特别提示:包括即用型免疫组化试剂盒(小鼠源IgM型一抗)在内,本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
产品名称:即用型免疫组化试剂盒(小鼠源IgM型一抗)
英文名称:Instant Immunohistochemistry Kit For Primary Antibody From Mouse IgM
产品货号:ZN1836
产品规格:80T|160T
本试剂盒采用SABC系统,适于一抗为小鼠来源的IgM型抗体。SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素对生物素分子有高的亲和力,是一般抗原抗体亲和力的一百万倍,等电点 pI=6.0~6.5,对组织和细胞的非特异吸附很低。根据研究,SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶可以保证SABC具有很高的敏感性。所以SABC兼具高敏感性,低背景和操作简便等优点。百奥莱博采用独特方法生产的SABC不仅有很强的信号放大作用,而且非常稳定。
试剂盒组成:
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组分
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规格
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5%BSA封闭液
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6ml/12ml
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生物素标记山羊抗小鼠IgM
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6ml/12ml
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SABC
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6ml/12ml
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保存条件:4℃可保存一年,应避免冷冻。
石蜡片染色步骤:
1. 石蜡切片,常规脱蜡至水。
2. 3%H2O2去离子水室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶活性。PBS冲洗,5分钟×3次。
3. 根据需要选择抗原修复方式及强度。可热修复、酶修复或不修复。
4. 封闭。5%BSA封闭液 37℃孵育30分钟,甩干,勿洗。
5. 滴加一抗(小鼠 IgM),37℃孵育1-2小时或4℃过夜。PBS冲洗,5分钟×3次。
6. 滴加生物素标记山羊抗小鼠 IgM,37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
7. 滴加 SABC,37℃孵育30分钟。PBS冲洗,5分钟×3次。
8. 显色:镜下控制反应时间。显色剂可选DAB(ZN1968)或AEC(ZN1963)。自来水充分冲洗。
9. 根据需要进行苏木素(ZN1971)复染,染色时间为0.5-2分钟。脱水,透明。
10. 选用中性树胶,水溶性封片剂(ZN2946)或其他适当的封片剂封片。
建议:
1. 热修复可选用枸橼酸盐缓冲液(ZN1955)、EDTA抗原修复液(ZN1951)、PBS缓冲液、TBS缓冲液(ZN1953)等作为抗原修复液。
2. 酶修复可选用复合修复液(ZN1952)、抗原修复液Ⅰ(ZN1954,与热修复配合使用)、胰蛋白酶(ZN2944)、胃蛋白酶(ZN2945)消化组织。
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名称:抗His标签抗体琼脂糖介质
货号:WE0330
规格:100μl|500μl
抗His标签免疫亲和介质是将抗His标签的单克隆抗体共价偶联到琼脂糖上,这种琼脂糖能进行免疫沉淀或者免疫共沉淀,能检测包含有His标签的蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成多肽序列
应用范围:IP
名称:WB转印滤纸(12.5cm×12.5cm,100张/包)
货号:ZN1897
规格:100张
Western Blotting快速蛋白转移垫
产品保存:常温保存,一年有效
产品说明:
Western blot 技术是在研究实验室常规和通用的一项技术,其伴有三个主要缺点。,转移蛋白至蛋白结合膜花费时间太长; 第二,转移效率不恒定; 第三,转移高分子量蛋白会出现一些问题。其它的缺点包括 :转移设备过热,由于电流过大引起电能不足和印迹三明治组装杂乱等。
根据顾客长期反馈的要求,目前向科研工作者推出 快速转移垫,能够有效解决上述的问题.每块转移垫减少转移时间大于 50%,并且持续率的转移。该项产品在不影响转移效率的前提下,允许使用较低浓度的转移缓冲液,从而避免了过热和电能不足。本转移垫在技术上结合了半干转移的方便和湿转的性,明显减少了缓冲液的使用量。
选用此有效垫,确保了你的Western blot 高度有效,快速简便,避免了大分子蛋白转移过程引起的各种问题。
名称:Western Blotting DAB显色法检测试剂盒(黄色)(小鼠IgG)
货号:ZN1935
规格:1盒
工作原理:聚合标记法是一种酶标记方法,其敏感性比普通酶标法有明显提高。用于 Western Blotting的免疫学检测,更能体现其优点。不仅能大量地节约一抗,更重要的是使条带更清晰,甚至能检测出普通酶标法无法检测出的微量条带。DAB 是过氧化物酶zuì重要的显色剂之一,反应产物为不溶于水、二甲苯和醇的棕色沉淀物,适合于免疫印迹的显色反应。本产品采用特殊配方,具有操作简单,储存稳定,信号灵敏度高,持续时间长,背景低,结果易保存等优点。
保存条件:-20℃冷冻保存。DAB 显色试剂应避光保存。
有效期:一年。
试剂盒的内容:
(1)封闭试剂:10 g 蛋白干粉×2 包。
(2)浓缩抗体稀释液:20 ml×1 瓶,为10倍浓缩液。
(3)聚合过氧化物酶标记山羊抗小鼠IgG0.2ml,效价 1:200-400。亲和纯化抗体,经聚合法标记过氧化物酶。
(4)DAB 显色试剂,含:
显色剂 A:DAB×40倍浓缩液,3ml。
显色剂 B:H2O2×40倍浓缩液,3ml。
显色剂 C:×40倍 TBS 浓缩缓冲液,3ml。
使用说明:
需要而未提供的试剂和器材:
1.转印了蛋白样品的NC 膜或PVDF 膜:通过 SDS-PAGE 凝胶电泳分离蛋白质抗原,将 PAG 胶上的蛋白质转印到硝酸纤维素膜(NC膜)或PVDF 膜上。
2.稀释缓冲液:使用中性稀释缓冲液即 0.02 M PBS或0.02M TBS(AR0144)配制封闭液和抗体稀释液。0.02 M PBS(pH7.2-7.6):1000 ml 蒸馏水加 Na2HPO4 2.8 g ,NaH2PO4 0.4 g,NaCl 8.5 g。如果用的是含水磷酸盐,应加上分子式中水的含量。0.02M TBS(pH7.2-7.6):1000ml 蒸馏水中加 Tris 2.42g,NaCl 9g; 纯乙酸或浓盐酸调节 pH 值(7.2-7.6)。
3.洗涤缓冲液:每 1000ml 中性稀释缓冲液中加入 0.5 ml Tween20 即可。
4.一抗:选择适合的一抗,用抗体稀释液稀释相应的一抗,一般特异性抗体工作浓度为1μg/ml,具体的稀释度取决于特异性的一抗和膜上的抗原的量。
5.摇床:膜的封闭、抗体孵育和洗涤都需平稳摇晃,需在摇床上操作。
6.相机:记录结果。
操作程序:
1.通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白样本和分子量标准。
2.将蛋白样本转移至硝酸纤维素膜或PVDF 膜上。
3.封闭硝酸纤维膜:用封闭蛋白干粉 2 g,加稀释缓冲液 100 ml,20-37℃封闭 1-2 小时。用量以浸没整张膜为准。
4.用洗涤缓冲液洗涤硝酸纤维素膜 5分钟,1次。
5.配制抗体稀释液:取 90 ml 稀释缓冲液加 1 g 封闭蛋白干粉和 10 ml浓缩抗体稀释液即可。一抗、二抗均用此稀释液稀释。
6.硝酸纤维膜孵育一抗:用抗体稀释液稀释相应的一抗,一般特异性抗体浓度 1μg/ml,20-37℃孵育2 小时左右。如果缺乏特异性的条带或阳性不强,应提高一抗的浓度;如果有非特异性的条带,应提高一抗的稀释度。
7.用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维素膜 3次,每次 5分钟。
8.硝酸纤维膜孵育二抗:用抗体稀释液稀释相应的酶标二抗,效价 1:200-400。37℃孵育一个半小时左右。用户可根据实际染色情况对稀释度做适当调整。
9.用洗涤缓冲液振荡洗涤硝酸纤维膜 4次,每次 5分钟。
10.DAB 显色:使用 DAB 显色试剂。按每 2 ml 蒸馏水加显色剂 A,B,C 各1滴,混匀。混匀后加至膜上。室温显色。一般显色 1-30分钟。
若无背景出现则可继续显色。显色后用蒸馏水洗涤以终止反应。
11.观察,照相。
注意事项:
1.试剂频繁使用时置4℃,不常使用时置-20℃。显色剂 A 需置-20℃冷冻保存。如有结晶析出,应确保结晶完全溶解再行使用。
2.显色工作液应新鲜配制。

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货号
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名称
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规格
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YT068
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Western洗涤液(WB洗涤液)
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250ml
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YT072
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Western一抗二抗清除剂(弱碱性)
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250ml
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YT082
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EDTA-柠檬酸钠抗原修复液(40X)
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125ml
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YT887
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YT?免疫染色一抗稀释液
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100ml
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SY0756
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DAB显色试剂盒紫蓝色(WB)
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1KIT
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ZN1888
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SDS-PAGE凝胶制备试剂盒(30-50 gels)
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1盒
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ZN1919
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酪蛋白TBS缓冲系统封闭液(干粉)
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1包
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