BTN131008 弱RIPA裂解液

弱RIPA裂解液由北京百奥莱博供货并提供相关技术服务支持，本品用于科研试验，弱RIPA裂解液是我司众多优质蛋白质研究之一，质量堪比同类进口产品，价格非常优惠，目前正热烈促销中，恭候您的咨询订购。

北京百奥莱博科技有限公司是一家专业的生物试剂销售公司。公司主要经营血清、抗原、抗体等生物试剂产品，可以为您提供专业的技术服务，以优良的价格、优质的服务、优先的理念，满足客户的各方面的需求，与国内多家企业、单位建立了良好的长期合作关系，拥有较好的企业信誉和品牌形象。

特别提示：包括弱RIPA裂解液在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：弱RIPA裂解液
英文名称：RIPA Lysis Buffer(Weak)
产品货号：BTN131008
产品规格：250mL

RIPA裂解液是一种传统的细胞组织快速裂解液。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等实验。本产品裂解强度较强，对膜蛋白、胞浆蛋白、核蛋白、胞浆磷酸化蛋白和各种转录因子均有很好的效果，本产品含有各种蛋白酶和磷酸蛋白酶抑制剂，能有效防止各种蛋白酶对目的蛋白的降解。我公司各种RIPA裂解液产品特点见下表：

产品名称	RIPA裂解液(强)	RIPA裂解液(中)	RIPA裂解液(弱)
有效裂解成分	1% Triton X-100,1% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.5% deoxycholate,0.1% SDS	1% NP-40，0.25% deoxycholate
裂解强度	强	中	温和
对膜蛋白的提取	很好	较好	一般
对胞浆蛋白的提取	很好	很好	很好
对核蛋白的提取	很好	较好	较好
胞浆磷酸化蛋白提取	很好	很好	很好
细胞核转录因子提取	很好	很好	很好
含蛋白酶抑制剂	是	是	是
含磷酸酯酶抑制剂	是	是	是
主要用途	WB,IP	WB,IP	WB,IP,co-IP

储存条件：低温运输，4℃保存，有效期一年。

使用方法：

对于培养细胞样品：
1. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的zuì终浓度为1mM。
2. 裂解细胞
2.1 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
2.2 对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
注意：通常6孔板每孔细胞加入150微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200微升或250微升。

对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的zuì终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入150-250微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000～14000g离心3～5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
注意：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。

备注：
1.为取得zuì佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。
2.裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3.用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，建议使用BCA蛋白浓度测定试剂盒，不建议使用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。

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名称：蛋白磷酸酶抑制剂混合液Ⅱ
货号：BTN130525
规格：1mL
组织/细胞裂解时会释放出大量内源性蛋白磷酸酶，以各种方式催化磷酸化蛋白的去磷酸化，导致不同于正常生理状态的差异，影响实验结果。因此，加入外源性蛋白磷酸酶抑制剂，抑制磷酸化蛋白的去磷酸化，维持蛋白质的磷酸化状态，是Western Blotting、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质和蛋白激酶活性测定等研究不可缺少的一步。本产品就是针对这一用途开发。

产品特点：
1. 即开即用，不需要单独购买每个成分然后再配制。
2. 由多种蛋白磷酸酶抑制剂组成，各成分的浓度经过精心优化。
3. 抑制谱广，能特异性地抑制酪氨酸磷酸酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶，zuì大限度保持蛋白质磷酸化。
4.与各种动物细胞裂解液兼容。
5. 使用简单，在细胞裂解液中按一定比例加入即可(根据蛋白磷酸酶决定，一般按1/100的体积比)。
6.适用于Western blot、免疫共沉淀检测磷酸化蛋白质、蛋白激酶活性测定和信号传导等试验。

储存条件：低温运输，-20℃保存，有效期一年。

使用方法：
1.在临用前溶解本产品，并按1/100的比例加入到细胞裂解液中(1mL细胞裂解液中加入10μL)。注意：对蛋白磷酸酶含量特别丰富的组织，可以将加入比列提高到1/20-1/50。
2.后续动物细胞提取和蛋白组学处理按常规方法进行即可。

注意：避免反复冻融本产品，所以次溶化后，如果还有剩余，可将其分装成小份冻存，每次用多少取多少。

名称：DAB
货号：SNM477
规格：1g

名称：1×Tris-甘氨酸蛋白电泳缓冲液
货号：KFS060
规格：1000ml
本产品作为蛋白电泳缓冲液，含有0.25M Tris、1.92M 甘氨酸。适用于变性聚丙烯酰胺凝胶电泳。

为了您的安全和健康，请做好实验防护工作。如果需要电泳80KDa 以上的蛋白可以添加终浓度为0.1%的SDS。

储存：室温，有效期12个月。

名称：生物素分子纯化预装柱
货号：SY0400
规格：1ml|5×1ml
本品是装填了Streptavidin Agarose Resin 6FF的一种中压预装柱，规格1ml，预装柱具有标准接口，可以适配商品化的各类中压色谱系统，如ÄKTA 等，方便客户操作。

Streptavidin Agarose Resin 6FF是一种生物素或生物素化的蛋白、抗体等物质的纯化树脂，其作用原理是基于链霉亲和素与生物之间的相互作用，将链霉亲和素高度交联于6%琼脂糖上，独特的制备工艺使其具有更高的物理化学特性，可以耐受更高的压力，在相对较高的流速下，实现对目的蛋白的纯化，更适于工业大规模蛋白的纯化。

由于链霉亲和素与生物之间的亲和力很强，纯化时需要在变性条件下洗脱；而链霉亲和素对亚氨基生物素的亲和力相对较弱，可以在 pH9.5-11.0 结合，pH4.0 时洗脱，不需要使用变性剂，所以能更好的保持亲和素偶联物的活性。

基质（Matrix）：高度交联的6%琼脂糖微球
配体（Ligand）：链霉亲和素
孔径（Bead size）：45-165µm
载量（Capacity）：＞200nmol Biotin/ml 介质
zuì大压力（PressureMax）：0.3 MPa, 3bar
pH稳定范围：2-10
储存缓冲液：20%乙醇
储存条件：4℃，有效期2年

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货号	名称	规格
BTN130886	植物线粒体总蛋白提取试剂盒	50次
BTN70704A	预染蛋白Marker(14.4～97.4kD)	10次
YT041	细胞核蛋白与细胞浆蛋白抽提试剂盒	50次|100次
WE0263	酵母蛋白抽提试剂盒	25次|100次
WE0298	一步法快速WB试剂盒(兔源一抗)	50次
SNM434	WB一抗稀释液	100ml
SNM471	免疫组化用苏木素染色液	50ml

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