4℃,1000rpm条件离心5-10分钟,小心吸取培养基,尽可能吸干,收集细胞。
2、用冷PBS洗涤细胞两次,每次洗涤后尽可能吸干上清。
3、每5×106个细胞中加入500μL 冷的裂解液(每106个细胞,大约10mg或10μL压积,加100μL RIPA裂解液。大约相当于6孔板的每孔加入100μL~150μL,或一个75cm2 培养瓶加1 mL。裂解液和细胞应充分接触。如果RIPA裂解液不足量,细胞裂解效率将会降低),混匀后,在4℃条件下振荡15-20分钟。
4、在4℃,14000rpm条件下离心15分钟。
5、快速将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
B、RIPA裂解液(不含triton x-100)组织裂解
1、取100mg组织样本剪碎,加入1mL裂解液,用组织匀浆器匀浆至无明显肉眼可见固体。
2、将组织匀浆吸入另一预冷的干净离心管中,在4℃,10000rpm条件下离心5分钟。
3、将上清吸入另一预冷的干净离心管,用于下游实验。
上述蛋白提取物可分装后于-80℃冰箱保存备用。
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