乙醇脱氢酶（ADH）活性检测试剂盒 紫外分光光度法

乙醇脱氢酶（ADH）活性检测试剂盒 紫外分光光度法

上海远慕生物科技有限公司是一家集研发、销售、定制合 成于一体的专业试剂公司，我们的团队由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成，致力于向国内外相关大专院校和科研机构提供高品质的化学产品，我司 既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求，也能满足企业从小试、中试到规模化的各个阶段的综合需求。

中文名称：乙醇脱氢酶（ADH）活性检测试剂盒 紫外分光光度法
测定方法：分光光度计法
测定规格：50管/48样
保存条件：低温避光保存
有 效 期：６个月
注意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。
乙醇脱氢酶（ADH）活性检测试剂盒 紫外分光光度法溶液的配制：
1、 提取液：临用前将粉剂一倒入提取液中，溶液为悬浊液，使用前需摇匀；
2、 试剂二：临用前取 1 支试剂二加入 1mL 蒸馏水，可以-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融。1 支即可做 100T，为延长试剂盒使用时间，遂多给一支。

乙醇脱氢酶（ADH）活性检测试剂盒 紫外分光光度法产品说明：
ADH是生物体内短链醇代谢的关键酶，催化乙醇与乙醛可逆转换，在很多生理过程中起着重要作用。哺乳动物ADH主要在肝脏生成，肝脏损伤导致ADH释放到血清中。血清ADH活性高低反映了肝功能是否异常。
ADH催化NADH还原乙醛生成乙醇和NAD+，NADH在340nm处有吸收峰，而NAD+没有；测定340nm 吸光度下降速率，来计算ADH活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：
冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板（UV板）、可调式移液器、研钵/匀浆器、蒸馏水。

操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液）进行冰浴匀浆。16000g，4℃离心 20min，取上清置冰上待测。
2、 细菌、细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细胞加入 1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）；16000g，4℃离心 20min，取上清液置冰上待测。
3、血清等液体：直接测定。

二、测定步骤
1、 紫外分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到340nm，蒸馏水调零。
2、 试剂一在25℃水浴中保温30min以上。
3、 空白管：在微量石英比色皿//96孔板（UV板）中依次加入20μL蒸馏水、8μL试剂二、152μL试剂一和20μL试剂迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A1和A2。ΔA空白管=A1-A2。（空白管只需做1~2个）
4、 测定管：在微量石英比色皿//96孔板（UV板）中依次加入20μL上清液、8μL试剂二、152μL试剂一和20μL试剂三，迅速混匀后于340nm测定吸光值变化，分别记录15s和75s时吸光值，分别记为A3和A4。ΔA测定管=A3-A4。

特别提示：仅供科研使用，不得用于临床检验及治疗使用 ，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！
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