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所在地:北京
型号:HR8031-50T
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更新时间:2023-05-31
浏览次数:758
公司地址:北京市海淀区紫雀路33号院3号楼
产品特点:
● 适用性广,能从所有细菌提取胞外多糖。
● 操作时间短,将胞外多糖提取的时间缩短至1-2 小时。
● 操作简单方便。
● 提取的多糖下游应用广。
试剂盒以外自备试剂和仪器:
● 振荡器 ● 离心机 ● 涡旋混匀器
使用注意事项:
● 离心机转速有相对离心力(RCF,×g)和每分钟转速(RPM)两种表示方式,有些离心机设置有RPM和×g显示切换,但部分离心机没有自动切换功能。需要用下面的公式进行换算:
G=r×1.118×10-5×rpm2(r为有效离心半径,即从离心机轴心到离心收集管底部中心位置的长度,单位为厘米)例如:转速为3000rpm,有效离心半径为10cm,则相对离心力(RCF,×g)为=10×1.118×10-5×30002=1006.2(×g)。
● 可以用试剂盒或者苯酚硫酸法进行胞外多糖定量。
使用方法:
1、室温8000×g离心3分钟收获细菌细胞。
2、加入500μL试剂A重悬细菌,8000×g离心3分钟,弃上清。
【注】:
● 每次处理50mg-200mg湿重菌体均可。
3、收集沉淀,加入500μL试剂A重悬沉淀,8000×g离心3分钟,弃上清。
4、收集沉淀,加入500μL提取液B重悬沉淀。
5、在80℃水浴或气浴孵育6小时或过夜。
6、在10000×g离心10分钟。
7、取上清至另一干净离心管,即得胞外多糖样品。
【注】:
● 样品中含有盐。如果有需要可以透析或超滤脱盐后再用于下游实验。
● 可以采用冻干法得到多糖固体。
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