HR0954 细胞膜流动性TMA-DPH荧光检测试剂盒

传统的DPH探针可以进入细胞内，我司试剂盒膜示踪荧光探针TMA-DPH 不能进入细胞内，因此TMA-DPH 探针较DPH 探针能更准确的反应膜脂流动性，本探针的最大激发波长为355nm，最大发射波长为430nm。

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试剂盒以外自备试剂耗材和仪器：

● 含有偏振检测装置的设备：荧光分光光度计/酶标仪 ● 离心机 ● 移液器 ● HBSS ● PBS
使用注意事项：

● 螺旋盖微量管装试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体收集至管底，避免开盖时液体洒落。

● 染色液为DMSO溶液，冬季气温较低时在室温时为凝固状态，极易粘附在管壁、吸头壁。注意需要加热溶解，吸头也需要放在培养箱预热，否则容易再次凝固在吸头内壁产生损耗。

● 细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。

● 染色后立即进行分析。

● 标记的条件因细胞种类而异，根据不同样本的实际染色结果做相应调整，在每次实验前，请先确定最佳条件。

● 以下步骤仅供参考。请根据实际实验方案实际或者参考文献实验。

使用方法：

1、染色工作液的配制：

用稀释液稀释TMA-DPH 探针1000倍-10000倍，配制成TMA-DPH 染色工作液。

【注】：

●也可以不用试剂盒中的稀释液，直接用HBSS或无血清培养基稀释即可。

●使用前做预实验在推荐浓度范围内测试选定最佳浓度。

●推荐该探针加载浓度在1000-5000倍稀释，具体的使用浓度需根据实验要求进行优化。

2、用染色工作液重悬细胞，在37℃孵育15-30分钟。

3、用pH7.4 HBSS或20mM HEPES或PBS洗涤细胞1次。

4、用pH7.4 HBSS或20mM HEPES或PBS重悬细胞。

5、用该细胞进行检测。激发波长 355nm，发射波长430nm。

按下列公式计算荧光偏振度P：

P=（I_VV-GI_VH）/(I_VV+GI_VH)

其中校正因子G=I_HV/I_HH

式中：

I_VV:起偏和检偏器光轴同为垂直方向时测得的荧光强度;

I_VH:起偏和检偏器光轴分别为垂直和水平方向时测得的荧光强度。

I_HV:起偏和检偏器光轴分别为水平和垂直方向时测得的荧光强度;

I_HH:起偏和检偏器光轴同为水平方向时测得的荧光强度。

P值越大,流动性越小；P值越小，流动性越大。

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