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HR8260-500T 细胞粘附检测试剂盒

北京百奥莱博科技有限公司
会员指数: 企业认证:

价格:电议

所在地:北京

型号:HR8260-500T

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电话:18518407031

更新时间:2023-05-31

浏览次数:798

公司地址:北京市海淀区紫雀路33号院3号楼

18518407031(微信同步)   王欣(女士)   (来电时请说是从给览网看到我的)

产品简介

细胞粘附检测试剂盒含全套试剂,通过活细胞染色探针W16染色粘附的活细胞数量来反应细胞的粘附能力变化。本试剂盒不含有包被液。本试剂盒使用比色法进行检测,如果需要荧光法检测的,请选用我公司货号为HR8258的试剂盒。本试剂盒适合进行常规的总体粘附性能的检测。不含有包被剂,如果需要含包被剂的,可以选用我公司货号为H

公司简介

北京百奥莱博科技有限公司是一家专业的生物试剂销售公司。公司主要经营血清、抗原、抗体等生物试剂产品,可以为您提供专业的技术服务,以优良的价格、优质的服务、优先的理念,满足客户的各方面的需求,与国内多家企业、单位建立了良好的长期合作关系,拥有较好的企业信誉和品牌形象。 主营产品:血清、抗体、抗原、核酸提取、核酸纯化等生化试剂
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产品说明

产品特点:

● 方便:可用酶标仪检测;

● 快速:最快1小时内即可完成实验;

● 灵敏:数据可靠,重现性好,线性范围更宽;

● 准确:试剂本身稳定性高,实验结果稳定可靠。

试剂盒以外自备仪器和试剂耗材:

● 酶标仪 ● 离心机 ● 移液器 ● Matrigel/Fibronectin,Fn ● PBS或者HBSS

使用注意事项:

● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体收集至管底,避免开盖时液体损失导致试剂量不够用。

● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。离心力在不损失细胞的前提下尽可能小,重悬细胞是动作要轻柔,避免多次反复的激烈吹打。不用涡旋振荡器。

● 染色培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多少而异。一般情况下,白细胞较难染色,因此需要较长的培养时间。培养时间一般为1-4小时,但在培养30分钟左右即可取出肉眼观察染色程度 (根据细胞种类而定,需要摸索一下条件)。当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔(100μL培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2500个/孔(100μL培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入染色液B。

● 有条件的情况下建议采用多通道移液器,可以减少平行孔间的差异。加染色液B试剂时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,会干扰O.D值读数。

● OD值在0.4-2.0之间均可,最大值控制在1.0左右为宜,小于0.4或大于2.0请调整接种量和培养时间。

使用方法:

包被:

1、根据细胞类型,96孔板每孔加入100μL Matrigel或Fibronectin包被液。

2、将培养板置2-8℃过夜。

3、移除包被液。

4、用洗涤液洗涤1-3次。

细胞接种:

1、待测定细胞处理好后,用胰酶消化,PBS洗涤,然后用相应培养基重悬,制成细胞悬液。

2、5×104细胞/孔接种96孔板,建议设3-5个复孔。同时设立对照组,即孵育后不弃上清组。

3、37℃培养箱孵育30-1小时。

4、取出培养板,吸弃培养基。

【注】:

● 对照孔培养基不要吸除。

5、然后用相应的培养基洗涤2-3次。

6、每孔加入100μL新鲜培养基。

粘附率检测:

1、96孔板每孔加入10μL细胞染色液B。

2、37℃孵育30分-4小时。

【注】:

不同细胞需要孵育的时间差异较大,需要摸索最佳孵育时间,一般孵育30钟后拿出培养板检测对照细胞孔的450nm 的OD值,达到0.8-1.0即可。

3、测定样品孔OD值。测定450 nm 各孔的吸光值,如无450nm滤光片,可以使用450-490nm的滤光片。

4、细胞粘附率计算。

将各测试孔的OD值减去空白孔(未加细胞孔)OD值。各重复孔的OD值取平均数。

细胞粘附率% =((待测细胞OD-空白OD)/(对照细胞OD-空白OD))×100


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