高纯度质粒小提试剂盒 核酸提取纯化

高纯度质粒小提试剂盒 核酸提取纯化适合提取1-5 ml菌液，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方，通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA，每个吸附柱可吸附30 μg的质粒DNA，并更大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、PCR、酶切

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高纯度质粒小提试剂盒  核酸提取纯化

产品货号：26210

产品规格：50 次/100 次/200 次

产品简介：

  高纯度质粒小提试剂盒  核酸提取纯化适合提取 1-5 ml 菌液，在碱裂解法裂解细胞的基础上，采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方， 通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒 DNA，每个吸附柱可吸附 30 μg 的质粒 DNA， 并更大限度的去除蛋白质、基因组、RNA 和其他杂质。得到的质粒 DNA 可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测 序、连接等生物学实验。

包装清单：

产品名称	50次包装	100次包装	200次包装	储存条件
Buffer P1	15ml	30ml	55ml	室温
Buffer P2	15ml	30ml	55ml	室温
Buffer N3	20ml	40ml	75ml	室温
Buffer PB	30ml	55ml	110ml	室温
Buffer PE	9ml	18ml	36ml	室温
Buffer EB	5ml	10ml	20ml	室温
Spin Columns	50 个	100 个	200 个	室温
Collection Tubes	50 个	100 个	200 个	室温

高纯度质粒小提试剂盒  核酸提取纯化自备试剂：

  使用前 Buffer PE 50 次加入 36ml 无水乙醇/100 次加入 72ml 无水乙醇/200 次加入 144ml 无水乙醇

操作步骤：

1. 取-5 ml 过夜培养的菌液加入离心管（自备）中，12000 rpm 离心 30 秒收集菌体沉淀，尽量吸弃上清。

2. 向留有菌体沉淀的离心管中加入 250μl Buffer P1，使用移液器或涡旋振荡器充分混匀，悬浮菌体沉淀。 注意：如果菌块未彻底混匀，将会影响裂解效果，导致提取量和纯度偏低。

3. 向离心管中加入 250μl Buffer P2，温和地上下颠倒混匀 4-6 次，充分混匀使菌体裂解，此时溶液应变得清亮 粘稠。 注意：温和混匀，不要剧烈震荡，以免打断基因组 DNA，造成提取的质粒中混有基因组 DNA的片段。

4. 此步骤所用时间应不超过 5 分钟，避免质粒受到破坏。

5. 向离心管中加入 350μl Buffer N3，立即温和地上下颠倒混匀 8-10 次，充分混匀，此时应出现白色絮状沉淀。 12000 rpm 离心 5 分钟。 注意：Buffer N3 加入后应立即混匀，避免产生局部沉淀。

6. 将步骤 4 中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱（Spin Columns）中，12000 rpm 离心 30 秒钟，倒掉 收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。

7. 向吸附柱中加入 500μl Buffer PB，12000 rpm 离心 30 秒。

8. 向吸附柱中加入 750μl Buffer PE（请先检查是否已加入无水乙醇），12000 rpm 离心 1 分钟，倒掉收集管中 的废液。

9. 将吸附柱置于一个新的离心管（自备）中，向吸附膜的中间部位加入 50μl BufferEB，室温放置 1 分钟，12000 rpm 离心 1 分钟，将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。

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