特别提示:包括BL21(DE3)感受态细胞(pG-TF2分子伴侣)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:BL21(DE3)感受态细胞(pG-TF2分子伴侣)
英文名称:Chaperone competent cells pG-TF2/BL21(DE3)
产品货号:JN0127
产品规格:100μl×10
外源蛋白质在大肠杆菌中的表达常形成包涵体或发生蛋白酶降解。大多是由于所表达的蛋白未能正确折叠造成。分子伴侣协同作用,可以帮助外源蛋白正确折叠。不同外源蛋白需要的分子伴侣不同。百奥莱博提供5种表达常用分子伴侣的BL21(DE3)衍生菌株,适用于不同外源蛋白在大肠杆菌中有效折叠。该系统适用于pET系列等依赖T7启动子的表达载体。本感受态细胞无污染,转化效率可达107以上

图例一)Human种属的RORG(31KD)在大肠杆菌中获得可溶表达。
Lane 1:上样
Lane 2: 流穿
Lane 3: 50mM Imidazole洗脱
Lane 4: 500mM Imidazole洗脱
Lane 5: 蛋白Marker
根据您的关注的
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名称:单细胞裂解液(RNA提取)
货号:BTN130804
规格:1mL
本产品为单细胞RNA提取专用裂解液,本裂解液经多次优化,含有多种去污剂、变性剂和盐,可有效抑制核酸酶在裂解过程中对核酸的破坏,维持核酸结构的稳定含有常用。纯化所得RNA可用于测序、单细胞PCR等实验。本产品足够使用200次以上。
储存条件:低温运输,4℃保存,有效期两年。
名称:DNA粘转平试剂盒
货号:BTN60107
规格:20次
本产品利用Pfu DNA polymerase所具有3′到5′的聚合酶活性和5′到3′外切酶活性,将3′或5′突出的DNA片段转化成平末端,用于克隆工作。
产品特点:
1. 简单,精心优化过的2×Polishing Buffer中含有所需要的所有成分,不需要单独准备。
2.适用于任何平末端的DNA载体。
产品组成:
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成分
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规格
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Pfu DNA Polymerase(3U/μL)
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20μl
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2×Polishing Buffer
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0.5ml
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说明书
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1份
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储存条件:低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。
使用方法:
1. DNA片段的准备:
无论是来源Taq,Tth,T7,Klenow和Vent等DNA聚合酶合成的DNA片段,还是用限制性内切酶制备的DNA片段,粘转平之前均需要将DNA沉淀以便去除反应液中的无关成份。沉淀DNA的方法包括经典的盐/纯沉淀法,离心柱DNA 吸附法和百奥莱博的一管式非醇超快DNA沉淀法。
2. 设置粘转平(Polishing)反应:
在一个干净的离心管中,分别加入
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3′或5′突出的DNA片段
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10-500ng
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2×Polishing Buffer
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25μL
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Pfu DNA polymerase
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1μL
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补水到
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50μL
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72℃保温2小时。
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注意:如果不使用热盖式PCR 仪器加热,则需要在反应管中再加入适量液体石蜡以防反应过程中水份蒸发。
3.反应后处理
粘转平反应后,样品可以放-20℃长期保存,也可以直接用于T4 DNA连接酶催化的连接反应。对10μL的连接反应体系,一般需要加入1-2μL粘转平反应液。由于Pfu DNA polymerase在连接反应的温度条件下几乎没有活性,所以不必去除。但文献报道,去除后连接效率更高。
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