HR7810-50T 植物细胞核提取试剂盒

植物细胞核提取试剂盒适用于从各种植物细胞和各种实体植物组织,如叶片、根、种子等植物组织中提取细胞核。提取过程简单方便,可在1小时内完成。制备的核不仅纯度高。本试剂盒提取的细胞核保持天然活性,可以用于功能研究等各种下游,也可以用于提取核蛋白。本试剂盒适合新鲜样本的细胞核提取,冻存样品由于核可能已经损伤破裂,

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试剂盒以外自备试剂和仪器：

● 移液器 ● 离心机 ● 振荡器 ● 匀浆机/匀浆器 ● 涡旋混匀器 ● PBS缓冲液 ● 细胞筛(100μm)

使用注意事项：

● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖时液体洒落。

● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

使用方法：

1、取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的200mg左右(200mg-500mg均可)的新鲜植物组织样本用手术剪刀尽可能剪碎。

2、加入1mL提取液A用匀浆机充分匀浆。

【注】：

● 匀浆尽可能充分。

3、在匀浆液中加入1mL提取液A,充分混匀,然后将匀浆液用100μm细胞筛过滤。

【注】：

● 没有细胞筛过滤条件,也可将匀浆液稍微静置,吸取上清匀浆液,丢弃大的细胞碎片、纤维等沉淀。

● 有些含粘液较多的样品可能难以吸取,可以将1mL吸头尖稍微减掉一点使用。

● 匀浆液量较少不好过滤时,可以补加PBS缓冲液后过滤。

4、将滤液在100×g条件下离心3分钟,弃沉淀,收集上清。

5、将上清在2000×g条件下离心10分钟，弃上清，收集沉淀。

6、在沉淀中加入500μL提取液B,充分混匀。

7、置振荡器振荡15分钟。

【注】：

● 用振荡器/摇床的较低转速,保持液体有轻微晃动即可。

● 没有低温振荡条件可以不振荡,在2-8℃静置,中间每隔几分钟用移液器吹打混匀。

8、在1000×g条件下离心10分钟。弃上清,收集沉淀。

9、在沉淀中加入200μL冷的核保存液C,混匀。

【注】：

● 也可不用试剂盒中的核保存液,根据下游实验需要用相应其他缓冲液保存或者直接用于下游实验。

10、即可得到细胞核。

11、将上述细胞核样品于2-8℃冰箱保存备用或直接用于下游实验。

【注】：

● 存放后需要收集细胞核使用时,在2000×g离心10分钟收集沉淀即可。

常见问题分析：

● 提取的细胞核纯度为多少？

本试剂盒提取得到的细胞核样本纯度大约90%。

不建议用于蛋白质定位等方面的下游应用。

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