KFS099 超灵敏ECL检测试剂盒

北京百奥莱博供应的超灵敏ECL检测试剂盒用于科学研究，我公司专注于蛋白质研究产品的研发、生产和供应，为您提供的超灵敏ECL检测试剂盒质量可靠，批间差小，且价格公道，热切盼望您选购我们的产品。

北京百奥莱博科技有限公司是一家专业的生物试剂销售公司。公司主要经营血清、抗原、抗体等生物试剂产品，可以为您提供专业的技术服务，以优良的价格、优质的服务、优先的理念，满足客户的各方面的需求，与国内多家企业、单位建立了良好的长期合作关系，拥有较好的企业信誉和品牌形象。

特别提示：包括超灵敏ECL检测试剂盒在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：超灵敏ECL检测试剂盒
产品货号：KFS099
产品规格：100ml|200ml

本试剂盒用于Western blot的化学发光检测，比普通超敏型ECL 显色法灵敏度更高，10-15g 级检测水平。原理是采用发光底物（Luminol），其与辣根过氧化物酶反应时产生很强的光信号，在暗房中对X-光片感光，以此检测微量蛋白而获得理想的实验结果。在ECL 检测液的基础之上加以改进，具有灵敏度高，持续时间长的特点，同时试剂盒的稳定性也有很大的提高。

储存：2～8℃，有效期一年。

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货号	名称	规格
BTN140648	PCR污染清除剂	250mL
BTN130525	蛋白磷酸酶抑制剂混合液Ⅱ	1mL
YT035	蛋白标准(5mg/ml BSA)	1ml
YT184	红细胞裂解液	120ml
YT609	RIPA裂解液(强)	100ml
WE0281	蛋白银染试剂盒	20次
SNM468	抗荧光衰减封片剂	10ml

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名称：非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)
货号：YT053
规格：2ml
本品是一种经过改良的以溴酚蓝为染料，5倍浓缩的蛋白上样缓冲液，本产品中不含SDS等变性试剂，但含有还原性试剂DTT，可以用于常规的非变性聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)蛋白样品的上样。

注意事项：非变性PAGE蛋白上样缓冲液(5X)中含少量DTT，有轻微刺激性气味，但不含剧毒的巯基乙醇。

储存条件：-20℃，有效期一年。

名称：蛋白磷酸酶抑制剂混合物
货号：WE0256
规格：1ml
  组织和细胞在裂解过程中会释放大量内源性蛋白磷酸酶，以各种方式催化磷酸化蛋白去磷酸化。本产品含四种广谱的磷酸酶抑制剂混合物，可有效抑制丝氨酸/苏氨酸磷酸酶、蛋白酪氨酸磷酸酶、碱性磷酸酶、酸性磷酸酶等。该混合物为100倍浓缩水溶液，可直接加入任何组织类型和细胞的裂解产物中，均能有效抑制磷酸化蛋白质的去磷酸化，从而维护蛋白质的磷酸化状态。适用于Western Blot和免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定等。

使用方法：
取出实验所需蛋白抽提试剂进行预冷，按照1:99比例加入Phosphatase Inhibitor Cocktail(例如990μl抽提试剂中加入10μl Phosphatase Inhibitor Cocktail)，使其在抽提试剂中成1×工作液。

储存条件：2～8℃

名称：通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗)
货号：WE0316
规格：3ml
  本试剂盒根据生物素与链霉亲和素具有很强亲和力的原理设计。 在兔源或鼠源的一抗与相应的靶抗原结合后，本试剂盒中的生物素化抗兔/鼠通用型二抗与一抗特异结合；二抗上标记的生物素与标记了过氧化物酶(HRP)的链霉亲和素结合，形成抗原～特异性一抗～生物素化的二抗～HRP标记的链霉亲和素复合物。HRP可以催化底物显色，从而推断待检抗原的存在及分布。该试剂盒使用的生物素化二抗、SA-HRP，均采用优化的标记和纯化技术，使得其染色有更高灵敏度和更低的背景，适合于检测福尔马林固定石蜡包埋组织切片，以及冰冻切片、细胞爬片、新鲜制备的血涂片等。兔/鼠通用型Streptavidin-HRP试剂盒适合与百奥莱博即用型或浓缩型抗体配套使用。

试剂盒组成：

组份	3ml
Solution A(Endogenous Peroxydase Enzymes Blocking Buffer，White Solution)	3ml
Solution B(Normal Goat Serum For Blocking，White Solution)	3ml
Solution C(Goat anti-Rabbit/Mouse IgG，Biotin，Ready to Use，Yellow Solution)	3ml
Solution D(Streptavidin-HRP，Ready to Use，Red Solution)	3ml
DAB-A(20×)	250μl
DAB-B(1×)	5ml

注意事项：
1、以每张切片加入1滴(约50μl)计算，3ml可做60张切片， 18ml可做360张切片。
2、对于内源性生物素含量比较丰富的组织，使用本试剂盒时zuì好用内源性生物素阻断剂进行封闭。
3、DAB工作液现配现用，配制好的工作液2～8℃避光1小时内有效。
4、实验过程中避免组织片干燥，因此各步孵育时工作液用量必需充足，保证完全覆盖组织样本，且尽量在湿盒中进行孵育。
5、为获得zuì佳实验结果，请务必优化实验条件及试剂用量。
6、DAB为可疑致癌物，使用时请采取必要的防护措施。
7、本产品仅用于科研，不能用于人体反应或人体治疗。

操作步骤：
1、常规处理欲检测的石蜡或冰冻组织切片或细胞爬片等样本。
1)组织切片或细胞爬片染色前处理：
a. 石蜡切片
脱蜡水化：60ºC烤片1小时，二甲苯脱蜡二次，每次5分钟；再依次浸入梯度乙醇(无水乙醇－无水乙醇－95%－85%－75%乙醇)和蒸馏水中各5分钟水化。
b. 冰冻切片和细胞爬片
切片(或爬片)浸于0.01 M pH7.4 PBS洗涤3次×5分钟。然后用0.1%Triton X-100覆盖组织(或细胞)浸润15分钟，0.01 M pH7.4 PBS洗涤2次×5分钟。
2)石蜡切片的抗原修复：大大多数情况下，石蜡组织切片用柠檬酸缓冲液高压修复都是适合的。
修复工作液配制：1 L去离子水中加入10ml柠檬酸缓冲液(IHC抗原修复液, 100×)(Cat#：WE0318)，混匀即可。
修复过程：修复液加入高压锅内，待修复切片浸于修复液中(必需没过组织)，盖上压力锅盖，加热至均匀喷汽，从喷汽开始计时，1~2分钟后压力锅离开热源，自然冷却至室温，取出切片，蒸馏水淋洗后，再用PBS(0.01 M pH7.4)漂洗2次，每次3分钟。
2、滴加适量Solution A白色溶液，即内源性过氧化物酶封闭液室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。
3、滴加适量Solution B白色溶液，即封闭用正常羊血清工作液，室温孵育10分钟，甩干。
4、滴加适量一抗工作液(商品化即用型抗体或适当比例稀释的浓缩抗体)，按实验要求孵育，然后PBS充分淋洗。
5、滴加适量Solution C黄色溶液，即生物素标记羊抗兔/鼠二抗工作液，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。
6、滴加适量Solution D红色溶液，即HRP标记的链霉亲和素，室温孵育10分钟，PBS充分淋洗。
7、DAB显色工作液配制：根据需要量，将DAB-A和DAB-B以1：19的体积比混匀后即为DAB显色工作液。也可选择每毫升试剂B中滴加1滴(约50μl)试剂A，混匀即可。
8、显色：加适量的DAB显色工作液于需要显色的组织切片或细胞爬片上即可显色，显色时间一般为1-5分钟。显微镜下观察控制显色时间，当达到zuì佳显色效果后，自来水冲洗终止显色。显色后的切片经复染、脱水透明，封片后可长期保存。

储存条件：2～8℃


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