JN0165 PNGase F糖苷内切酶

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特别提示：包括PNGase F糖苷内切酶(肽N-糖苷酶F)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：PNGase F糖苷内切酶(肽N-糖苷酶F)
英文名称：PNGase F
产品货号：JN0165
产品规格：15KU

  本酶可以在N-连接糖蛋白的高甘露糖、杂合和复合寡糖部分zuì内侧的N-乙酰葡糖糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨残基之间进行切割。PNGase F从携带有脑膜败血性黄杆菌PNGase基因的重组大肠杆菌中多步纯化获得。PNGase F几乎可以水解糖肽/糖蛋白中所有N-连接糖 (x = H 或寡糖) 。

产品组成：

组份	规格
PNGase F	15,000 U
10×糖蛋白变性缓冲液	1ml
10×ENDOH反应缓冲液	1ml
10% NP40	1ml

反应条件：将1×糖蛋白于糖蛋白变性缓冲液（含0.5%SDS，40mM DTT）中100℃ 煮沸10分钟使其变性，再加入1%NP-40的1×反应缓冲液(50mM磷酸钠 pH7.5储存于25℃)中37℃温育进行酶切反应。

注意事项：已知PNGase F的活性受SDS的抑制，所以在反应混合物中必须加入NP-40。

活性定义：10μl的反应体系中，37℃条件下，1小时从10μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需的酶量。

质量保证：无外切糖苷酶污染，无内切糖苷酶F1、F2和F3活 性。无污染的蛋白水解活性。

储存条件：-20℃。

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名称：甘油激酶
货号：JN0137
规格：2000U
该酶可溶于20mM 磷酸钾缓冲液（pH 7.5）。

外观：白色冻干粉末
来源：微生物
酶委员会编号： EC 2.7.1.30
CAS#： 9030-66-4
储存温度： -20℃
Activity: ≥250U/mg protein
活性定义： 在pH7.9，温度为37℃的条件下，1unit每分钟可催化1μmol的甘油生成3-磷酸甘油。
分子量： 55 kDa (SDS-PAGE)
等电点：5.1
米氏常数： 3.8x10-5M (Glycerol)
zuì适pH： 8.0
zuì适温度： 80℃
pH 稳定性： 5.0～10.0 (30℃, 20hr)
温度稳定性： < 60℃ (pH7.5, 30min)
抑制剂： Ag+，Hg2+

名称：酯酰辅酶A氧化酶
货号：JN0146
规格：200U
外观：黄色冻干粉
来源：微生物
酶委员会编号：EC 1.3.3.6
CAS#：61116-22-1
储存温度：-20℃
比活：≥ 30U/mg protein
活性定义：在pH7.5，温度为37℃的条件下，1unit每分钟可催化生成1μmol的H2O2。
分子量：78 kDa (SDS-PAGE)
等电点：6.7
米氏常数：10-5(Palmitoyl-CoA)
zuì适pH：8.5
zuì适温度：37-40℃
pH 稳定性：6.0-8.5 (25℃, 15hr)
温度稳定性：< 45℃ (pH 7.5, 15min)
抑制剂：Ag+，Hg2+


名称：hrv 3c蛋白酶
货号：JN0162
规格：50U
  本蛋白酶是通过基因工程表达、纯化后的重组蛋白酶。这种蛋白酶特异识别短肽Leu-Phe-Gln/Gly-Pro中的Gln和Gly残基而进行切割，底物的识别和切割不仅依赖于融合蛋白的一级结构还 依赖于融合蛋白的二级和三级结构。该酶与PreScission Protease相同，在目标蛋白与谷胱甘肽-S-转移酶融合蛋白（GST）之间由于含有蛋白酶特异识别短肽Leu-Phe-Gln/Gly- Pro，所以能切割插入到PGEX-6P-1、PGEX-6P-2、PGEX-6P-3等带有酶底物识别多肽序列的融合蛋白，把GST和目标蛋白切开。在切割反应过程中，建议先用不同的切割 时间摸索zuì佳条件，用SDS-PAGE电泳来评估切割程度，完全消化GST融合蛋白3C-Protease的用量，温度和温浴的时间要根据不同的目标蛋白而进行改变，应该在实验过程中优化切割条件。本hrv 3c蛋白酶的浓度为5,000U/ml

使用建议：使用前可通过10μg～20μg蛋白样品预酶切以确定zuì佳反应条件及酶用量，对于不易酶切的蛋白，可通过增加酶量及延长反应时间的方法获得所需的酶切结果。在切割蛋白时，每切割100μg蛋白需要1U 3C-Protease。在纯化蛋白时，往往每次需要切割10mg以下量的融合蛋白，需要100单位的酶，使用时应注意。

活性定义：在切割缓冲液(50mM Tris-HCl, 150mM NaCl，1mM EDTA,1mM DTT，pH7.0 25℃中切割100μg被检测的融合蛋白，反应条件为5℃ 16小时,切割率≥90%，定义为一个单位。

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE胶检测仅可见清晰单一的目的条带；本制品不含有非特异性的蛋白酶切活性。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

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