吡咯啉 -5- 羧酸合成酶(P5CS)活性检测试剂盒 微量法

吡咯啉 -5- 羧酸合成酶(P5CS)活性检测试剂盒 微量法

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中文名称：吡咯啉 -5- 羧酸合成酶(P5CS)活性检测试剂盒 微量法
测定方法： 紫外分光光度法 微量法
测定规格： 50管/48样 100管/96样
保存条件：低温避光保存
有 效 期：６个月
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定    
吡咯啉 -5- 羧酸合成酶(P5CS)活性检测试剂盒 微量法测定意义：脯氨酸是植物体内适应逆境胁迫的一种重要的渗透调节物质。高等植物中脯氨酸代谢因其初始底物不同，分为谷氨酸( Glu) 和鸟氨酸( Orn) 两条合成途径。
吡咯啉-5-羧酸合成酶（P5CS，Δ1-pyrroline-5-carboxylate synthetase）是以谷氨酸为前体合成脯氨酸途径的关键酶，对植物适应逆境胁迫起关键作用。

测定原理：
吡咯啉-5-羧酸合成酶催化谷氨酸生成P5C过程中分解ATP生成ADP和无机磷，通过钼酸铵比色法测定单位时间内产生无机磷的量可确定P5CS活性。

吡咯啉 -5- 羧酸合成酶(P5CS)活性检测试剂盒 微量法计算
1、血清（浆）P5CS活力的计算:
单位定义：每小时每毫升血清（浆）中P5CS 消耗ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
P5CS活力（μmol/h/ml）=C标准管×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）×V总÷V样÷T=9 ×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）

2、组织中P5CS活力的计算：
（1）按蛋白浓度计算：
单位定义：每小时每毫克组织蛋白中P5CS消耗ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
P5CS活力(μmol/h /mg prot)=C标准管×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）×V总÷（Cpr×V样）÷T =9 ×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷Cpr

（2）按样本鲜重计算：
单位定义：每小时每克组织中P5CS消耗ATP 产生1μmol无机磷的量为一个酶活力单位。
P5CS活力(μmol/h /g 鲜重)=C标准管×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）×V总÷(W× V样÷V样总)÷T=9 ×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷W
C标准管：标准管浓度，0.5μmol/ml；V总：酶促反应总体积，0.3ml；V样：加入样本体积，0.1ml ；V样总：加入提取液体积，1ml；T：反应时间，1/6小时；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本鲜重，g。

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