YT488 10×YTM Buffer

10×YTM Buffer是高品质的克隆与表达产品，由北京百奥莱博供应，本产品用于科研试验，10×YTM Buffer是我司众多优质克隆与表达之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司是一家专业的生物试剂销售公司。公司主要经营血清、抗原、抗体等生物试剂产品，可以为您提供专业的技术服务，以优良的价格、优质的服务、优先的理念，满足客户的各方面的需求，与国内多家企业、单位建立了良好的长期合作关系，拥有较好的企业信誉和品牌形象。

特别提示：包括10×YTM Buffer(与NEB CutSmart Buffer成分相同)在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：10×YTM Buffer(与NEB CutSmart Buffer成分相同)
英文名称：10×YTM Buffer(For Restriction Enzyme)
产品货号：YT488
产品规格：5ml

百奥莱博的10× YTM Buffer是一种能让超过200种限制性内切酶的活性达到的缓冲液。使用YTM Buffer，可以免去内切酶酶切时选择buffer的麻烦，特别是在双酶切时会变得更加简单易行。此外，许多DNA修饰酶在YTM Buffer中也保留了酶活性，这样在酶切后进行DNA修饰酶处理就无需进行DNA纯化了。

各种内切酶和修饰酶在1× YTM buffer中的活性，请参考附录1和附录2。不同来源的限制性内切酶对于YTM Buffer的兼容性可能略有不同。1× YTM Buffer的组分为50 mM Potassium acetate, 20 mM Tris-acetate, 10 mM Magnesium acetate, 100 μg/ml BSA, pH 7.9 @ 25℃，与NEB公司的CutSmart™ Buffer完全一致。一个包装的本产品，如果用于20μl的酶切反应体系，共可以用于2500个酶切反应。

储存条件：-20℃。

附录1：
常用限制性内切酶在 YTM Buffer 中的活性和效能表如下：


附录2：
DNA 修饰酶在 YTM Buffer 中的活性表格如下:


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名称：大肠杆菌JM110化学感受态细胞
货号：BTN130511
规格：10*100μl
 本产品是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞，可用于DNA的化学转化。使用pUC19质粒检测本产品，转化效率可达106。本产品为dam-，dcm-的菌株，排除dam，dcm甲基化的影响。
 菌株基因型为：dam dcm supE44 hsdR17 thi leu rpsLlacY galK galT ara tonAthrtscΔ(lac-proAB)F-[traD36 proAB+ lacIq cZΔM15]

储存条件：干冰运输、-80℃保存，有效期半年。

自备试剂：目的DNA、SOC或LB培养基等。

使用方法：
1. 取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100μL，根据实际情况分装使用。
以下实验以50μL感受态细胞为例。
2. 待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA，通常100μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA 所饱和)，用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3. 42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟。
4. 每个离心管中加入450μl 无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素)，混匀后置于37℃摇床，150rpm 振荡培养45分钟使菌体复苏。
5. 根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的SOC或LB 固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

注意事项：
1. 涂布用量可根据具体实验调整。若转化的DNA 总量较多，可取少量转化产物涂布平板；若转化的DNA 总量较少，可取200-300μl转化产物涂布平板。若预计的克隆数较少，可通过离心(4,000rpm，2分钟)后吸除部分培养液，悬浮菌体后将其涂布于平板中。
2. 新制备的固体培养基不易涂干，可将平板正置于37℃直至液体被吸收后再倒置培养。
3. 涂布剩余的菌液可置于4℃保存，如果次日的转化菌落数过少，可以将剩下的菌液再涂布新培养基进行培养。

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