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产品名称:kFluor647-EdU法细胞增殖检测试剂盒(成像)
产品货号:KFS329
产品规格:1000T
细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。zuì的检测细胞增殖方法是BrdU法。EdU法检测试剂盒是brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脱氧尿嘧啶)试剂盒是一种嘧啶类似物,可以在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测是基于“点击”反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应。
本试剂盒中,EdU试剂含有炔烃,而kFluor647染料试剂含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效,易于使用。只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。标准化的戊二醛固定和去污剂促渗可以使检测试剂进入细胞,而brdu方法则需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用Dnase消化)去暴露BrdU,从而方便BrdU抗体结合。
本试剂盒包含EdU法检测所需要的所有组份,可以检测细胞增殖与细胞周期分析。对于细胞周期的分析,试剂盒可以提供蓝色细胞核染料Hoechst33342。
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名称:细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒(WST-1法)
货号:YT126
规格:100次|500次
本试剂盒是一种广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。WST-1是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan(参考下图)。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞毒性越大,则颜色越浅。
WST-1是MTT的一种升级替代产品,和MTT或其它MTT类似产品如XTT、MTS等相比有明显的优点。先,MTT被线粒体内的一些脱氢酶还原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液来溶解;而WST-1和XTT、MTS产生的formazan都是水溶性的,可以省去后续的溶解步骤。其次,WST-1产生的formazan比XTT和MTS产生的formazan更易溶解。再次,WST-1比XTT和MTS更加稳定,使实验结果更加稳定。另外,WST-1和MTT、XTT等相比,线性范围更宽,灵敏度更高(参考下图)。
本试剂盒可以用于细胞因子等诱导的细胞增殖检测,也可以用于抗癌药物等对细胞有毒试剂诱导的细胞毒性检测,或一些药物诱导的细胞生长抑制检测等。
本试剂盒检测非常便捷。无须使用同位素,所有的检测步骤仅在同一块96孔板内完成。不必洗涤细胞,不必收集细胞,也不必采用额外步骤去溶解formazan。可以用于大批量样品的检测。
酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响。WST-1对细胞无明显毒性。加入WST-1显色后,可以在不同时间反复用酶标仪读板,使检测时间更加灵活,便于找到zuì佳测定时间。
注意事项:
由于使用96孔板进行检测,如果细胞培养时间较长,一定要注意蒸发的问题。一方面,由于96孔板周围一圈zuì容易蒸发,可以采取弃用周围一圈的办法,改加PBS,水或培养液;另一方面,可以把96孔板置于靠近培养箱内水源的地方,以缓解蒸发。
储存条件:-20℃,有效期一年。
名称:Caspase 3 活性检测试剂盒
货号:YT140
规格:20次|100次
本试剂盒是采用分光光度法检测细胞或组织裂解液中caspase 3酶活性或纯化的caspase 3酶活性的试剂盒。本试剂盒用酶标仪检测或容量不超过100μl的分光光度检测杯检测时,除标准曲线外可以检测20个样品。
Caspase是一个在细胞凋亡过程中起重要作用的蛋白酶家族。Caspase 3也称CPP32、Yama或apopain,有时被写作caspase-3或caspase 3,属于caspase家族的CED-3亚家族(CED-3 subfamily),是细胞凋亡过程中的一个关键酶。Caspase 3是哺乳动物细胞中研究zuì多的一个caspase。Caspase 3可以剪切procaspase 3、6、7和9,并可以直接特异性剪切许多caspase底物,包括PARP(poly(ADP-ribose)polymerase),ICAD(Inhibitor of caspase-activated deoxyribonuclease),gelsolin和fodrin等。这些由caspase 3介导的蛋白剪切是细胞凋亡分子机制的重要组成部分。另外,caspase 3在细胞核凋亡过程中也起到了关键作用,包括染色质固缩(chromatin condensention),DNA片段化(DNA fragmentation)等。同时caspase 3对细胞起泡(cell blebbing)也起到关键作用。
本Caspase 3 活性检测试剂盒是基于caspase 3可以催化底物Ac-DEVD-pNA(acetyl-Asp-Glu-Val-Asp p-nitroanilide)产生黄色的pNA(p-nitroaniline),从而可以通过测定吸光度来检测caspase 3的活性。pNA在405nm附近有强吸收。
试剂盒中提供了caspase 3催化产生的黄色产物pNA,可以作为定量caspase 3酶活性的标准品。
试剂盒组分:
裂解液——————8ml
检测缓冲液——————8ml
Ac-DEVD-pNA(2mM)———200μl
pNA(10mM)——————200μl
注意事项:
1. 须自备可以测定A405或A400的酶标仪或容量不超过100μl的分光光度检测杯及相应分光光度计。优先考虑测定A405,如有困难可以测定A400。
2. Ac-DEVD-pNA需尽量避免反复冻融,请注意适当分装。
3. 测定蛋白浓度需Bradford蛋白浓度测定试剂盒(YT034),可向百奥莱博订购。建议样品用水稀释1倍后再用Bradford法测定蛋白浓度,以降低DTT对蛋白浓度测定的干扰。
4. pNA(中文名为4-硝基苯胺)有毒,请注意小心防护。pNA(10mM)在4℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内,可以20-25℃水浴温育片刻至全部融解后使用。
5. 本试剂盒的裂解液可以和百奥莱博的其它caspase活性检测试剂盒的裂解液通用,即本试剂盒裂解液制备的蛋白样品可以用于百奥莱博其它caspase活性检测试剂盒的检测。
储存条件:-20℃。

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货号
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名称
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规格
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YT120
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细胞凋亡DNA断裂片段提取试剂盒
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50次
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YT133
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Annexin V-EGFP细胞凋亡检测试剂盒
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20次|50次
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YT143
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Caspase 8 活性检测试剂盒
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20次|100次
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YT157
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CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒
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2000次
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SNM510
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Caspase-9活性检测试剂盒(分光光度法)
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100T|50T|20T
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SNM515
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DNA银染试剂盒
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20T
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