HR9105-100T 细菌活性氮(RNS)检测试剂盒(红色,O09)

细菌活性氮(RNS)检测试剂盒(红色,O09)是一种利用荧光探针O09进行活性氮检测的试剂盒。O09探针可自由透过细菌细胞膜进入细胞内，并被细菌细胞内的RNS氧化，产生红色荧光物质，并稳定存在于细菌胞内。根据细菌细胞中红色荧光的产生和强弱，可以判断细菌细胞RNS含量的变化情况。

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产品特点：

● 使用方便：可用荧光分光光度计、荧光酶标仪或流式细胞仪检测；

● 背景低，灵敏度高；

● 线性范围宽，使用方便。。

检测方法：

● 荧光分光光度计、荧光酶标仪 ● 流式细胞仪 ● 荧光显微镜 ● 激光共聚焦

样本类型：

● 各种革兰氏阳性、阴性细菌

使用方法：

O09探针工作液配制：

1、根据样本数量，用纯水将探针稀释液B进行10倍稀释。

2、根据样本数量，用10倍稀释过的探针稀释液B 将探针进行1000倍稀释。即配成染色工作液。

【注】:

● 工作液浓度应根据不同细菌的预实验结果确定的最佳工作浓度，建议至少在超过10倍范围的浓度下进行测试。一般染色终浓度500-5000倍稀释，1000-2000倍适合大多数细菌样本。

● 建议收到产品后，根据单次使用量，对母液进行小量分装，每次使用一管，试剂-20℃避光冻存，一年稳定。

● 工作液现配现用。

● 如果用不完，不可以一次性将探针全部稀释。

O09探针标记：

1、准备1mL 新鲜待测菌液。

【注】:

● 大约1×10⁸细胞/mL。

● 根据自己的实验需要，看是否需要细胞计数。采用绝对计数或者OD600-660 比浊均可。

2、将待测细菌样本离心收集菌体。

3、用PBS 洗涤菌体2-3次。离心收集菌体沉淀。

4、用500μL-1mL 染色工作液重悬菌体。

5、在37℃避光孵育30分钟。

6、孵育结束后，离心收集菌体。

7、用PBS清洗细胞一次。离心收集菌体。

8、用500μL PBS重悬菌体。充分混匀。

9、取200μL加入荧光检测用96孔板。

10、置于酶标仪中，后于激发波长为516nm、发射波长606nm检测荧光强度。

结果处理：

荧光强度强表示细菌活性氮强度高。

【注】：

● 荧光强度强则活性氮（RNS）含量高。

● 可以用实验中对照样本的荧光强度值为基准，待测组样本的荧光强度值占对照样本的百分比来比较活性氮（RNS）程度差异。

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