产品名称:
人抗肾上腺皮质抗体(AAA)ELISA试剂盒
供应商:远慕生物
规格:96T/48T
性状:液体
存储:4℃保存6个月
运输方式:快递发货
检测标本:血清,血浆,尿液,胸腹水,脑脊液,细胞培养上清,组织匀浆等
人抗肾上腺皮质抗体(AAA)ELISA试剂盒 操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
人抗肾上腺皮质抗体(AAA)ELISA试剂盒 检测试剂注意事项:
1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。
2. 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟,
3. 浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。
4. 浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟
5. 若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。
6. 在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。
7. 加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。
8. 试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。
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