特别提示:包括V5 Tag多肽在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:V5 Tag多肽
英文名称:V5 Tag Peptide
产品货号:SY0425
产品规格:5mg|25mg
V5 Tag多肽(V5 Tag Peptide)是一种合成的多肽,这是一种从猴副流感病毒5(simian virus 5,SV5)的P和V蛋白中分离得到的由14个氨基酸组成的多肽。在免疫分析实验中,V5 Tag多肽与V5融合蛋白竞争性结合anti-V5抗体,V5 Tag多肽与抗体的结合是特异性的,因此,V5 Tag多肽是一种温和的、理想试剂可用于洗脱V5-tag融合蛋白。用于洗脱V5-tag融合蛋白时,V5 Tag多肽的推荐工作浓度是100-400μg/ml。
多肽序列(Amino acid sequence):H-Gly-Lys-Pro-Ile-Pro-Asn-Pro-Leu-Leu-Gly-Leu-Asp-Ser-Thr-OH
分子式:C64H108N16O20
分子量:1421.64
外观:白色粉末
纯度:>99%
溶解性:溶于水或1%醋酸
储存条件:-20℃,有效期1年
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名称:Bradford法蛋白定量试剂盒
货号:BTN80814
规格:100mL
Bradford法测定蛋白质浓度是zuì为常用的蛋白检测方法之一,在酸性条件下,考马斯亮蓝染料能与蛋白质结合形成复合物,其zuì大吸光值也由465nm转移到595nm,通过颜色的强弱测定蛋白质浓度的高低。本产品是基于Bradford法蛋白检测原理开发的产品。
产品特点:
1.快速,10-20个样品只需要10分钟即可完成测定。
2.稳定,加样混匀后2分钟既可测定,1小时内吸光度变化不超过10%。
3.线性范围在 50~1000μg/mL。
4.zuì小测量体积为1-20μL,zuì低测量蛋白量为0.5μg。
5.即开即用,不需要单独购买每个成分再配制。
6.有常规和微量两种检测模式。
7.不受大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。
8.但受略高浓度的表面活性剂影响,各种蛋白质与染料的结合效率可能有差异。
试剂盒组成:
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成分
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规格
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溶液A
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100ml
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BSA标准(2mg/mL)
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1ml
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滤纸
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20张
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说明书
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1份
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储存条件:常温运输和保存,BSA 标准-20℃保存,有效期一年。
使用方法:
一、
常规检测流程:
此方法在蛋白浓度30-1000μg/mL范围内呈现R2 = 0.996的直线线性回归,可定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.制备 1×工作液。溶液A与无菌水按1:4 比例充分混合即为1×工作液(例:4mL溶液A+ 16mL 无菌水 = 20mL 1×工作液)。
2.滤纸过滤。过滤后的工作液室温条件下可稳定使用1-2 星期。
3.检测:蛋白样品与1×工作液按1:50 比例混合(例:100μl蛋白样品 + 5mL 1×工作液,适用于3mL的比色杯;40μl蛋白样品 + 2mL 1×工作液,适用于1mL的比色杯;20μl蛋白样品 + 1mL 1×工作液,适用于平底透明96孔板)。
4.加样后,充分混匀。
5.室温放置5分钟。
6.检测吸光度。波长设定 = 595nm。
注意事项:
1.不同型号、规格的滤纸,具有不同的孔径,导致可通过的分子各不相同。请使用本公司提供的滤纸,否则会导致不同的测定结果。
2.检测样品之前,应先制备蛋白标准曲线。一般可使用BSA。
a)常规检测:建议使用下述浓度的BSA。
0μg/mL、31.25μg/mL、62.5μg/mL、125μg/mL、250μg/mL、500μg/mL、750μg/mL、1000μg/mL
b)微量检测:建议使用下述浓度的BSA。
0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL、7.5μg/mL、10μg/mL、20μg/mL。
3.检测细胞提取物或纯化蛋白样品,应使用相应的缓冲液制备蛋白标准曲线。
4.用 96孔板测定时,应确保没有气泡,否则会增加吸光度的读数。
5.此检测试剂不受大部分样品中的化学物质的影响。巯基乙醇的浓度可高达1M,二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的表面活性剂影响。若SDS高于0.1%,TritonX-100高于0.1%,Tween20,60,80高于0.06%,可取少量样品加水稀释到适当浓度,再行测定。
二、
微量检测流程:
此方法在蛋白浓度1~20μg/mL范围内呈现R2=0.992的直线线性回归,可定量蛋白浓度在此范围内的蛋白样品。
1.蛋白样品与溶液A按4:1比例混合,例:
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蛋白样品
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溶液A
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适用性
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400μL
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100μL
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平底透明96孔板
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2mL
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0.5mL
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1mL的比色杯
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4mL
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1mL
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3mL的比色杯
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2.加样后,充分混匀。
3.室温放置5分钟。
4.检测吸光度。波长设定= 595nm。
注意事项:
1.Bradford蛋白浓度测定的显色反应受许多去污剂的影响。应避免使用SDS,Triton X-100,Tween等溶解蛋白样品。对于难溶解的蛋白样品,可用1MNaOH 溶解和稀释。
2.Bradford蛋白浓度测定的显色反应依赖于蛋白中精氨酸残基的数目,因此不同蛋白间测定的差异可能较大。
3.标准品曲线配制时,如果吸量不准确或者加样枪不会造成标准曲线相关系数减小,可根据需要使用倍比梯度稀释的方法来配制,或者使用度高的加样枪。
4.由于Bradford法在蛋白浓度增高到一定时候,颜色反应并不成比例增加,因此得到的标准曲线只是在一定范围内可以近似看成直线,每次应按照实际测得的标准曲线计算出相对的蛋白浓度。
5.不像其它一些蛋白浓度测定方法(包括Lowry法),Bradford法测定蛋白浓度不受大部分样品中的化学物质的影响。样品中巯基乙醇的浓度可高达1M,二流苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。需确保SDS低于0.125%,Triton X-100低于0.125%,Tween 20低于0.06%,可以考虑用超纯水稀释,透析/除盐,ACETONE/TCA沉淀蛋白后重溶于超纯水等方法来消除干扰物质的影响。
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关注
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货号
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名称
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规格
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BTN131142
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鲁米诺
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1g
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YT620
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SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X)
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2ml|15ml
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植物蛋白提取试剂盒
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通用型蛋白凝胶制备试剂盒
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20次|60次
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