特别提示:包括核酸内切酶 IV在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:核酸内切酶 IV
英文名称:Nucleic acid enzyme IV
产品货号:SV1122
产品规格:5KU|1KU
特性:
单细胞凝胶电泳(彗星试验)
碱洗脱
碱解旋
概述:
核酸内切酶 IV 能够作用于 DNA 分子上的几种氧化性损伤。该酶是一个脱嘌呤/脱嘧啶(AP)核酸内切酶,水解 DNA 上的完整 AP 位点。切割 AP 位点 5´ 端的个磷酸二酯键,产生 3´ 羟基和 5´ 脱氧核糖磷酸末端。该酶也具有 3´ 二酯酶活性,能从 DNA 的 3´ 末端释放磷酸甘油醛、完整的脱氧核糖 5´ -磷酸和磷酸。
来源:
克隆有 Endo IV 基因的重组 E. coli 菌株。
反应条件:
1X BalbBuffer 3
[100 mM NaCl,50 mM Tris-HCl,10 mM MgCl2,1 mM DTT(pH 7.9 @ 25℃)],37℃ 温育。
热失活:85℃ 加热 20 分钟。
质保声明:
核酸内切酶 IV 经过严格的质控检测,确保该产品具有zuì高的活性和纯度。更多信息请联系我们咨询。
单位定义:
1 单位指在 10 μl 反应体系中,37℃ 条件下,1 小时能切割 1 pmol 含一个 AP 位点* 的 34 mer 寡核苷酸双链所需要的酶量。更多信息请联系我们咨询。
* AP 位点的创建方法如下:37℃ 条件下,用 1 单位尿嘧啶-DNA 糖基化酶(UDG)处理 10 pmol 含一个尿嘧啶碱基的 34 mer 寡核苷酸双链 2 分钟。
彗星试验的推荐稀释倍数:
1:104~1:105。详细步骤请联系我们咨询。
浓度:
10,000 units/ml。
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名称:DNA末端平滑试剂盒
货号:YT404
规格:20次
本试剂盒可以进行20个常规的末端平滑化反应。本品是利用T4 DNA聚合酶(T4 DNA Polymerase)的5"→3"DNA聚合酶活性和3"→5"的DNA外切酶活性,用于将酶切或PCR等反应后产生的粘末端转变为平末端的试剂盒。经过本试剂盒处理产生的平末端DNA片段可以用于常规的平端连接反应。
粘末端有两种,一种为5"端突出末端,另外一种为3"端突出末端。本试剂盒可以将5"端突出末端补平,也可以将3"端突出末端削平(也称打平)。
当末端为5"端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其5"→3"DNA聚合酶活性将末端补平;当末端为3"端突出末端时,T4 DNA Polymerase可以利用其3"→5"DNA外切酶活性将末端削平。
产品组份:
T4 DNA Polymerase(1U/μl)————20μl
Reaction Buffer(5X)———————100μl
dNTP Mixture(2.5mM each)—————50μl
Reaction Buffer(5X):335mM Tris-HCl(pH8.8 at 25℃),33mM MgCl2,5mM DTT, 84mM(NH4)2SO4。
储存条件:-20℃
名称:碱性磷酸酶(来源于大肠杆菌)
货号:YT405
规格:200U
本品是一种热敏感的,可以催化DNA、RNA、核糖核苷酸和脱氧核糖核苷酸水解释放5′或3′末端磷酸基团的酶,也可以脱去蛋白质丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基上的磷酸基团。本酶是一种碱性磷酸酯酶,在我司的多种内切酶和PCR缓冲液中可保持活性,对于各种类型的DNA 5′末端的去磷酸化均可在37℃孵育10分钟即可完成,并且75℃孵育5分钟即可完全失活。
碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, AP/ALP/AKP/ALKP/ALPase/Alk Phos)常被称作碱性磷酸酯酶(EC 3.1.3.1),是一类水解酶,通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸基团除去,并生成磷酸根离子和自由的羟基,其去磷酸化作用的底物包括核苷酸、蛋白质和生物碱等,并在碱性条件下zuì为有效。该酶是一组同功酶的统称。
经限制性内切酶酶切的质粒5′端带有磷酸基团,在进行基因克隆时为避免质粒自连,可以使用本酶去除5′末端磷酸基团。脱去5′末端磷酸基团的质粒不能发生自连。
特点:快速去磷酸化,只需37℃孵育10分钟即可;快速失活,75℃孵育5分钟即可完全失活;使用方便,在各种内切酶和PCR缓冲液中保持活性,可以和质粒DNA的消化同时进行;操作步骤简单,对于5′或3′突出末端、平端等各种DNA的脱磷酸化采用完全相同的操作步骤;可直接用于连接反应,经本酶脱磷,并75℃孵育5分钟失活后可直接用于后续的连接反应。
用途:通过去除载体或DNA片段5′末端的磷酸基团,防止载体或DNA片段自连;质粒DNA的同时内切酶消化和脱磷;通过5′末端脱磷,为5′末端磷酸化放射性标记准备模板;去除DNA、RNA 5′或3′末端的磷酸基团;用于蛋白质丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸残基的去磷酸化。
来源:大肠杆菌表达,表达基因为一种细菌碱性磷酸酯酶基因。
酶活性定义:37℃10分钟内,催化1μg 线性化的pUC19 DNA5′末端脱磷所需的酶量定义为一个活力单位。
纯度:不含DNA外切酶和内切酶,不含RNA酶。
酶储存溶液:20mM HEPES-NaOH(pH7.4),1mM MgCl2,0.1mM ZnCl2,0.1% Triton X-100,50%(v/v)glycerol。
Reaction Buffer(10X):100mM Tris-HCl(pH8.0 at 37℃),50mM MgCl2,1M KCl,0.2% Triton X-100,10mM 2-mercaptoethanol,1mg/ml BSA。
失活或抑制:75℃加热5分钟可以使本酶失活。金属离子螯合剂对本酶有抑制作用。
储存条件:-20℃
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关注
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货号
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名称
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规格
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BTN130666
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尿嘧啶切刻酶
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50U
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BTN130621
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Taq DNA连接酶
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1000U
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BTN120510
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ATP依赖的DNase
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200U
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YT394
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M-MLV反转录酶II(RNase H-)(逆转录酶)
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2000U|10KU|50KU
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YT406
|
Klenow片段
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100U
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SV0032
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AgeI-HF RE-Mix
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25次
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SV0053
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ApeKI限制性内切酶
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1250U|250U
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