MQ0008 XL1-Blue化学感受态细胞

北京百奥莱博供应的XL1-Blue化学感受态细胞用于科研目的，我公司的XL1-Blue化学感受态细胞品质上佳，经过多年的开发生产，已然非常成熟，欢迎广大新老客户订购。

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特别提示：包括XL1-Blue化学感受态细胞在内，本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！

产品名称：XL1-Blue化学感受态细胞
英文名称：XL1-Blue Chemically Competent Cell
产品货号：MQ0008
产品规格：10×100μl/50×100μl

XL1-Blue菌株能保证高拷贝质粒稳定复制，recA1和endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。
hsdR17突变导致EcoK核酸内切酶系统缺失，增强了外源DNA的稳定性和提取质量。lacIqZΔM15的存在使XL2-Blue菌株可用于蓝、白斑筛选。此菌株具有四环素抗性。
XL1-Blue感受态细胞经特殊工艺制作，经pUC19质粒检测转化效率>1×109cfu/μg。
保存条件：-80℃
基因型：
recA1 endA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 supE44(rk-,mk+)，relA1 lac [F" proAB lacIqZ∆M15：Tn10(tetr)]
操作说明：
1.XL1-Blue感受态细胞放置冰中融化(或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速插入冰中)，加入目的DNA(质粒或连接产物)并用手拨打EP管底轻轻混匀，冰上静置25分钟。
2.42℃水浴热激45秒，迅速放回冰上并静置2分钟，晃动会降低转化效率。
3.向离心管中加入700μl不含抗生素的无菌培养基(2YT或LB)，混匀后37℃，200rpm复苏60分钟。
4.5000rpm离心一分钟收菌，留取100μl左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的2YT或LB培养基上。
5.将平板倒置放于37℃培养箱过夜培养。
注意事项：
1.感受态细胞zuì好在冰上融化。
2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。
3.转化高浓度的质粒或率的连接产物可相应减少zuì终用于涂板的菌量。

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名称：土霉素盐酸盐溶液
货号：BTN120696
规格：10mL
本产品为溶于水:乙醇(2:1)混合液浓度为100mg/mL的土霉素盐酸盐溶液，参考浓度为50mg/mL。土霉素烟酸盐(盐酸土霉素；氧四环素盐酸盐；地霉素；Oxytetracycline hydrochloride)，分子式：C22H24N2O9·HCl，分子量是：496.89，CAS号：2058-46-0，土霉素盐酸盐能阻止氨基酰-tRNA与30S亚单位结合，从而抑制蛋白合成。抗菌谱：革兰氏阴性和阳性细菌。

储存条件：低温运输，-20℃避光保存，有效期6个月。

名称：N端YFP标签融合蛋白质粒(黄色荧光蛋白)
货号：YT478
规格：1μg
本质粒是哺乳动物细胞表达质粒，用于表达N端含YFP(Yellow Fluorescent Protein, 黄色荧光蛋白)标签的融合蛋白。该质粒含有CMV启动子，可以启动目的蛋白在细胞中的表达。在多克隆位点的前面有一个YFP的完整编码序列，因此在多克隆位点根据阅读框插入目的基因就可以表达N端含有YFP标签的融合蛋白。利用YFP的荧光特性可以比较容易地观察融合蛋白的表达水平和细胞内定位，也可以利用YFP抗体来检测或免疫沉淀融合蛋白。YFP与GFP高度相似，可以尝试用GFP抗体检测YFP。该质粒为卡那霉素抗性。转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。

本质粒质粒的主要信息如下：

Feature Nucleotide	Position
CMV promoter	1-602
T3 promoter and T3 primer binding site	620-639
YFP	677-1393
Multiple cloning site	1394-1483
T7 promoter and T7 primer binding site	1503-1524
SV40 polyA signal	1536-1919
f1 origin of ss-DNA replication	2057-2363
bla promoter	2388-2512
SV40 promoter	2532-2870
Neomycin/kanamycin resistance ORF	2905-3696
HSV-thymidine kinase (TK) polyA signal	3697-4155
pUC origin	4284-4951

本质粒(5003bp)的图谱如下：


使用说明：
1. 次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定，或通过测序进行鉴定。
2. 本质粒在其多克隆位点适当酶切后可以插入待表达的目的基因，构建的质粒可以用常规方法转染细胞。

储存条件：-20℃。

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