YT131 Annexin V-FITC细胞

Annexin V-FITC细胞由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研试验，Annexin V-FITC细胞是我司众多优质细胞凋亡与增殖之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司是一家专业的生物试剂销售公司。公司主要经营血清、抗原、抗体等生物试剂产品，可以为您提供专业的技术服务，以优良的价格、优质的服务、优先的理念，满足客户的各方面的需求，与国内多家企业、单位建立了良好的长期合作关系，拥有较好的企业信誉和品牌形象。 主营产品:血清、抗体、抗原、核酸提取、核酸纯化等生化试剂

特别提示：包括Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒
英文名称：Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
产品货号：YT131
产品规格：20次|50次

本试剂盒是用FITC标记的重组人Annexin V来检测细胞凋亡时出现在细胞膜表面的磷脂酰丝氨酸的一种细胞凋亡检测试剂盒。可以使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。一个包装的本试剂盒共可以检测20个细胞样品。

试剂盒组份：
Annexin V-FITC——————100µl
Annexin V-FITC结合液———12ml
碘化丙啶染色液——————220µl

Annexin是一类广泛分布于真核细胞细胞浆内钙离子依赖的磷脂结合蛋白，参与细胞内的信号转导。但仅Annexin V被报道可以调控一些PKC的活性。

Annexin V选择性结合磷脂酰丝氨酸(phosphatidylserine，简称PS)。磷脂酰丝氨酸主要分布在细胞膜内侧，即与细胞浆相邻的一侧。在细胞发生凋亡的早期，不同类型的细胞都会把磷脂酰丝氨酸外翻到细胞表面，即细胞膜外侧。磷脂酰丝氨酸暴露到细胞表面后会促进凝血和炎症反应。而Annexin V和外翻到细胞表面的磷脂酰丝氨酸结合后可以阻断磷脂酰丝氨酸的促凝血和促炎症反应活性。

用带有绿色荧光的荧光探针FITC标记的Annexin V，即Annexin V-FITC，就可以用流式细胞仪或荧光显微镜非常简单而直接地检测到磷脂酰丝氨酸的外翻这一细胞凋亡的重要特征。

本试剂盒还提供了碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)染色液，碘化丙啶可以染色坏死细胞或凋亡晚期丧失细胞膜完整性的细胞，呈现红色荧光。对于坏死细胞，由于细胞膜的完整性已经丧失，Annexin V-FITC可以进入到细胞浆内，与位于细胞膜内侧的磷脂酰丝氨酸结合，从而也使坏死细胞呈现绿色荧光。

本试剂盒的流式检测效果参考图1和图2，荧光显微镜检测效果参考图3。


图1.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测细胞凋亡的效果图。Jurkat细胞未经处理(A)或用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时(B)后，用本试剂盒染色，然后用流式细胞仪进行细胞的散射和荧光检测。从图中可以看出，经过凋亡诱导剂喜树碱处理后的细胞，其Annexin V-FITC染色阳性并且PI染色阴性的细胞，即凋亡细胞，明显增加(B图的右下象限)，Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞，即坏死细胞，也有所增加(B图的右上象限)。图中Annexin V-FITC染色阴性PI染色阳性(Annexin V-/PI+)所在象限(A和B图的左上象限)出现的细胞点是许可范围内的检测误差。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。


图2.细胞用本试剂盒染色后流式细胞仪检测效果验证图。Jurkat细胞用10μM喜树碱(Camptothecin)作用4小时后，未经染色(A)、仅用本试剂盒中的PI进行染色(B)、仅用本试剂盒中的Annexin V-FITC进行染色(C)、用本试剂盒中的Annexin V-FITC和PI进行双染(D)。从图中可以看出，未经染色的是双阴性细胞(A)，仅PI染色后出现了预期的PI染色阳性的细胞，仅Annexin V-FITC染色出现了预期的Annexin V-FITC染色阳性的细胞，Annexin V-FITC和PI双染出现了预期的仅Annexin V-FITC染色阳性的凋亡细胞和双阳性的坏死细胞。出现的非预期的细胞点完全在许可的误差范围内。实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况、检测仪器等的不同而存在差异，图中数据仅供参考。

注意事项：
1. 如果有细菌或真菌污染，会严重影响检测效果。
2. 染色后宜尽快检测，时间过长可能会导致凋亡或坏死细胞的数量增加。
3. 如果细胞收集过程中使用了胰酶，需注意设法去除残留的胰酶。残留的胰酶会消化并降解Annexin V-FITC，导致染色失败。
4. 荧光物质均易发生淬灭，在进行荧光观察时，尽量缩短观察时间，同时在操作和存放过程中也尽量注意避光保存。
5. 用于流式细胞仪检测时，如果发现Annexin V-FITC单独染色时出现了过多的PI假阳性细胞，并且通过调整相关设置和参数也无法改善，可以用PBS将Annexin V-FITC稀释3-10倍后再进行检测，这样通常可以有效减少假阳性的坏死细胞。

储存条件：4℃避光，有效期6个月。

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YT144 Caspase 9 活性检测试剂盒 20次|100次
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名称：TUNEL检测阳性对照制备试剂盒
货号：YT134
规格：10次
本试剂盒可以用于TUNEL检测阳性对照的制备，制备后的阳性对照可以用于一步法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(YT135)的荧光，也可以用于显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(YT137)的显色检测。DNase I可以剪切基因组DNA，使基因组DNA产生片段化(fragmentation)。基因组被片段化的细胞在用TUNEL法检查时会呈阳性染色。本试剂盒足够制备10个阳性对照。

试剂盒组份：
DNase I—————————10μl
Reaction Buffer(10X)——200μl

注意事项：需自备用于TUNEL检测的组织切片、或培养细胞的片子。需自备TUNEL检测试剂盒。

储存条件：-20℃。

名称：Caspase抑制剂(Z-VAD-FMK)
货号：YT145
规格：20mM×0.02ml|20mM×0.1ml|5mg
本品是一种可以穿透细胞膜的泛Caspase抑制剂，可以抑制由Caspase激活导致的细胞凋亡，是一种不可逆的Caspase广普抑制剂。本品是一种zuì常用的细胞凋亡抑制剂，常用于观察特定的细胞凋亡是否通过Caspase激活来介导。本品不仅可以穿透细胞膜抑制细胞内的Caspase，也可以用于抑制体外纯化或粗抽提的Caspase。浓度为20mM，产品配制在DMSO中，可以直接使用，另5mg包装为粉末装，根据配成一定浓度溶液使用。

分子式：C21H28FN3O7
分子量：453.5
纯度：＞95%

注意事项：
1. 如果每次使用量少，使用次数较多，请适当分装。反复冻融会影响本抑制剂的使用效果。
2. 如果希望适当稀释后再分装保存，请使用DMSO进行稀释。
3. 本Caspase抑制剂Z-VAD-FMK在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。

储存条件：-20℃，有效期一年。

名称：Annexin V-PE/7-AAD双染细胞凋亡检测试剂盒
货号：KFS188
规格：10T|20T|50T|100T
在正常细胞中，磷脂酰丝氨酸（PS）只分布在细胞膜脂质双层的内侧，而在细胞凋亡早期，细胞膜中的磷脂酰丝氨酸（PS）由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白，与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素PE 标记，以标记了的Annexin V 作为荧光探针，利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。

7-AAD（7-amino-actinomycin D）是一种核酸染料，它不能通过正常质膜，随着细胞凋亡、细胞死亡过程，质膜对7-AAD 的通透性逐渐增加，结合细胞凋亡中DNA 的有控降解，在合适波长激发光的激发下可发出明亮的红色荧光，通过7-AAD 标记DNA 的强弱，将细胞分为三群：7-AAD 强为死亡细胞，7-AAD 弱是凋亡细胞，7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD 同PI 有着相似的荧光特性，但其发射波谱较PI 窄，对其他检测通道的干扰更小，在多色荧光分析中是PI 的zuì佳替代品，可与Annexin V-PE 联合使用。

本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测（不推荐用于检测组织样本）。

注意事项
1. 微量试剂取用前请离心集液。
2. Annexin V-PE/7-AAD 避光保存及使用。
3. 7-AAD 为潜在致癌物，操作时请采取防护措施，穿防护服、戴手套等。
4. 本试剂盒适用于检测活细胞，流式细胞仪检测时，细胞数量不以应低于1×105，，不推荐用于检测组织样本。
5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞，建议适用不含EDTA 的胰酶消化，如消化不当，可能引起假阳性，而用细胞刮子会造成细胞粘连成团，而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中，防止进一步的损伤。
6. 细胞固定后可能导致荧光的淬灭，请不要固定样品。
7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同，因而流式检测的荧光补偿也不同，因此建议每次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照，进行荧光补偿的调节。

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