土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性检测试剂盒 微量法

土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性检测试剂盒 微量法

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中文名称：土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性检测试剂盒 微量法
测定方法： 微量法
测定规格：  100管/96样
保存条件：低温避光保存
有 效 期：６个月
土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性检测试剂盒 微量法产品简介：
S-GLS（EC3.5.1.2）存在于某些细菌以及植物根中，催化谷氨酰胺水解成谷氨酸和氨，在氮素代谢中具有重要调控作用，尤其是调节游离氨含量和尿素代谢。
S-GLS催化谷氨酰胺水解成L-谷氨酸和氨，利用奈氏试剂检测氨增加的速率，即可计算其酶活性。

土壤谷氨酰胺酶(S-GLS) 活性检测试剂盒 微量法产品内容：
试剂一：液体30mL×1瓶，4 ℃保存；
试剂二：液体20mL×1瓶，4 ℃保存；
试剂三：液体5mL×1 瓶，4℃保存；
试剂四：液体8mL×1瓶，常温保存；
标准品：液体1mL×1支，100mol/mLNH4+，4℃保存。
需自备的仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、50目筛（或更小）、甲苯、冰和双蒸水。

操作步骤：
一、样品前处理：
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。
二、标准曲线绘制：
取100μL标准液加入900μL蒸馏水中，制备10mol/mL标准溶液，然后稀释成0.4、0.2、0.1、0.05、0.025mol/mL 的标准液。
三、测定步骤：
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至420nm，蒸馏水调零。
2、样品测定
混匀，420nm处读取吸光值A，尽快测完。分别记为A测定管，A对照管，A标准管，A空白管。计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。
四、酶活性计算
1、标准曲线的绘制
以ΔA标准管为y轴，标准液浓度为x轴绘制标准曲线，绘制标准曲线，测定标准方程为y=kx+b。
将ΔA测定带入方程，得到x（μmol/mL）
2、土壤谷氨酰胺酶活性计算：
单位定义：37℃下每g土壤每天催化谷氨酰胺生成1μmol氨定义为一个酶活力单位。
S-GLS（U/g 鲜重）＝x×V反总×10÷W ÷T=230.4×x÷W。
V反总:0.96mL；T：反应时间，1/24d；W：土壤质量，g；10：稀释倍数。

注意事项：
1、当测定吸光值大于1时，建议将上清液进一步稀释后测量。
2、离心后若上清液仍含有少量杂质，可将上清液再次8000g，常温离心10min去除。
3、若测定管显色后有浑浊，可以将上清液稀释后测量。
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