JN0018 Taq Plus DNA聚合酶

我公司致力于为客户提供高纯度、低成本的活性重组蛋白，包括Taq Plus DNA聚合酶在内的各类受体、细胞因子、生长因子、转录因子、激素、酶、毒性蛋白、病毒抗原等。

北京百奥莱博科技有限公司是一家专业的生物试剂销售公司。公司主要经营血清、抗原、抗体等生物试剂产品，可以为您提供专业的技术服务，以优良的价格、优质的服务、优先的理念，满足客户的各方面的需求，与国内多家企业、单位建立了良好的长期合作关系，拥有较好的企业信誉和品牌形象。 主营产品:血清、抗体、抗原、核酸提取、核酸纯化等生化试剂

特别提示：包括Taq Plus DNA聚合酶在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：Taq Plus DNA聚合酶
英文名称：Taq Plus DNA Polymerase
产品货号：JN0018
产品规格：250U

  本酶是Taq DNA聚合酶和Pfu DNA聚合酶按特定比例混合而成。Taq Plus DNA聚合酶具有Taq DNA聚合酶很强的DNA聚合能力，同时由于Pfu DNA的存在，具有一定的保真特性, 能部分纠正 DNA扩增过程中所出现的错误。与Taq DNA聚合酶相比，具有扩增长度 增加（简单模板可有效扩增20kb,复杂模板可有效扩增10kb), 保真度好的特点；与Pfu DNA聚合酶相比，具有扩增能力强，反应效率高的优 势。使用本制品扩增得到的PCR产物具有3′端"A"突出，因此可直接克隆于T载体中。

产品组成：

组份	JN0018-250U
Taq Plus DNA（5U/μl）	50μl
dNTP混合液（各10mM）	200μl
5×Taq Plus Buffer with Mg2+	1ml

产品用途：
1、可替代大部分Taq DNA聚合酶的用途；
2、需高灵敏度的PCR扩增；
3、大片段PCR扩增反应 (可达 20kb)。

使用建议：使用本制品扩增得到的PCR产物具有3′端"A"突出，可直接克隆于T载体中。

应用实例：


图例一）使用Taq Plus配制的50μl扩增体系中，以5ng λDNA为模板，对1kb～20kb片段的扩增结果。
泳道M：λ/HindIII；泳道1：1kb； 泳道2：2kb； 泳道3：4kb； 泳道4：6kb； 泳道5：8kb； 泳道6：10kb 泳道7：12kb 泳道8：20kb

图例二）50μl扩增体系中，分别以100ng～0.1ng小鼠基因组DNA为模板，可很好地扩增出1.1kb DNA片段（IL-1b 基因）。
泳道M：DNA Ladder 2000 泳道1：100ng； 泳道2：10ng； 泳道3：1ng； 泳道4：0.1ng

常用反应体系（50μl）

组分	体积
5× Taq Plus Buffer	5μl
上游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
下游引物	0.2-1.0μM(终浓度)
dNTP(各10mM)	1.0μl
模板	1-50ng（质粒）
	10ng-1μg(基因组)
Taq Plus	0.25μl（1.25U）
ddH2O	至50μl
*Mg2+终浓度为2mM

质量保证：经多次柱纯化，SDS-PAGE检测纯度大于95%；PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留、无核酸内、外切酶污染。

活性定义：在74℃条件下，30分钟内催化10nmol dNTP的掺入反应成为酸不溶性物质所需的酶量为一个单位。

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BTN120679 6nt随机引物(抗水解)(0.5mM) 100μL
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BTN131179 核酸稀释液，测OD专用 250mL
BTN101114 通用型RT-LAMP恒温扩增试剂盒 50次
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WE0152 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(低含量ROX校正染料) 5ml
WE0153 快速实时荧光定量PCR的预混体系(荧光探针)(高含量ROX校正染料) 5ml

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名称：DMSO，PCR级
货号：BTN80205
规格：1.5mL
大量实验显示5-10%的DMSO能够促进PCR反应，尤其是高GC模板的PCR反应，本产品就是专门用于PCR或RT-PCR的高纯度DMSO。

储存条件：常温运输及保存，有效期一年。

名称：硫酸镁溶液(PCR级MgSO4溶液)
货号：BTN130840
规格：5mL
本产品为专门用于PCR的MgSO4溶液，浓度10mM，可以用于调节MgSO4的zuì佳浓度。MgSO4为常用的PCR增强剂之一。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：25mM氯化锰溶液(PCR级MnCl2溶液)
货号：BTN130307
规格：5mL
本产品为专门用于易错PCR的MnCl2水溶液，浓度为25mM，可用于调节MnCl2的zuì佳浓度。由于Mg2+在PCR过程中可以稳定非互补的碱基对，Mn2+能够降低聚合酶对模板的特异性，因而调整两种离子的浓度，可获得不同突变频率的多样性文库。

氯化锰分子量为125.8，CAS号为7773-01-5，水合氯化锰外观为玫瑰色单斜晶体；无水氯化锰外观为桃红色结晶。密度为2.977g/cm3。熔点是650℃。在高于熔点温度下升华。沸点1190℃。易溶于水，溶于醇，不溶于醚。

储存条件：低温运输、-20℃保存，有效期一年。

名称：10nt随机引物(0.5μg/uL)
货号：BTN131227
规格：250
本产品为长度为10nt的随机引物，序列为5′-(NNNNNNNNNN)-3′，主要用于cDNA的合成和DNA探针标计。

储存条件：低温运输和-20℃保存，有效期一年。

疑难解答：
Q: 随机引物的长度对cDNA合成有何影响？
A: 文献报道，长度为10个nt的随机引物合成cDNA的效果好于6nt长的随机引物。

名称：即用型荧光定量RT-PCR试剂盒
货号：BTN101219
规格：50次
本产品是基于荧光染料检测的即用型双酶一管式RT-PCR试剂盒，可以对靶片段进行实时定量RT-PCR分析(quantitative RT-PCR、qRT-PCR)。产品含有经过优化的缓冲液组分、MMLV-Taq DNA聚合酶混合物、dNTPs、MgCl2及荧光染料DNAgreen等所有一管式实时定量RT-PCR所需要的成分，用户只需加入RNA模板和引物即可进行实时定量RT-PCR反应，具有广泛的用途。

产品特点：
1.一管式完成qRT-PCR反应，避免样品交叉污染，尤其适合临床应用。
2. 即开即用，用户不需要单独准备qRT-PCR所需的各种试剂。
3. 主要成分只有两个(RT-PCR buffer和MMLV-Taq Mix)，将加样步骤减少到zuì低，大降低了加样误差，增加了可重复性。
4. 使用范围广，适用于从病毒RNA到人RNA的各种RNA模板。
5.高灵敏度，每个RT-PCR体系zuì低可以检测200拷贝的RNA分子，可扩增的模版RNA的zuì长达2000nt。

试剂盒组成：

成分	规格
双酶一管式qRT-PCR Buffer，2×	750μl
MMLV-Taq Mix	100μl
RNase-free水	1ml
说明书	1份

储存条件：低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。

使用方法：
1.在一干净的无RNase的PCR管中，先加入下列成分(下面只列出样品管的设置情况，用户可自己根据需要设置阳性和阴性对照)：

成分	样品
自备RNA模板(分下面三种情况)	见下
总RNA	100-500ng
或poly(A)mRNA	10-500ng
或体外转录得到的专一RNA	0.01pg-500ng
RNA特异性引物一(自备)	终浓度300nM(注1)
RNA特异性引物二(自备)	终浓度300nM
RNase-free水	补到10μL
双酶一管式qRT-PCR Buffer(2×)	15μl
自备ROX(某些荧光PCR机型需要)	3μL(注2)
MMLV-Taq Mix	2μl

 注1：通常初次使用本试剂时，可用引物浓度300nM进行实验，根据实验结果具体情况，在200～800nM范围内调整引物浓度。引物、待检样品的具体加量用户可以根据实际情况调整，同时增减RNase-free水用量，保证总反应体积不变即可。
 注2：如果使用ABI公司的7500，7700和7900三种型号的荧光PCR仪器，则需用自备的ROX进行Ct值校正。对ABI 7700和7900，ROX的zuì佳浓度为1×(即在每30μl反应体系中加3μl 10×ROX)。对ABI 7500，ROX的zuì佳浓度为0.05-0.1×(每30μL反应体系加0.3μL 10×ROX；也可将10×ROX稀释到1×，然后每个反应体系加入3μL 1×ROX)。ROX会在溶解曲线中产生噪音，因此，如果出现了杂峰，将软件中“Passive Reference Dye”中的“ROX”选项取消打勾，然后重新分析数据。对于iCycler IQ，MJ Opticon，MJ Chromo4，MX3000，MX4000，RotorGene3000，RotorGene 6000和LightCycler 480等型号的荧光PCR仪器，ROX不是必须的，但加入的话也不会影响整个PCR分析。
2. 轻柔混合均匀后放入PCR仪中进行荧光定量RT-PCR。
3. 设定RT-PCR反应条件时，一般将RT的条件设定成42℃ 30分钟，后接94℃变性5分钟，然后进入PCR循环(PCR参数将根据自备引物的Tm值和PCR产物长度由用户自行决定注)、zuì后72℃ 5分钟。并在退火或延长步骤中记录荧光信号。本产品中所含的荧光染料在没结合DNA时，zuì大吸收光谱在471nm，结合DNA时的zuì大吸收光谱在500nm，zuì大发射光谱在530nm。

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