特别提示:包括胃蛋白酶测试盒(微量法)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:胃蛋白酶测试盒(微量法)
产品货号:SK123-1
产品规格:100管/48样
测定意义:
胃蛋白酶由胃粘膜主细胞分泌,分解食物中蛋白质成小肽段。一般用于神经性低酸症的鉴别,慢性胃炎、慢性胃扩张、慢性十二指肠炎等症状时也会引起胃蛋白酶分泌的减少。
测定原理:
胃蛋白酶可催化血红蛋白水解,水解产物与福林试剂反应后显蓝色;一定范围内,其颜色的深浅与胃蛋白酶活性呈正比。
自备仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、研钵、冰和蒸馏水。
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货号
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名称
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规格
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SNM016
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一氧化氮合成酶测试盒(DAF-FM DA探针法)(荧光法)
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100T
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SNM020
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植物可溶性糖含量测试盒(比色法)
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50T/48样
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SNM066
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分型巯基(-SH)测定试剂盒
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SNM091
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内源性一氧化碳测定试剂盒(测组织)(比色法)
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50管/48样
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SNM122
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50管/48样
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SNM320
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100管/96样
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关注
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名称:Mn-SOD和Cu/Zn-SOD活性检测试剂盒(WST-8法)
货号:YT310
规格:100次
本试剂盒是一种基于WST-8的显色反应,通过比色来检测细胞、组织或其它样品中Cu/Zn-SOD、Mn-SOD或总SOD活性的试剂盒。本试剂盒可以检测细胞或组织匀浆液上清、全血、红细胞抽提物、血清等生物样品中的SOD活性。一个试剂盒共可以进行100次检测。
试剂盒组分:
SOD检测缓冲液———————70ml
WST-8———————————800μl
酶溶液———————————100μl
反应启动液(40X)——————60μl
Cu/Zn-SOD抑制剂A——————500μl
Cu/Zn-SOD抑制剂B——————500μl
超氧化物岐化酶能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶。
目前有多种SOD活性测定法,其中NBT(氮蓝四唑)法由于使用方便而被广泛使用。但NBT法产生的甲臜染料水溶性差,易和被还原的黄嘌呤氧化酶相互作用,抑制百分率达不到等,从而使检测的灵敏度和度受到影响;细胞色素C法也是一种常用来检测SOD活性的方法,但细胞色素C其氧化活性高,易受样品中的还原剂干扰,另外该方法需要连续测定吸光度值,对于SOD的检测灵敏度比较低,并且不太适合大批量样本的检测。
目前测定SOD比较的方法包括WST-1法和WST-8法,其中WST-8法比WST-1法更加稳定、灵敏度更高。本试剂盒采用了目前测定SOD方法中稳定性更好、灵敏度更高的的WST-8法。WST-8法的原理参考下图,WST-8可以和黄嘌呤氧化酶催化产生的超氧化物阴离子反应产生水溶性的甲臜染料(formazan dye),该反应步骤可以被SOD所抑制。通过对WST-8产物的比色分析即可计算SOD的酶活力。

基于黄嘌呤氧化酶藕联反应体系和WST-8的SOD酶活力检测原理图。XO:xanthine oxidase。
WST-8的反应产物是稳定的水溶性产物,可以通过单个时间点的吸光度检测来测定SOD活力,适合高通量筛选研究。同时WST-8法测定SOD酶活力时,zuì大抑制百分率可以接近,并且可以不受一些常见的干扰因素的干扰,使检测效果比其它的一些常见方法显著改善。
本试剂盒的检测不受样品中过氧化氢的干扰。很多细胞和组织样品中含有内源性的过氧化氢,会干扰SOD的检测。本试剂盒通过添加适量过氧化氢酶等特殊方法,能有效去除常规样品中过氧化氢的干扰。例如,对于SOD标准品的检测,标准品中添加高达0.1mM的过氧化氢时,对于检测结果仍无显著影响。
哺乳动物编码3种SOD。在大部分组织中,含量zuì高的是定位在细胞浆中的Cu/Zn-SOD。Mn-SOD主要表达在线粒体中,并且Mn-SOD是可以被诱导表达的。Mn-SOD在某些情况下也可以定位在细胞浆中。有些组织或体液中会含有第三种SOD,extracellular SOD,简称EC-SOD。EC-SOD也是一种Cu/Zn-SOD,和编码细胞浆Cu/Zn-SOD的基因相似性很高,但有所不同。综上所述,细胞或组织内共有两类SOD,即铜锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)和锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)。这两种SOD酶活性的总量就是总SOD的酶活性。当用Cu/Zn-SOD的抑制剂抑制其酶活性时测定得到的就是Mn-SOD的酶活性。如果此时同时测定总的SOD酶活性,就可以计算出Cu/Zn-SOD的酶活性。
KCN或NaCN可抑制CuZn-SOD酶活性,也被大量用于测定Mn-SOD的酶活性。 但KCN或NaCN都具有剧毒,并且对Cu/Zn-SOD的抑制百分比达不到很接近。
本试剂盒采用了一种的两步双重抑制Cu/Zn-SOD的方法,在避免使用有毒yào品的情况下同时确保了对于Cu/Zn-SOD的抑制百分比达到高度接近,即对于Cu/Zn-SOD的抑制效果显著优于KCN或NaCN。使对于Cu/Zn-SOD或Mn-SOD酶活力的测定更加安全和准确。
注意事项:
1. 待测样品-70℃可保存1个月。需注意反复冻融会导致SOD部分失活。
2. 细胞或组织等样品制备时不能采用含有Triton X-100等去垢剂的溶液,否则会干扰本试剂盒的检测。
3. 抗氧化物会对本试剂盒的检测产生干扰,例如0.1mM ascorbic acid,5mM GSH都会使测定出来的吸光度显著升高。此时尽管样品没有颜色,如果设置了使用说明中的空白对照3,就可以消除样品中的抗氧化物的干扰。
4. Cu/Zn-SOD抑制剂A对人体有刺激性,使用时请注意适当防护。
储存条件:-20℃,有效期6个月。

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