中文名称：
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 可见分光光度法
测定方法：可见分光光度法
测定规格：50管/48样
保存条件：低温避光保存
有 效 期：６个月
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 可见分光光度法产品简介：
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸，生成过氧化脂质；后者逐渐分解为一系列复杂的化合物，其中包括 MDA。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。
MDA 与硫代巴比妥酸(thiobarbituric acid，TBA)缩合，生成红色产物，在 532nm 有大吸收峰，进行比色后可估测样品中过氧化脂质的含量； 同时测定 600nm 下的吸光度， 利用 532nm 与 600nm 下的吸光度的差值计算 MDA 的含量。
试验中所需的仪器和试剂：
可见分光光度计或酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿或酶标板、研钵、冰和蒸馏水。
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒 可见分光光度法产品内容：
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 15mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：粉剂×2 瓶，4℃保存；
MDA 检测工作液的配制：用时在每瓶试剂二中加入 7.5mL 试剂一，溶解混匀，4℃保存待用。
注意事项：
1、MDA 检测工作液较难溶解，可以 70℃加热，并剧烈 Vortex 以促进溶解。或者通过超声处理以促进溶解。
2、配制好的 MDA 检测工作液必须当天使用，因此请根据待测样本数量用多少配多少。
操作步骤：
一、MDA 提取：
1、细菌、细胞或组织样品的制备 ：
收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 200 万细菌或细胞加入 400μL 提取液的比例充分匀浆以破碎并裂解细胞；8000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待测。 称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆；8000g 4℃离心 10 分钟，取上清，置冰上待测。
二、测定操作表：
1、准确吸取 0.3mL MDA 检测工作液于 0.5mL 离心管中，再加入 0.1mL 粗酶液。
2、混合液在 100℃水浴中保温 30min 后，立即置于冰浴中冷却，10000g/min 离心 10min。
3、若用可见分光光度计检测，则取上清微量玻璃比色皿中，若用酶标板检测，则吸取 300uL 上清液于 96孔板中，测定各样品在 532nm 和 600nm 处的吸光度。
注意事项：
1、测定植物组织中 MDA 时受多种物质的干扰。糖与 TBA 显色反应产物吸收峰在 450nm
处，在 532nm 处也有吸收。因此，测定植物组织中 MDA 时要排除可溶性糖的干扰，需同
时测定样品在 450nm 处的吸光值。MDA含量计算：
1、细菌、细胞或动物组织中 MDA 含量计算
（1）按照蛋白质含量计算
MDA 含量（nmol/ mg prot）＝6.45×(A532-A600) ÷蛋白浓度（mg/mL）。
（2）按照样品质量计算
MDA 含量（nmol/ g mass）＝6.45×(A532-A600) ÷样本质量（g/mL）。
2、血液中 MDA 含量的计算：
MDA 含量（nmol/ L）=6450×(A532-A600)
3、植物组织中 MDA 含量的计算：
（1）按照蛋白质含量计算
MDA 含量（nmol/mg 蛋白）＝[6.45×(A532－A600) －0.56×A450] ÷蛋白浓度（mg/mL）。
（2）按照样品质量计算
MDA 含量（nmol/g mass）＝[6.45×(A532－A600) －0.56×A450]÷样本鲜重（g/mL）。
其中 A450、A532、A600 分别为 450nm、532nm、600nm 波长下的吸光值。
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