48T/96T ELISA试剂盒

大鼠神经肽Y说明书（NP-Y）Elisa试剂盒代测，素尔提供，出售3万多种类试剂盒，质量稳定，重复性好，价格优惠，与五十多家重点科研单位、高校合作，深得客户认可。

 素尔（suer）生物是一家专注于生命科学技术领域的高科技企业，在广大用户的帮助和支持下，经过不懈的努力， 已成为国内生命科学领域产品的主要供应商之一，一站式采购商城，代理亚洲、欧美国家300多种品牌，200万种以上产品。公司的服务和业务网络遍及全国，在同行获得一致好评。

公司主营三大产品：（一）自主创新的Deco品牌Elisa试剂盒，采用进口原料试剂，用先进专li技术，严格按照标准生产方案，预包被微孔板的批内和批间变异系数均小于10 ％，完善的售后服务和免费的技术支持免去您的后顾之忧，价格优惠，为广大客户提供更方便，更标准的产品服务。（二）2014年素尔生物正式成为荷兰SCL胎牛血清大陆总代理，囊括南美源胎牛血清和澳洲源胎牛血清，胚胎干细胞专用胎牛血清，产品质量好、价格低，和同类产品相比竞争力强，素尔同样常备国内外知名品牌血清/胎牛血清，囊括Hyclone胎牛血清、Hyclone马血清、Gibco胎牛血清、Gibco新生牛血清、Ausgenex特级胎牛血清、Gemini血清、PAA优级胎牛血清、clontech血清、Biochrom胎牛血清等，干冰运送，顺丰寄出。（三）拥有完善的细胞库管理体系，供应上万种类细胞株细胞系，公司细胞技术60%为硕士和博士学历，其中明星产品有：DC2.4细胞、RAW264.7细胞、COV434细胞、HO-8910细胞、A2780细胞、SK-OV-3细胞、OVCAR-3细胞、OVCA433细胞、HEK-293-6e细胞、FRO细胞、HEPG2.2.15细胞、HL-7702细胞、L-02细胞、M-ICC12细胞、143B细胞、HOS细胞、M4e细胞、M2e细胞、TU686细胞、TU212细胞、vero细胞、SW48细胞、SW480细胞、NCCIT细胞、B16-F10细胞、HK-1细胞、Hep2细胞、C666-1细胞、HNE1细胞、HNE1/DDP细胞、capan-1细胞、vero e6细胞、A375细胞、Hs294T细胞、HSC-LX-2细胞、LOVO细胞、MKN-28细胞、RL952细胞、Hela细胞、A549细胞、Ishikawa细胞、EBC-1细胞、H1993细胞、H1993细胞、Hep-2细胞、NCI-H441细胞、LS174T细胞、NCCIT细胞、capan-1细胞、Hep3B细胞、HUVEC细胞、SW116细胞等。

素尔（suer）生物以客户为核心，以产品质量求生存，以售后服务求信誉。我们通过不断改进来提高效率，绝不以牺牲品质作为代价。“诚信、创新、严谨、专业”愿以饱满的热情期待各界朋友携手合作，共创辉煌的明天！

1、 联系素尔客服QQ：117:206955 或致电 索取ELISA实验订单和样本信息单表格，详细填写您所需要的指标名称，检测种属，实验模型，样本编号，并且标注后续是否还有实验，以便我们及时保存好您的样本。

2、 联系客服索取我们公司地址，邮寄标本，放入干冰或充足冰袋，填写好的ELISA实验订单和样本信息单纸质版，随样本一起邮寄。

3、 收到样本后，编号不清楚的地方会及时和您沟通联系，3-5个工作日，试剂盒详细说明书（试验中需要的仪器、耗材、试剂、操作步骤，结果计算方法）同原始数据，和实验报告，发至您邮箱。

4、 确保售后，您对数据有质疑或不清楚的地方，会及时和您沟通。

大鼠神经肽Y说明书（NP-Y）Elisa试剂盒代测 原理：

酶联免疫吸附剂测定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）的基本原理是：①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开，后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据颜色反应的深浅刊物定性或定量分析。

ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗体。该法适于测定细胞培养上清、血清、血浆及组织液中的样本，干扰小可以测到每毫升纳克水平的细胞因子（或受体）的水平。

大鼠神经肽Y说明书（NP-Y）Elisa试剂盒代测 需要仪器及耗材：

酶标仪：芬兰（Labsystems Multiskan MS）公司产品

洗板机：芬兰（Thermo Labsystems）公司产品

离心机：微量高速离心机（国产）

移液器：吉尔森P型移液器(Pipetman)产品

培养箱：隔水式恒温培养箱（国产）产品

大鼠神经肽Y说明书（NP-Y）Elisa试剂盒代测 操作流程：

1、标准品的稀释与加样：标准品按照说明书稀释好五个梯度，各个梯度每孔加样量都为50Μl；

2、加样：分别设空白孔、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μL，然后再加待测样品10μL。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀；

3、温育：用封板膜封板后置37℃温育30min；

4、配液洗涤：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用；小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30sec后弃去，如此重复5次，拍干；

5、加酶：每孔加入酶标试剂50μL，空白孔除外；

6、温育：用封板膜封板后置37℃温育30min；

7、洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30sec后弃去，如此重复5次，拍干；

8、显色：每孔先加入显色剂A50μL，再加入显色剂B50μL，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15min；

9、终止：每孔加终止液50μL，终止反应；

10、测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15min以内进行。

计算：以标准物的浓度为纵坐标，OD值为横坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。

大鼠神经肽Y说明书（NP-Y）Elisa试剂盒代测 操作注意事项：

1、试剂价格较高，实验前有任何疑问及实验中有任何问题请及时与本公司取得联系，避免造成损失！

2、试剂盒应在2～8℃冰箱内储存，且注意不可冻结。

3、请勿使用过期的试剂盒或其中的组件或混用不同批次试剂盒的试剂，以免降低灵敏度。

4、0标准品的A450nm<0.6时，表示试剂可能变质，请勿使用；显色剂变蓝，表明已变质，请勿使用。

5、将试剂盒内试剂稀释或者改变其浓度将会影响检测结果。

6、当从冰箱中取出试剂盒进行检测时，应将试剂盒于室温(20～26℃)下放置半小时以上，使其温度回升至室温。

7、试剂盒内的各种试剂在使用前应充分摇匀(酶标物溶液轻摇即可，不可起泡)，以确保试剂浓度的均一性。

8、微孔条按需使用，将剩余的微孔条立即放入包装袋中，于2～8℃干燥密封的条件下保存。

9、向酶标板微孔中加入试剂或样品时，为确保操作的一致性，加液时枪头应垂直悬空至板孔正中央，保证样液应加至孔中央，动作迅速，避免枪头接触孔壁，避免样液溅到孔壁或溅出微孔，造成不必要的非特异性吸附或损失。特别是加入共同试剂(如酶标抗体)，由于可能会用到排枪，该操作尤为重要。

10、加样完毕后，应将酶标板至于振荡器或用移液器枪头轻敲，使孔中液体充分混匀，但需注意的是切勿不可将孔中的液体摇出，影响检测结果。

11、样品前处理注意事项：尿样，若样品中出现浑浊或沉淀，可将其至于离心机中适当离心，取其上清液作检测样品;肝样或肉样，请参照说明书提供的方法进行提取。于水浴锅中提取时，水浴应始终保持沸腾，若由于其他原因达不到所需温度(但不得低于85℃)，可适当延长提取时间，直至组织样品明显变色为止(由红色变黄褐色或白色)，且趁热进行离心，离心力保持在4000g/r以上以保证上清液澄清。

12、如果选择室温条件下反应，在整个检测过程中，应保持温度在20～26℃之间，同时为了避免反应过程外界环境因素的影响，酶标板上应贴上一层薄膜或置于封闭环境中避光反应；如果选择37℃条件下反应，建议在水浴锅中进行，且酶标板上也应贴上一层薄膜，防止试剂的挥发。

13、洗板时如果选择蒸馏水作为洗液，要保证洗涤用水的pH范围在6～8之间；如果水质较差请选择试剂盒配备的浓缩洗液稀释后作为洗液。为了确保洗涤的一致性，建议洗涤时采用专门配置的洗板机，反复洗涤6次，每次洗涤的体积以溢满微孔为宜(约300μL)。如用其他方法洗板时，请注意操作方法，避免清洗不彻底或产生交叉污染。

14、在加入酶底物液进行显色时，可向板孔中先加50μL的底物缓冲液，然后再加入50μL的底物液(注意加完后混匀液体)，或者将底物缓冲液和底物液充分混匀后(混匀容器应洁净，现配现用)，再向每孔中加入100μL的混合液。

15、终止液含有1mol/L硫酸溶液，避免皮肤直接接触，操作时要注意安全。

16、推荐使用高质量的吸头及移液器，且吸头不可反复使用(难以清洗干净)。

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